庞安娜
- 作品数：8 被引量：32H指数：4
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- 兔多杀性巴氏杆菌株外膜蛋白A基因克隆及序列分析被引量：1
- 2010年
- 参考GenBank中登录的多杀性巴氏杆菌序列设计了一对特异性引物,采用PCR方法分别扩增出兔多杀性巴氏杆菌C51-2-499株、C51-3-500株的OmpA全长片段,克隆到pMD18-T载体上进行序列测定和分析。结果表明：OmpA全长1.068 kb,含有一个1.068 kb的开放阅读框（ORF）,编码353个氨基酸,相对分子量为37 969.8 kD,等电点pI为8.90。与6株参考菌株比较,核苷酸同源性为89.7%~99.1%,氨基酸同源性为82.9%~98.6%。
- 庞安娜鲍国连刘燕韦强肖琛闻季权安
- 关键词：兔多杀性巴氏杆菌外膜蛋白A
- 黄连汤对鸭疫里默氏菌的抑菌作用及对菌体形态的影响被引量：7
- 2010年
- 研究中药复方黄连汤水提醇沉浓缩物(Ethanol extracts ofCoptidis rhizomadecoction,EeCrd)对鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer,RA)的体外抑菌规律及其对菌体形态的影响。黄连汤经水提醇沉后,减压浓缩,制成含生药176g.L-1的EeCrd原液。用PBS将原液倍比稀释成88、88×2-1、88×2-2……88×2-9g.L-1等11个梯度浓度的药液。用纸片扩散法和液体倍比稀释法研究EeCrd完全抑菌时的最小抑菌浓度和不完全抑菌时的亚抑菌浓度;取88和88×2-3g.L-1EeCrd浓度组药液分别作用17和3、6、17h后的细菌,用透射电镜观察菌体形态的变化。纸片扩散法和液体倍比稀释法测定的EeCrd完全抑制RA时的最小浓度均为88×2-2g.L-1,不完全抑菌时亚抑菌浓度为88×2-3g.L-1;88×2-4g.L-1以上稀释度EeCrd基本无抑菌活性;50μL的88g.L-1浓度组的EeCrd作用RA17h后,RA菌体浓缩,变小,最终死亡;50μL的88×2-3g.L-1浓度组的EeCrd作用RA3、6、17h后,RA菌体长度变长,细胞壁变薄,菌内颜色变浅,皱褶减少,纹理不均匀,菌体干瘪、折叠、弯曲,最终死亡。EeCrd可能通过破坏RA外膜结构来抑制细菌增殖。
- 张先福韦强鲍国连季权安庞安娜
- 关键词：黄连鸭疫里默氏菌透射电镜
- 兔多杀性巴氏杆菌16S rRNA PCR检测方法的建立和应用被引量：3
- 2011年
- 以兔多杀性巴氏杆菌的高度保守的16S rRNA为靶基因,参考已公布的多杀性巴氏杆菌的16SrRNA基因设计1对特异性引物,优化PCR反应条件,建立了兔多杀性巴氏杆菌PCR快速检测方法。该PCR方法的敏感性达到60cfu/mL,使用建立的PCR方法扩增兔多杀性巴氏杆菌标准株和分离株均能扩增出643bp的目的片段,扩增兔大肠杆菌、支气管败血波氏杆菌结果为阴性,证明本试验所建立的兔多杀性巴氏杆菌病原PCR检测方法敏感、特异、可靠。
- 庞安娜刘燕韦强肖琛闻鲍国连季权安
- 关键词：多杀性巴氏杆菌PCRRRNA
- 兔巴氏杆菌外膜蛋白A基因的克隆、表达和快速诊断方法的建立
- 兔巴氏杆菌病/(Rabbit Pasteurellosis/)是一种由多杀性巴氏杆菌引起的呼吸道传染病。不同年龄兔均可发病,发病率和病死率都很高,严重影响养兔业的发展。本研究建立了兔巴氏杆菌的PCR及抗体的ELISA检测...
- 庞安娜
- 关键词：OMPA原核表达间接ELISA
- 文献传递
- 兔巴氏杆菌和波氏杆菌多重PCR检测方法的建立被引量：10
- 2012年
- 参考GenBank中兔巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌的fim2的基因序列,应用Premier 5.0软件在二者高度保守区设计了2对引物,建立了适合巴氏杆菌和波氏杆菌快速检测的多重PCR检测方法。以该方法对巴氏杆菌和波氏杆菌参考菌株进行PCR扩增,分别能从各自的基因组中扩增出与试验设计相符的644bp和425bp的特异性DNA片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果表明分别为巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌fim2基因序列。该方法对波氏杆菌的检测下限为4×102 CFU,对巴氏杆菌的检测下限为6×101 CFU。对兔源性沙门菌、葡萄球菌、大肠杆菌、魏氏梭菌扩增结果为阴性。表明所建立的RT-PCR检测技术具有特异、快速和敏感的特点,可用于鉴别诊断兔巴氏杆菌和波氏杆菌以及2者混合感染。
- 刘燕韦强肖琛闻鲍国连季权安庞安娜
- 关键词：巴氏杆菌波氏杆菌多重PCR
- 兔多杀性巴氏杆菌16S rRNA PCR检测方法的建立被引量：4
- 2012年
- 为建立一种快速准确检测兔多杀性巴氏杆菌(P.multocida)的PCR方法,本研究以P.multocida的高度保守的16S rRNA为靶基因,参考已公布的P.multocida的16S rRNA基因设计1对特异性引物,优化PCR反应条件,建立了P.multocida PCR快速检测方法。该PCR方法的敏感性达到60 cfu/mL,采用该PCR方法扩增P.multocida标准株和分离株均能扩增出643 bp的目的片段,扩增兔大肠杆菌、支气管败血波氏杆菌结果为阴性,证明本实验所建立的P.multocida PCR检测方法快速、敏感、特异、可靠,可用于P.multocida的快速鉴定与诊断。同时用建立的PCR方法对临床疑似病兔的脏器分离菌进行扩增,可扩增出目的条带,与细菌的分离结果相一致。
- 季权安刘燕庞安娜肖琛闻韦强鲍国连
- 关键词：多杀性巴氏杆菌PCRRRNA
- Ⅰ型鸭肝炎病毒VP3基因的原核表达及其抗原性被引量：2
- 2011年
- 参考GenBank中的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)全基因序列设计引物,采用RT-PCR方法扩增了DHV-ⅠVP3基因,将VP3基因与pET-28a(+)表达载体连接后,转化宿主BL21(DE3),用0.1 mmol·L-1的IPTG诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳,Western-blotting分析蛋白免疫原性。电泳结果表明,VP3在大肠杆菌中表达量较高,表达产物的分子量约为27 kD。免疫印迹试验表明Ⅰ型鸭肝炎病毒VP3蛋白在大肠杆菌中表达产物具有免疫原性。
- 刘燕庞安娜韦强鲍国连季权安肖琛闻
- 关键词：VP3基因克隆表达
