张俊仙
- 作品数：152 被引量：654H指数：15
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- 结核分枝杆菌耐药基因检测试剂盒及其制备方法
- 本发明涉及一种结核分枝杆菌耐药基因检测试剂盒及其制备方法，根据不同分枝杆菌属和结核分枝杆菌复合群16S核糖体核糖核酸(简称rRNA)而设计、合成相应的寡核苷酸探针，通过点样法将寡核苷酸探针按一定的顺序点在经预处理的硝酸纤...
- 吴国琼梁建琴张俊仙李洪敏
- 文献传递
- 用DNAStar软件预测Rv1410c结核分枝杆菌蛋白抗原表位被引量：24
- 2015年
- 目的预测Rv1410c结核分枝杆菌（MTB）的抗原表位。方法利用DNAStar软件包中Editseq软件将Rv1410c MTB氨基酸序列进行编辑保存,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,预测Rv1410c MTB的二级结构、B细胞抗原表位及T细胞抗原表位,然后再用BLAST分析其与人类抗原表位的同源性。结果 Rv1410c具有丰富的二级结构,含有较多潜在的B细胞抗原肽表位,主要位于1~10、67~77、129~137、189~205、222~235、253~267、296~306、330~338、359~367、462~467、494~517氨基酸残基或其附近,这些区域基本上含有β转角结构,亲水性、表面可能性和柔韧性指数都较高;也含有较多潜在的T细胞表位,主要位于16~37、84~102、108~115、137~160、202~207、219~222、245~263、321~325、355~362、387~391、417~445、486~494氨基酸残基或其附近。结论 Rv1410c MTB既含有较多潜在的B细胞抗原表位,也含有较多潜在的T细胞抗原表位。
- 李江英白雪娟梁艳张俊仙阳幼荣赵卫国吴雪琼
- 关键词：抗原表位结核分枝杆菌
- 小鼠肺、肝、脾组织病理学变化对结核DNA疫苗保护作用的评价
- 2003年
- 目的:评价结核分支杆菌MPT64、ESAT6 DNA疫苗的保护效力和细胞因子的增强作用.……
- 徐燕杰吴雪琼韩永郑越张俊仙张灵霞史迎昌李洪敏曹立雪李忠明
- 结核分枝杆菌Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗联合佐剂的治疗作用
- 2014年
- 目的 研究结核分枝杆菌Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗联合佐剂对结核的治疗作用.方法 用结核分枝杆菌H37Rv通过尾静脉注射60只BALB/c小鼠,分别用生理盐水、利福平、草分枝杆菌F.U.36注射液、佐剂77-1、Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗、Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗联合佐剂治疗.免疫结束后2周杀鼠,观察肺和脾病理改变,称取重量,做菌落计数.结果 肺组织病理显示：生理盐水组肺组织病变严重、广泛,佐剂组比生理盐水组病变略轻,病变仍较重、广泛,草分枝杆菌F.U.36注射液组、Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗组、Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗联合佐剂组肺组织病变减轻、局限,3/5区域肺泡结构完整、清晰,利福平组肺组织无病变.与生理盐水组比较,利福平组、草分枝杆菌F.U.36注射液组、Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗联合佐剂组肺脏菌落数分别减少2.11 log、0.76 log和0.57 log;肝脏菌落数分别减少2.11 log、0.74 log和0.44 log（t＞3.21,P＜0.01）.结论 Ag85A和Ag85B重组蛋白疫苗联合佐剂对小鼠结核病具有较好的治疗效果,与草分枝杆菌F.U.36注射液相当.
