尹吉伟
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：北京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人尿激酶原纤原受体识别区嵌合突变体的构建与表达被引量：1
- 2007年
- 采用同源转座方法,构建了在尿激酶原K区138-139位点插入了赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（KGD）序列的2种尿激酶原嵌合体基因（proUK-KGDW,proUK-KGDS）,并以昆虫细胞SF9为宿主获得了高效表达,表达量在33.34μkat·mL^-1,细胞密度为10^6·mL^-1,表达高峰期表达产物占细胞总蛋白的15%以上.表达产物展示出较高的纤溶活性,并具有良好的人尿激酶原免疫原性,同时,经SDS-PAGE试验检测,昆虫细胞分泌的突变体相对分子质量符合理论预期,为5.4×10^4,绝大多数为单链态形式.经过离子交换、分子筛层析及超滤浓缩等步骤对突变体蛋白进行了初步纯化,光浊度法试验表明含有KGDW序列的尿激酶原突变体具有较强的血小板聚集抑制活性,而含有KGDS序列的突变体几乎不具有任何活性,表明羧基端边侧序列对KGD展示正常的受体结合活性影响较大.溶解圈试验表明2种突变体均保留了较高的纤溶活性,说明插入序列不影响尿激酶原的酶切活性.
- 尹吉伟岳俊杰李森井健
- 关键词：尿激酶原纤溶活性
- KGD多肽与尿激酶原嵌合分子的构建、表达及性质研究
- 基于以往的研究，野生型人尿激酶原的第138-139位点适于插入外源肽序列，在此位点插入含KGD功能序列的多肽可以构建兼具抗栓及溶栓活性的尿激酶原突变体。我们设计不同的含KGD功能序列的多肽，利用重叠延伸PCR技术构建了三...
- 尹吉伟
- 关键词：尿激酶原突变体杆状病毒表达系统血小板聚集
- 文献传递
