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豚鼠气道平滑肌ATP敏感钾通道电流的动力学特性: 2011年; 气道平滑肌的主要作用是调节气道的紧张度和口径,而钾通道开放剂可经ATP敏感钾通道（ATP-sensitive potassiumchannel,KATP通道）使气道平滑肌松弛,此作用能被KATP通道特异性阻断剂优降糖阻断[1]。; 孙红宇邹飞李勃兴陈明; 关键词：ATP敏感钾通道气道平滑肌动力学特性钾通道电流钾通道开放剂平滑肌松弛

豚鼠气道平滑肌的急性分离及K_(ATP)通道单通道电流的记录: 2010年; 目的:建立急性分离豚鼠气道平滑肌的方法,并初步分析ATP敏感钾通道(KATP通道)单通道电流的性质。方法:急性分离出豚鼠3~4级支气管,并用链霉蛋白酶E分散气道平滑肌细胞,应用膜片钳技术的内面向外式记录方法,研究气道平滑肌KATP通道单通道电学性质。结果:成功记录到电导为112.4±5.14 pS的、可被优降糖所阻断的KATP通道单通道电流。钳制电压在0^-60 mV之间,通道电流无整流现象,且未见时间依赖性失活。结论:建立了急性分离豚鼠气道平滑肌的方法,并成功记录KATP通道单通道电流,为进一步研究气道平滑肌KATP通道在呼吸道疾病中的作用提供了基础。; 孙红宇邹飞陈明; 关键词：气道平滑肌急性分离 ATP敏感钾通道

BNIP3干扰质粒的构建及鉴定被引量：1: 2010年; 目的构建大鼠Bcl-2/E1B-19K-interacting protein 3(BNIP3)干扰质粒,研究其对BNIP3蛋白表达水平的影响。方法利用Invitrogen公司在线软件设计大鼠BNIP3(NM_053420)干扰片段,合成互补的单链寡核苷酸,蒋退火后形成的双链克隆入pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR表达载体,连接产物转化感受态细胞,增菌,质粒小量提取并测序。将构建的干扰质粒与大鼠BNIP3表达质粒共转染到HEK293细胞中,采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测对目的基因的干扰情况。结果构建的2个干扰质粒经测序证实序列正确,与BNIP3表达质粒共转染后显著抑制外源性BNIP3的mRNA和蛋白表达。结论成功构建了大鼠BNIP3干扰质粒,为进一步研究BNIP3的功能打下了基础。; 陈明张兴梅李勃兴孙红宇李晓文高天明; 关键词：BNIP3 RNA干扰 HEK293

不同浓度一氧化氮供体对培养海马神经元存活率影响的相关研究: 2006年; 目的:观察不同浓度一氧化氮供体硝普钠对培养海马神经元存活率的影响以及不同类型钾通道阻断剂对硝普钠诱导的神经元死亡的保护作用。方法:实验于2004-11/2005-04在南方医科大学基础医学院神经生物学教研室实验室进行。①取新生两天以内SD大鼠海马组织做神经元分散细胞原代培养,培养第8天时,分别以不同浓度硝普钠(0.01mmol/L,0.1mmol/L,0.5mmol/L,1mmol/L)处理18h,采用MTT法观察硝普钠对神经元存活率的影响。②硝普钠(0.1mmol/L)处理前10min培养液内预先分别给予钾通道阻断剂四乙铵1mmol/L、4-氨基砒碇1mmol/L、Iberiotoxin(IBTX)100nmol/L或paxilline100μmol/L,18h后测定神经元存活率。结果:①低浓度硝普钠(0.01mmol/L)对培养海马神经元存活无影响(P>0.05),增大硝普钠浓度至0.1mmol/L,0.5mmol/L或1mmol/L可引起神经元存活率浓度依赖性地降低(P<0.001)。②硝普钠(0.1mmol/L)处理前10min给予不同类型钾通道阻断剂,广谱钾通道阻断剂1mmol/L四乙铵或A型钾通道阻断剂1mmol/L4-氨基砒碇均不能降低硝普钠诱导的神经元死亡(P>0.05);两种不同的特异性大电导钙激活钾通道阻断剂100nmol/LIBTX或10μmol/Lpaxilline均可完全保护硝普钠诱导的神经元死亡(P<0.001)。结论:一氧化氮供体硝普钠剂量依赖性地诱导培养新生大鼠海马神经元死亡,大电导钙激活钾通道阻断剂对一氧化氮诱导的神经元死亡具有完全保护作用,提示阻断大电导钙激活钾通道可能作为临床治疗缺血性脑损伤的新靶点。; 陈明孙红宇李晓文高天明; 关键词：神经元钾通道阻断剂细胞培养供体存活率