- 梁艳吴雪琼阳幼荣张俊仙
- 关键词：结核分枝杆菌AG85AAG85B
- 结核分枝杆菌Rv3134c蛋白抗原表位的预测被引量：3
- 2015年
- 目的预测结核分枝杆菌Rv3134c的抗原表位,了解其免疫学特性。方法利用DNAStar软件包中Protean软件对Rv3134c氨基酸序列进行分析,采用包括二级结构、亲水性、抗原性、表面可能性、柔韧性等多参数预测其二级结构及T细胞和B细胞抗原表位,最后BLAST分析其与人类抗原表位的同源性。结果 Rv3134c蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,含有较多潜在的B细胞抗原表位,可能位于1-7、30-37、65-81、89-100、111-120、138-148、184-195、209-216、233-238位氨基酸残基或其附近,这些区域基本上含有β转角结构,亲水性、表面可能性和柔韧性指数都较高。该蛋白潜在的T细胞抗原表位较少,可能位于62-76、89-97、185-195、203-213、219-231、248-255位氨基酸残基或其附近。BLAST分析结果显示,其与人类抗原表位的同源性很低。结论结核分枝杆菌Rv3134c是一个即含有较多B细胞抗原表位又含有较多T细胞抗原表位的蛋白抗原,实验结果为该蛋白抗原表位的进一步研究与合成肽疫苗奠定了基础。
- 崔瑞娜白雪娟阳幼荣梁艳张俊仙赵卫国吴雪琼
- 关键词：结核分枝杆菌抗原表位
- CFP10/ESAT6融合蛋白-ELISPOT方法的建立及其在结核分枝杆菌感染诊断中的应用价值被引量：16
- 2010年
- 目的建立应用酶联免疫斑点试验（Enzyme Linked-Immunospot Assay,ELISPOT）检测结核分枝杆菌感染的方法 ,评价CFP10/ESAT6融合蛋白抗原在检测结核分枝杆菌感染中的应用价值。方法通过比较不同的实验条件确定ELIS-POT检测结核分枝杆菌感染方法的最佳细胞浓度、孵育时间、蛋白抗原浓度等,建立ELISPOT方法。以PPD皮肤试验作对照。结果 ELISPOT方法的最佳实验条件为：每孔细胞浓度2×105,CFP10/ESAT6融合蛋白抗原浓度20~40μg/mL,细胞孵育时间20h。应用PPD皮试检测30例健康体检者、38例非结核疾病患者和40例结核病患者的阳性率分别为40.0%、0%、72.5%,而ELISPOT检测的阳性率分别为20.0%、10.5%、92.5%。应用ELISPOT检测40例结核病痰菌阳性组和阴性组的灵敏度分别为94.4%、90.9%。结论应用CFP10/ESAT6融合蛋白作为抗原建立的ELISPOT方法可初步应用于诊断结核分枝杆菌感染、辅助结核病诊断。
- 李峤珂吴雪琼阳幼荣梁艳张俊仙李楠叶丽萍梁建琴王安生张广宇张涛王兰
- 关键词：结核病Γ-干扰素
- 三种结核分枝杆菌重组蛋白抗原血清学诊断价值的研究被引量：4
- 2012年
- 目的研究重组ESTA6(rESTA6)、CFP10(rCFP10)、CFP10-ESTA6(rCFP10-ESTA6)三种结核分枝杆菌重组抗原在结核病血清学诊断中的应用价值。方法检测230例肺结核、70例非结核疾病及200例健康血清标本中抗结核抗体,应用SPSS18.0对检测结果进行方差分析。结果方差分析表明,rCFP10、rESAT6、rCFP10-ESAT6三种抗原对肺结核、非结核疾病及健康人血清标本的检测结果有统计学意义(P<0.05),三种抗原检测肺结核病患者血清标本的敏感性分别为31.3%、25.2%、34.8%,特异性分别为94.8%、97.8%、95.6%。rCFP10和rESAT6联合检测敏感性及特异性分别为40.0%和93.0%;rCFP10和rESAT6联合检测的92例阳性标本中,有23例rCFP10-ESAT6检测呈阴性;rCFP10-ESAT6检测的80例阳性标本中,有26例rCFP10和rESAT6联合检测呈阴性。结论 rCFP10-ESTA6的结构与rCFP10和rESTA6的单体的结构可能不完全相同,rCFP10-ESTA6抗原不能完全代替rESTA6、rCFP10两种抗原进行结核病的血清学实验室诊断。
- 阳幼荣吴雪琼赵卫国张俊仙梁艳张翠英李洪敏王兰
- 关键词：抗原血清学试验分枝杆菌结核
- DNA芯片鉴定分枝杆菌的研究被引量：9
- 2010年
