周波
- 作品数：9 被引量：7H指数：2
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科委科技攻关项目安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 带有进化免疫球蛋白结合分子的HIV蛋白酶底物分子、其制备方法及应用
- 本发明涉及新型HIV蛋白酶切割模型的体系构成、制备方法及应用。本发明公开一种重组的带有进化免疫球蛋白结合分子的HIV蛋白酶底物分子，它是SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的蛋白、或其保守性变异蛋白。本发明还公开了上述...
- 潘卫贾建安周波蒋少华陈秋莉曹洁赵平潘欣温宗梅戚中田
- 文献传递
- HIV Gag CAP2NC噬菌体蛋白酶切割模型的构建被引量：1
- 2007年
- HIV蛋白酶(protease,PR)耐药突变的大量出现严重地影响了AIDS的治疗.应用突变PR对展示HIVPR靶序列随机文库的噬菌体进行切割筛选,可获得突变PR的敏感噬菌体,该噬菌体可用于针对HIVPR耐药突变株的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor,PI)新药筛选.为了探索这一可能性,将包含HIVPR靶位点P2/NC序列的Gag蛋白CAP2NC片段展示于噬菌体表面,并在该片段的N端连接一可与人免疫球蛋白分子特异结合的固相化标签序列LD3,将该噬菌体固定于人免疫球蛋白包被的酶标板上,用HIVSF2PR进行切割,用抗M13噬菌体酶标抗体ELISA法检测未被切割的剩余噬菌体以反映切割效果.结果表明,所构建的噬菌体能被HIVPR有效切割,最大切割效应可达80%以上,其ELISA检测值明显下降,并且该切割效应与HIVPR呈明显的量效关系,能被PI类药物Indinavir(IDV)特异抑制.首次成功构建了展示HIV Gag CAP2NC片段的噬菌体蛋白酶切割模型,不仅可为研究HIVPR的耐药性变异及其靶序列的适应性变异提供一新的研究平台,同时也为构建一种全新的PI类药物,尤其是针对耐药的PI类药物大规模体外噬菌体筛选模型打下基础.
- 贾建安周波蒋少华陈秋莉赵平潘欣温宗梅邓松华卢洪洲潘卫
- 关键词：人类免疫缺陷病毒蛋白酶抑制剂药物筛选噬菌体展示
- HIV蛋白酶抑制剂体外噬菌体筛选模型的建立及初步研究
- 近年来，HIV感染在全球呈迅猛上升趋势，严重威胁着人类的健康。目前临床治疗AIDS主要运用高效抗逆转录病毒疗法(highlyactiveanti-retroviraltherapy,HAART)，可以明显减少AIDS相关...
- 周波
- 关键词：人类免疫缺陷病毒1蛋白酶抑制剂噬菌体展示抗逆转录病毒疗法HIV疫苗
- 文献传递
- 微动力负压护创敷料对兔Ⅱ度烧伤创面愈合的影响
- 目的：观察微动力负压护创敷料对兔Ⅱ度烧伤创面愈合的影响。 方法：健康成年新西兰大耳兔8只，采用电子恒温电烫仪90℃烫背部12s造成Ⅱ度烫伤创面，每只兔背部左右对称共烫伤四个Ⅱ度烫伤创面。采取自身对照，一侧为微动力负压护...
- 周波
- 关键词：组织水肿创面愈合
- 文献传递
- HIV-1 Gag蛋白P2/NC蛋白酶切割位点序列的随机化及噬菌体展示被引量：2
- 2005年
- 目的:构建HIV-1 Gag PR蛋白P2/NC切割位点序列随机化的噬菌体展示文库,研究HIV-1蛋白酶(protease PR)耐药性突变对其敏感切割序列的影响。方法:PCR扩增制备重组HIV-1gag基因上的CAP2和NC片段,在CAP2片段5′端引入StuⅠ酶切位点,3′端PR切割位点处的氨基酸序列进行随机化;在NC片段5′端设计重叠区域,3′端引入SalⅠ酶切位点。应用Overlapping PCR将CAP2和NC片段拼接并克隆于噬菌体展示载体LD3-pCANTAB5S上,建立HIV-1PR靶蛋白CAP2和NC之间切割位点随机化的噬菌体展示文库。结果:该噬菌体展示文库库容量为2.1×106,滴度为3.0×1012TU/ml,CAP2/NC片段插入率为52.1%;12个样品的序列分析显示切割位点中随机化的核苷酸与氨基酸均呈随机性分布;10个阳性单克隆噬菌体CAP2/NC-LD3-pCANTAB5S样品中9个与IgG特异结合。结论:成功地对HIV-1PR靶蛋白CAP2和NC之间切割位点进行了随机化并展示于噬菌体表面,构建了其噬菌体展示文库,为筛选耐药性突变的PR敏感切割序列及构建蛋白酶抑制剂噬菌体筛选模型打下基础。
- 周波贾建安温宗梅邓松华蒋少华陈秋莉潘欣潘卫
- 关键词：HIV-1蛋白酶随机化
- 噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库的构建被引量：1
- 2006年