哮喘气道平滑肌K<,ATP>通道电生理特性的改变: 哮喘气道高反应性(BHR)中,气道平滑肌痉挛性收缩是一重要的特征性病变,在哮喘发病中起着举足轻重的作用.而平滑肌的痉挛收缩与细胞膜电位及离子通道的关系密切.由于膜片钳技术的出现及平滑肌细胞急性分离技术的改进,使在分子水平...; 孙红宇; 关键词：哮喘气道平滑肌平滑肌 ATP敏感性钾通道

混合式教学中基于Moodle的生理学网络课程建设探讨被引量：3: 2016年; 网络课程建设是实现混合式教学的重要一环。与传统的精品课程网站相比,在建设网络课程中使用Moodle平台会节省大量的人力、物力、财力,且便于随时掌握学生的学习情况,方便师生交流。在生理学网络课程建设的实践中发现:学生访问量最大的是微课和Scorm课件,应作为课程建设的重点;微课时长并不是影响学生访问微课的决定性因素。在微课录制、Scorm制作软件应用和用户管理上也有一些使用技巧值得深入挖掘。; 孙红宇陈明边兆英张春辉陈士良; 关键词：生理学混合式教学 MOODLE平台网络课程

稳定表达EGFRvIII的U87MG细胞株的建立与鉴定被引量：2: 2010年; 目的:构建稳定表达表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的U87MG细胞株。方法:采用电转染方法将pcD-NA4/TO-EGFRvⅢ质粒导入U87MG细胞,加入zeocin筛选,进一步将细胞有限稀释并克隆化培养以建立稳定的转染细胞株。应用RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定稳定表达EGFRvⅢ基因的细胞株。结果:经RT-PCR鉴定发现V6号和V24号单克隆细胞株EGFRvⅢ基因mRNA水平高表达,进一步Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定发现V6号细胞株EGFRvⅢ蛋白水平高表达。结论:成功建立了稳定表达EGFRvⅢ的U87MG细胞株,为进一步的抗肿瘤治疗及其机制研究提供基础。; 陈明孙红宇文荣朝余政梁吴巧琪夏许可张兴梅高天明; 关键词：基因表达

培养海马神经元缺氧/复氧后MAPK激活及其抑制剂的作用: ＜正＞MAPK在细胞增殖、分化及应激过程中具有重要作用。近年研究发现缺血/缺氧后也可引起MAPK激活,然而不同研究中激酶激活种类、程度、时程及作用上差别很大。本研究在缺氧/复氧诱导的培养海马神经元损伤模型上,采用West...; 陈明孙红宇高天明; 关键词：神经元 MAPK; 文献传递

过敏性哮喘豚鼠气道平滑肌三磷酸腺苷敏感钾通道动力学特性被引量：1: 2010年; 目的探讨过敏性哮喘豚鼠气道平滑肌三磷酸腺苷敏感钾通道(KATP通道)的单通道动力学特性变化。方法将12只4月龄豚鼠随机分为对照组和过敏性哮喘组,每组6只。急性分离出豚鼠3～4级支气管的平滑肌细胞,应用膜片钳内面向外式记录气道平滑肌KATP通道单通道电流,并分析其动力学特性。结果当钳制电压在-60 mV时,过敏性哮喘组通道平均开放时间明显短于对照组(P<0.05);当钳制电压在-40 mV和-60 mV时,过敏性哮喘组通道平均关闭时间明显长于对照组(P<0.05)。当钳制电压在-40 mV和-60 mV时,过敏性哮喘组通道开放概率明显低于对照组(P<0.01)。结论过敏性哮喘时KATP通道单通道动力学特性发生改变,使气道平滑肌对抗去极化能力减弱,可能是气道高反应性中平滑肌收缩反应增强的重要原因之一。; 孙红宇邹飞李勃兴陈明; 关键词：过敏性哮喘气道平滑肌

大鼠短暂全脑缺血后海马组织的全基因表达谱初步分析被引量：1: 2011年; 目的:检测大鼠短暂全脑缺血后背侧海马组织中缺血神经细胞损伤相关差异表达基因。方法:首先建立大鼠全脑缺血动物模型,分别于缺血后6和24h提取缺血组和假手术组的背侧海马组织RNA,将RNA逆转录合成相应cDNA,以Cy5和Cy3标记cDNA作为探针,与含有41000点的大鼠全基因组芯片进行杂交,采用生物信息学分析基因表达谱的改变。结果:共发现上调差异基因491个,脑缺血6和24h分别上调351和296个基因;下调差异基因387个,脑缺血6和24h分别下调296和179个基因;并对差异表达基因进行聚类分析和信号转导通路分析等。结论:应用全基因组表达芯片并结合生物信息学软件分析大量的差异表达基因,为缺血性脑损伤的分子机制研究了提供有用的信息。; 陈明孙红宇李晓文方莹莹严华成李树基石玉生张兴梅; 关键词：脑缺血基因表达谱

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孙红宇

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