左翼
- 作品数：13 被引量：27H指数：3
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- 发文基金：国家自然科学基金上海市重大科技攻关项目上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：生物学理学化学工程医药卫生更多>>
- 表达人胰高血糖素样肽－1的基因工程菌及其构建方法和应用
- 一种高效表达人胰高血糖素样肽-1的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带含人胰高血糖素样肽-1基因，即GLP-1基因的重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)或BLR(DE3)。该基...
- 黄静吴自荣左翼徐进楼旻徐伟东
- 文献传递
- 人胰高血糖素样肽-1串联体的克隆及其表达被引量：4
- 2006年
- 为大量获取人胰高血糖素样肽-1,利用基因串联的方法构建了人胰高血糖素样肽-1的一组串联体．将化学合成的人胰高血糖素样肽-1(human glucagon-like peptide-1,hGLP-1)cDNA基因插入质粒载体pET-32a(+)中,构建成硫氧还蛋白(thioredoxin)及六聚组氨酸(hexahisti- dine)与rhGLP-1的融合表达载体pET32-GLP-1．在此基础上将该融合基因序列进行同向串联,获得二串和三串的表达载体pET32-GLP-1-2和pET32-GLP-1-3．将该三种表达载体转化大肠杆菌BLR(DE3)后获得相应的基因工程菌．结果表明：三种基因工程菌经发酵和IPTG诱导后均正确表达目的蛋白,目的蛋白表达量随着基因串数的增加而得到一定提高,重组蛋白经分离纯化后进行生物学活性测试具有明显的降低血糖浓度作用．
- 左翼黄静卞慧芳郁正艳吴自荣
- 关键词：胰高血糖素样肽-1串联体
- 纳米Ag_2O_2-PbO_2化学修饰电极对大肠杆菌细胞膜壁和DNA损伤的研究被引量：8
- 2005年
- 制备了一种新型纳米Ag2O2-PbO2修饰电极,在选定的正电位下,电极表面产生羟基自由基(.OH).通过测定产生的脂质过氧化物和漏出蛋白质的量来研究羟基自由基对大肠杆菌细胞膜壁损伤的情况,并运用电泳和DNA测序的方法对大肠杆菌质粒DNA的损伤及其对序列变化进行了研究.
- 顾静张文唐辉金利通左翼吴自荣
- 关键词：大肠杆菌DNA损伤
- 重组枯草杆菌纤溶酶的酶学性质研究被引量：3
- 2004年
- 对一种重组枯草杆菌纤溶酶 (rBSFE)的酶学性质进行了初步研究 ,结果表明 :酶作用最适温度为 35℃ ;最适反应pH为 8 0 ;酶活性能被PMSF抑制 ,是典型的丝氨酸蛋白酶。通过与尿激酶进行比较 ,发现该酶对纤维蛋白有直接降解作用 ,而对于纤维蛋白原的敏感性则低于尿激酶 ,提示该酶具有直接溶栓作用 ,又不致引起出血 ,是一种有潜力的新型溶栓剂。
- 卞慧芳黄静左翼郁正艳吴自荣
- 关键词：溶栓作用溶栓剂枯草杆菌酶学性质最适温度丝氨酸蛋白酶
- 高效表达人胰高血糖素样肽－1的基因工程菌及其构建方法和应用
- 一种高效表达人胰高血糖素样肽－1的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带含人胰高血糖素样肽－1基因，即GLP－1基因的重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21 (DE3)或BLR(DE3)。该...
- 黄静吴自荣左翼徐进楼旻徐伟东
- 文献传递
- 一种人胰高血糖素样肽－1的复合物及其制备方法
- 一种人胰高血糖素样肽－1的复合物及其制备方法，属肽或蛋白质的修饰复合物及其制备的技术领域。该复合物中的人胰高血糖素样肽－1指人胰高血糖素样肽－1(7－37)或人胰高血糖素样肽－1(7－36)NH<Sub>2</Sub>，...
- 黄静吴自荣左翼徐进楼旻徐伟东
- 文献传递
- 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其构建方法和应用
- 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)，所述的重组质粒是含人汗腺抗菌肽，即DCD－1L基因的质粒pET32a(+...
- 赖玉平吴自荣黄静王林发左翼李骏
- 文献传递
- 重组人胰高血糖素样肽-1的表达及生物学活性被引量：10
- 2006年
- 将人工合成的人胰高血糖素样肽-1（human glucagon—like peptide-1，hGLP-1）基因插入质粒栽体pET-32a（＋）中，构建成rhGLP-1与硫氧还蛋白（thioredox）及六聚组氨酸（hexahistidine）的融合表达栽体pET32-GLP-1，转化大肠杆菌BL21（DE3）获得表达菌株，经LPTG诱导发酵的菌体超声破碎后，裂解液用Ni离子亲和层析纯化得到融合蛋白，经肠激酶裂解，再次Ni离子亲和层析，得到rhGLP-1样品。经SDS—PAGE和等电聚焦检测，样品纯度大于90％，等电点介于pH5．2-pH5．85之间。质谱测定rhGLP-1分子量为3355．0kDa，肽图分析得到2097．7kDa和1005．5kDa两个胰蛋白酶酶解片断，均与理论分析结果一致。动物实验表明重组蛋白具有明显的降血糖活性和促胰岛素分泌作用。
- 黄静徐进左翼徐伟东吴自荣
- 关键词：胰高血糖素样肽-1生物学活性
- 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其构建方法和应用
- 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)，所述的重组质粒是含人汗腺抗菌肽，即DCD-1L基因的质粒pET32a(+...
- 赖玉平吴自荣黄静王林发左翼李骏
- 文献传递
- 亚硝酸钠体外随机突变枯草杆菌纤溶酶基因及其产物性质研究被引量：1
- 2005年
- 通过对目的基因随机突变,希望获得纤溶酶活性提高的突变体。方法:采用一种简单方便的突变方法——亚硝酸钠直接突变含目的基因的质粒,然后转化受体菌获得突变体。在亚硝酸钠浓度为40mmol/L,温度为37℃,反应时间为1h条件下,突变带枯草杆菌纤溶酶基因的质粒pUBH,转化受体菌DB403,得到大量突变体。随机挑取约1600个转化子,用纤维平板法筛选。结果:获得酶活不同程度改变的突变体,其中有纤溶酶活性增加高达一倍的突变体;分离纯化了活性最高的突变酶,并证明其活性提高是与比活性提高相关的;序列分析该突变体发现碱基发生8处改变,而氨基酸只发生1处改变即V298A;和序列分析一致,SDS/PAGE和Western blot检测结果显示其分子量和抗原性质没有改变。同时研究了诱变剂浓度、反应温度和作用时间对随机突变的影响。
- 耿旭李骏左翼吴自荣
- 关键词：亚硝酸钠随机突变分子改造化学诱变剂
