张曦
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 供职机构：南方医科大学广州临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IGF-1R信号通路及上皮-间质转化对非小细胞肺癌A549细胞EGFR-TKIs获得性耐药的作用被引量：6
- 2014年
- 目的探讨胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(IGF-1R)信号通路及上皮-间质转化(EMT)对EGFR野生型、K-ras突变型非小细胞肺癌A549细胞表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)获得性耐药的作用。方法选用EGFR野生型、K-ras突变型的非小细胞肺癌A549细胞,用吉非替尼将其诱导成耐药细胞A549/GR。MTT法检测细胞增殖,划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞侵袭转移能力,qRT-PCR和Western blot法分别检测EMT标志分子及IGF-1R信号通路相关分子的mRNA和蛋白表达。结果 A549/GR对吉非替尼的敏感性显著下降(P<0.05)。与A549细胞比较,A549/GR细胞形态呈现间质化改变,侵袭和转移能力均显著增加(P<0.05)。A549/GR细胞中间质标志Vimentin的mRNA和蛋白表达量均显著增多(P<0.05),上皮标志E-Cadherin表达量显著减少(P<0.05)。与A549细胞相比,A549/GR细胞IGF-1R的mRNA和蛋白及其磷酸化表达量均未见明显改变(P>0.05),而AKT磷酸化水平及其mRNA水平明显上调(P<0.05),ERK蛋白及其磷酸化和mRNA表达量均明显增加(P<0.05)。A549/GR细胞的EGFR及其磷酸化蛋白表达量较A549细胞明显下降(P<0.05)。结论 EMT及AKT和ERK信号通路的激活均可能在EGFR野生型、K-ras突变型A549细胞的EGFRTKIs获得性耐药中起重要作用,但获得性耐药与IGF-1R表达无关。
- 张曦张为民陈蓓曾云云
- 关键词：非小细胞肺癌获得性耐药上皮-间质转化
- RNAi介导IGF-1R基因沉默对非小细胞肺癌PC-9/ZD细胞株EMT的影响被引量：4
- 2014年
- 目的探讨RNA干扰(RNAi)介导胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)基因沉默对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞PC-9/ZD发生上皮—间质转化(EMT)的影响。方法构建靶向IGF-1R基因的RNAi重组慢病毒,感染NSCLC表皮生长因子受体—酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)获得性耐药细胞PC-9/ZD;实时荧光定量PCR法检测IGF-1R表达抑制效应及IGF-1R基因沉默后EMT相关分子的mRNA表达变化,Transwell实验检测细胞侵袭转移能力变化。结果成功构建靶向IGF-1R基因的RNAi重组慢病毒,滴度为1×106TU/μL,对PC-9/ZD细胞IGF-1R基因的mRNA抑制效率为71.4%。IGF-1R基因沉默后,PC-9/ZD细胞形态呈现间质向上皮化转变,上皮标志物E-cadherin的mRNA表达量升高(P<0.05),间质标志物Vimentin的mRNA表达量降低(P<0.05),且侵袭转移能力减弱(P<0.05)。结论靶向IGF-1R基因沉默可逆转PC-9/ZD细胞EMT。
- 张曦张为民陈蓓
- 关键词：基因沉默上皮-间质转化非小细胞肺癌获得性耐药
- IGF--1R在EGFR野生型非小细胞肺癌EGFR--TKIs获得性耐药中的作用及机制研究
- 研究背景和目的 肺癌是目前世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,已经成为癌症病人死亡的最常见原因。肺癌中非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）占所有病例的80%左右,大多数N...
- 张曦
- 关键词：上皮-间质转化
- 文献传递
- 上皮间质转化在非小细胞肺癌EGFR-TKIs获得性耐药中的作用研究被引量：7
- 2015年
- 目的探讨上皮间质转化(EMT)在非小细胞肺癌(NSCLC)对表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFRTKIs)获得性耐药中的作用及可能机制。方法选用EGFR基因19号外显子突变型吉非替尼耐药细胞PC9/AB和EGFR野生型厄洛替尼耐药细胞H460/ER,通过基因转染获得E-cadherin稳定过表达细胞PC9/AB-CDH1和H460ER-CDH1。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的增殖情况,划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量PCR(qRTPCR)和蛋白印迹法检测EMT相关分子、EGFR信号通路分子的mRNA和蛋白表达水平。结果 PC9/AB和H460/ER细胞未发生T790M突变和c-Met基因扩增,但发生了EMT,表现为E-cadherin表达降低和Vimentin表达增加。通过基因转染提高Ecadherin表达水平能逆转PC9/AB和H460/ER耐药细胞的EMT,使其对EGFR-TKIs的敏感性增加,PC9/AB-CDH1细胞较PC9/AB对吉非替尼的敏感性增加约11.4倍,其半数抑制浓度(IC50)分别为(0.70±0.22)μmol/L和(8.68±0.44)μmol/L,差异有统计学意义(P<0.05);H460/ER-CDH1较H460/ER对厄洛替尼的敏感性增加约6.1倍,其IC50分别为(7.51±1.12)μmol/L和(53.72±12.95)μmol/L,差异有统计学意义(P<0.05)。同时,逆转EMT后,细胞的EGFR、p-EGFR的mRNA和蛋白表达量均增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论阻断耐药细胞的EMT可逆转NSCLC对EGFR-TKIs的获得性耐药,EMT在NSCLC对EGFR-TKIs的获得性耐药中起重要作用,其机制可能与EGFR磷酸化水平降低有关。
- 曾云云张为民张曦
- 关键词：非小细胞肺癌上皮间质转化获得性耐药
- IGF-1R信号通路及上皮-间质转化在人肺腺癌A549细胞EGFR-TKIs获得性耐药中的作用
- 目的：探讨胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(insulin-like growth factorⅠreceptor,IGF-1R)信号通路及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EM...
- 张曦张为民陈蓓曾云云
- 关键词：酪氨酸激酶抑制剂获得性耐药上皮-间质转化
- 文献传递