- 目的评价DNA芯片技术鉴定分枝杆菌菌种的应用价值,为临床实际应用提供科学依据。方法收集以BACTECMGIT960从结核病患者分离到的分枝杆菌阳性培养物,以传统分枝杆菌菌种鉴定方法为对照,应用DNA芯片技术进行菌种鉴定。结果两种方法鉴定结果一致和基本一致共112株,吻合率为83.6%(112/134),包括胞内分枝杆菌50株,龟分枝杆菌14株,结核分枝杆菌14株,戈登分枝杆菌9株,鸟分枝杆菌7株,偶然分枝杆菌7株,堪、瘰、胃和猿分枝杆菌6株,土分枝杆菌和海分枝杆菌各1株;未分类NTM3株。应用DNA芯片未能分类的17株分枝杆菌中,传统方法分别鉴定为戈登分枝杆菌5株、胞内分枝杆菌3株、龟分枝杆菌2株、蟾分枝杆菌、耻垢分枝杆菌和浅黄分枝杆菌各1株,未分类NTM4株。结论用DNA芯片检测技术,可以简便、快速、灵敏、特异地将大多数分枝杆菌鉴定到种,但有待进一步完善。
- 黄明翔王琳王琳张丽水戴腊梅
- 关键词：分枝杆菌聚合酶链反应菌种鉴定DNA芯片
- NAT2基因多态性与抗结核药物性肝损害的关系被引量：3
- 2012年
- 目的探讨汉族人群N-乙酰基转移酶2(NAT2)基因多态性与抗结核药物性肝损害(ATDLI)易感性的关系。方法回顾性分析抗结核治疗后发生肝损害的结核病患者228例(肝损害组),未发生肝损害的结核病患者260例(无肝损害组),应用时间飞行质谱技术(MassARRAY)检测NAT2基因多态性。结果在筛选出的10个标签单核苷酸多态性(tagSNP)位点中,NAT2启动子区域rs4646243的T等位基因和rs4646246的A等位基因构成的突变纯合及杂合基因型均与抗结核药物性肝损害保护性有关联,rs1115784、rs1041983和rs1799930的纯合突变基因型与抗结核药物性肝损害风险相关联,其中rs1041983和rs1799930的突变纯合基因型与抗结核药物性肝损害高度关联。在10个标签SNP位点中发现2个单体域,位于单体域1的单体型‘TGAA’和位于单体域2的单体型‘TAG’与抗结核药物性肝损害相关联。在NAT2基因上还发现2个抗结核药物性肝损害保护性的单体型:位于单体域1的单体型‘CGGG’及位于单体域2的‘CGG’。结论汉族人群NAT2基因多态性与抗结核药物性肝损害的发生密切相关,通过检测NAT2基因及单体型,可以在抗结核治疗前筛选出肝损害发生风险较高的患者。
- 朱冬林吴雪琼席云钟逾张俊仙安慧茹
- 关键词：N-乙酰基转移酶2结核肝损害基因多态性
- 应用PCR-直接测序法测定结核分支杆菌rpsL基因突变的研究
- 1999年
- 目的：了解我国结核分支杆菌耐链霉素（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ，ＳＭ）分离株ｒｐｓＬ基因突变情况，建立快速检测结核分支杆菌耐药基因型的分子药敏试验方法。方法：通过聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）－单链构象多态性（Ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄｅｄＣｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＳＳＣＰ）、ＰＣＲ－限制性片段长度多态性（ＲｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎＦｒａｇｍｅｎｔＬｅｎｇｔｈＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＲＦＬＰ）和ＰＣＲ－直接测序法（ＤｉｒｅｃｔＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ，ＤＳ）分析３８株结核分支杆菌耐ＳＭ分离株的ｒｐｓＬ基因。结果３８株耐ＳＭ分离株中，２５株ＳＳＣＰ异常、不被ＭｂｏⅡ消化、ＤＳ分析４３位密码子ＡＡＧ→ＡＧＧ突变；１株ＳＳＣＰ异常、可被ＭｂｏⅡ消化、ＤＳ分析３３位密码子ＧＴＡ→ＡＴＡ突变；１２株ＳＳＣＰ正常、可被ＭｂｏⅡ消化、ＤＳ分析未见异常；未发现８８位密码子突变。结论：大多数结核分支杆菌耐ＳＭ是由于其ｒｐｓＬ基因４３位密码子突变所致，采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ、ＰＣＲ－ＲＦＬＰ和ＰＣＲ－ＤＳ方法可快速测定部分结核分支杆菌ＳＭ耐药基因型。
- 吴雪琼张俊仙庄玉辉张军芝贾树林
- 关键词：聚合酶链反应结核分枝杆菌RPSL基因
