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一种在大肠杆菌中生产可溶性重组蛋白质的方法及其应用: 本发明属于基因工程技术领域。一种在大肠杆菌中将目标蛋白质表达菌株在低温下和分子伴侣一起共表达，从而非常有效地防止目标蛋白质包涵体的形成，大量增加可溶性产物的产量的方法。利用该技术方法能够显著增加提高可溶性重组人内皮抑素和...; 华子春徐寒梅孙启明; 文献传递

融合蛋白ATF-L-VAS在毕赤酵母中的表达、纯化及初步活性研究: 1目的：在毕赤酵母表达系统中实现融合蛋白ATF-L-VAS的组成型胞外分泌表达,优化表达条件,并进行分离纯化及其抑制血管生成活性研究.2方法：以原核表达载体pNJU-ALV为模版,PCR扩增得到ALV编码片段,纯化后进行...; 徐倩孙启明李建平华子春; 关键词：PASTORIS 组成型 CAM

人血管内皮抑制素vasostatin_(120-180)在大肠杆菌中的表达纯化及初步的抗血管生成活性研究被引量：2: 2008年; 目的:在大肠杆菌中克隆和表达人源血管内皮抑制素vasostatin120-180(VAS)基因,并进行分离纯化及抑制新生血管生成活性鉴定。方法:根据大肠杆菌偏爱密码子,应用化学合成和分子克隆方法得到人源血管内皮抑制素120-180片段(即VAS)的编码基因。通过PCR和限制性内切酶消解,将VAS编码基因克隆入大肠杆菌表达载体pET28a中,并在BL21(DE3)菌株中经IPTG诱导、表达带有His融合标签的His-VAS重组蛋白。VAS蛋白的表达水平大约占细菌总蛋白的45%,大多数目的蛋白以包涵体形式存在,经过体外包涵体变性、复性及纯化,采用SDS-PAGE分析鉴定,用鸡胚尿囊膜血管生成抑制试验进行重组蛋白活性的生物活性鉴定。结果:经DNA序列分析鉴定,重组质粒pET28a-VAS构建成功,IPTG诱导后的融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,Western blotting分析并鉴定了VAS的分子属性。通过鸡胚尿囊膜试验验证,重组VAS蛋白能够很好地抑制微血管生成。结论:获得高效表达的、高纯度的VAS,为VAS进一步的功能分析和抑制血管生成活性研究奠定了基础。; 徐倩孙启明华子春; 关键词：偏爱密码子包涵体变复性

一种在大肠杆菌中生产重组血管抑素的方法及其应用: 本发明属于生物工程技术领域。本发明提供了一种在大肠杆菌中生产可溶性的、有生物活性的重组人血管抑素的工艺和分离纯化方法。利用本发明表达和纯化的重组人血管抑素能够特异性、剂量依赖性地抑制内皮细胞的增殖，在鸡胚尿囊绒膜动物实验...; 华子春孙启明; 文献传递

微生物基因工程可溶性表达及产物后加工新技术: 华子春张红霞孙启明方雷董晨郑伟娟; 微生物表达体系具有操作简便、价格低廉、表达水平高等优点，是基因工程首选表达体系。外源蛋白质在细菌中表达、易形成无生物活性的包涵体、须经体外变复性才能获得生物活性，因而成为微生物表达系统进一步应用的制约因素。该项目在“86...; 关键词：; 关键词：基因工程基因表达

微生物基因工程可溶性表达及产物后加工新技术: 华子春张红霞方雷孙启明董晨杨杉郑伟娟袁榴娣陈成徐寒梅范奕自; 微生物表达体系具有生长周期短、操作简便、价格低廉、表达水平高等优点，是基因工程首选表达体系。外源蛋白质在细菌中表达时，易形成无生物活性的包涵体。包涵体必须经体外变复性才能获得生物活性，因而成为限制大肠杆菌表达体系进一步应...; 关键词：; 关键词：重组蛋白质

一种在大肠杆菌中生产可溶性重组蛋白质的方法及其应用: 本发明属于基因工程技术领域。一种在大肠杆菌中将目标蛋白质表达菌株在低温下和分子伴侣一起共表达，从而非常有效地防止目标蛋白质包涵体的形成，大量增加可溶性产物的产量的方法。利用该技术方法能够显著增加提高可溶性重组人内皮抑素和...; 华子春徐寒梅孙启明; 文献传递

1.VAS和变体蛋白ATF-L-VAS的制备及抗肿瘤功能研究;2.大豆转铁蛋白的初步研究: 新生血管的形成是恶性肿瘤的生长、浸润和转移物质基础。使用药物阻止新的血管网络的形成有望有效的治疗肿瘤。本文探索出三种简单有效的方法，制备了较高纯度的人血管内皮抑素Vasostatin的功能结构域VAS。研究发现，低温发酵...; 孙启明; 关键词：血管内皮抑素转基因番茄抗肿瘤功能; 文献传递

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孙启明