- 目的构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,研究IgA结合分子结构与功能的关系。方法基因合成IgA亲和体ZA1、ZA2片段。片段两端引入Kpn I酶切位点,3′端引入随机连接肽序列,Kpn I酶切,随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S的Kpn I克隆位点上,转化大肠杆菌TGI,辅助噬菌体M13K07拯救,构建噬菌体展示随机组合文库。结果基因合成IgA亲和体;构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,容量为3·4×107,滴度为1·6×1012TU/L;文库中含79%以上的阳性克隆;序列分析显示组合文库由ZA1、ZA2随机组合而成,连接方式符合随机连接的特点,各亲和体之间连接肽序列也呈随机分布。结论合成IgA亲和体,构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,该文库库容量、多样性和随机性可满足体外分子进化研究的要求。
- 温宗梅潘卫张玉侠周波潘欣陈秋莉周霞贾建安蒋少华邓松华
- HIV-1 HXB2株蛋白酶在大肠杆菌中的表达、纯化及鉴定被引量：2
- 2006年
- 目的原核表达、纯化HIV-1型HXB2株蛋白酶(Protease,PR),用于对HIV-1GagP2/NC蛋白酶切割位点序列随机突变的噬菌体展示文库的切割筛选。方法根据HIV-1HXB2株PRDNA序列设计引物,用重叠延伸PCR方法合成使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1PR的DNA编码序列,用T/A克隆法将其插入pMD18-T载体进行测序。将HIV-1PRDNA克隆至原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中进行诱导表达,用Ni-NTA亲和柱对表达蛋白进行纯化,SDS-PAGE鉴定,并用HIV阳性血清进行免疫反应性的鉴定。结果合成的使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1PR的DNA编码序列,经测序显示其编码氨基酸序列与原始序列完全一致。所构建的HIV-1PR原核表达质粒pQE30-pr,经IPTG诱导后,表达出相对分子质量为14000的HIV-1PR蛋白,纯化的目的蛋白浓度为7.74mg/ml。ELISA检测该蛋白与HIV阳性血清呈特异性反应。结论已成功合成并克隆了使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1PR的DNA编码序列,经表达及纯化的HIV-1PR蛋白具有免疫学特性。
- 贾建安周波钱宝华蒋少华陈秋莉潘欣赵平任浩温宗梅邓松华卢洪洲潘卫
- 关键词：人免疫缺陷病毒蛋白酶基因表达大肠杆菌HIV-1
- 噬菌体展示耐药突变HIV-1蛋白酶敏感切割位点六肽随机文库的构建被引量：1
- 2007年
- 目的构建耐药性突变HIV-1蛋白酶(protease PR)敏感切割位点序列体外噬菌体筛选模型,研究HIV-1蛋白酶耐药性突变与敏感切割序列的关系。方法用含随机核苷酸序列的引物PCR方法对HIV-1gag基因上的CAP2片段的PR切割位点处的氨基酸序列进行随机化,再将重组CAP2片段和NC片段拼接克隆于噬菌体展示载体LD3-pCANT-AB5S上,建立HIV-1蛋白酶靶蛋白切割位点随机化的噬菌体展示文库。结果该噬菌体展示文库库容量为2.6×106,滴度为4.1×1015TU·L-1,CAP2片段插入率为47.8%;序列分析显示切割位点中随机化的核苷酸与氨基酸均呈随机性分布。结论成功地构建HIV-1蛋白酶的敏感切割序列噬菌体筛选文库,为筛选到突变PR敏感切割序列噬菌体及研究耐药HIV-1蛋白酶抑制剂与突变PR的关系打下基础。
- 卢海妹周波潘卫贾建安王锦红温宗梅何俊陈露邓松华
- 关键词：人类免疫缺陷病毒-1蛋白酶耐药突变
- Lp-PLA2、MA与非心源性急性缺血性脑卒中静脉溶栓疗效的相关性
- 2024年
- 观察急性缺血性脑卒中(AIS)静脉溶栓患者临床疗效,分析临床疗效评估与脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、血栓最大振幅(MA)水平之间的相关性。方法 选取2022年8月至2023年7月在安徽医科大学附属巢湖医院接受rt-PA或尿激酶溶栓的71例非栓塞性急性缺血性脑卒中患者作为研究对象,根据患者溶栓治疗后7d NIHSS评分下降幅度分为无效组23例,有效组48例;有效组再依据NIHSS评分分为显效组27例,基本治愈组21例。三组溶栓患者均于24h内完善血清学检查。比较三组一般及临床资料,分析Lp-PLA2、MA与静脉溶栓疗效的相关性。结果 无效组、显效组、基本治愈组三组间在性别、年龄、既往脑梗死病史、吸烟史、高血压、糖尿病、总胆固醇、中性细胞比、血小板计数比较上差异无统计学意义;基本治愈组Lp-PLA2水平低于无效组(P<0.05),基本治愈组MA水平低于无效组、显效组(P<0.05);Lp-PLA2、MA水平是AIS静脉溶栓治疗的独立危险因素。结论 AIS溶栓患者血清Lp-PLA2及MA水平与静脉溶栓疗效显著相关。
- 周波祝善尧
- 关键词：LP-PLA2MA急性缺血性脑卒中静脉溶栓
