刘静娴
- 作品数：5 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：江苏省普通高校研究生科研创新计划项目江苏省“青蓝工程”资助基金江苏省“青蓝工程”基金资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 含有非天然氨基酸的内皮抑素突变体及其衍生物
- 本发明涉及含有非天然氨基酸的内皮抑素突变体及其衍生物，特别是涉及使用原核表达系统，在不影响其活性的前提下，表达了可溶性的带有非天然氨基酸的内皮抑素。这种内皮抑素突变体被赋予了新的化学性质，可以特异性的通过非天然氨基酸的侧...
- 姚文兵高向东陈明杰刘静娴田浤
- 文献传递
- 对叠氮-L-苯丙氨酸盐酸盐的合成及其在重组人内皮抑素中的定点引入
- 2012年
- 以对硝基-L-苯丙氨酸为原料,通过5步反应制备纯度较高的对叠氮-L-苯丙氨酸盐酸盐。利用构建好的重组表达载体和正交氨酰tRNA合成酶/tRNA(MjTyrRS/tRNA)系统将对叠氮-L-苯丙氨酸(pAzPhe)定点(31位)引入到人内皮抑素分子中,表达人内皮抑素中突变体——rhEs31m。对分离纯化所获得的目的产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定,突变体rhEs31m电泳纯度达90%以上,同时可被抗人内皮抑素抗体特异性识别。通过MTT法检测rhEs31m体外抗人脐静脉内皮细胞增殖活性,结果显示:与野生型rhEs相比,rhEs31m保留了大部分生物活性。本实验表明单个pAzPhe的定点引入并未破坏重组人内皮抑素的空间结构和生物活性。
- 郭林峰徐云根田浤刘静娴姚文兵
- 可诱导增加拷贝数的质粒及其用于筛选正交性琥珀抑制tRNA
- 本发明涉及一种通过诱导增加拷贝数的质粒载体及其构建方法，该重组质粒，包括载体及基因片段，所述的载体含有两个复制起始点，分别为F因子复制起始点和噬菌体P1裂解复制起始点；所述的基因片段包括含有启动子和终止子的反密码子为琥珀...
- 田浤姚文兵刘静娴高向东
- 文献传递
- 含有对叠氮苯丙氨酸的人内皮抑素的表达及纯化
- 2012年
- 优化定点引入对叠氮苯丙氨酸的詹氏甲烷球菌属正交酪氨酰tRNA合成酶/tRNA系统,使用优化后的正交系统在大肠杆菌内表达并纯化在特定氨基酸位点引入对叠氮苯丙氨酸的人内皮抑素突变体。首先将正交酪氨酰tRNA合成酶启动子-15区的TATAA序列突变为TTAA序列,同时将正交酪氨酰tRNA合成酶的第286位天冬氨酸突变为精氨酸以提高对抑制型tRNA反密码子CUA的识别力。然后将质粒pST和pET32a-mhEn转化到大肠杆菌DH10BDE3中得到重组工程菌。该重组菌在含有对叠氮苯丙氨酸的培养基中培养,并经IPTG诱导表达人内皮抑素突变体。利用镍亲和色谱纯化获得人内皮抑素突变体,纯度大于90%。通过对正交酪氨酰tRNA合成酶/tRNA系统的优化,有效提高了系统引入对叠氮苯丙氨酸的效率,人内皮抑素突变体的表达量有了显著提高。
- 刘静娴田浤姚文兵陈海尹骏高向东
- 含有非天然氨基酸的内皮抑素突变体及其衍生物
- 本发明涉及含有非天然氨基酸的内皮抑素突变体及其衍生物，特别是涉及使用原核表达系统，在不影响其活性的前提下，表达了可溶性的带有非天然氨基酸的内皮抑素。这种内皮抑素突变体被赋予了新的化学性质，可以特异性的通过非天然氨基酸的侧...
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- 文献传递
