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张泽华: 作品数：11 被引量：3H指数：1; 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>; 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项海南省重点科技计划项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目更多>>; 相关领域：生物学医药卫生更多>>

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一种应用淀粉生产乙醇的方法: 本发明公开了一种应用淀粉生产乙醇的方法，属于生物技术领域，首先从大麦基因组中扩增α淀粉酶基因，从黑曲霉菌基因组中扩增糖化酶基因，从解淀粉假单胞杆菌基因组中扩增异淀粉酶基因；利用α淀粉酶基因、糖化酶基因和异淀粉酶基因构建成...; 张爱联罗进贤张添元刘振旺易小平谭燕华张泽华; 文献传递

血管生成抑制素治疗血管瘤的研究被引量：1: 2015年; 目的观察血管生成抑制素治疗血管瘤的效果。方法发酵毕赤酵母工程菌组成型表达重组血管生成抑制素,用SP-Sepharose Fast Flow(阳离子交换剂)柱进行蛋白纯化;通过抑制鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成试验和诱发血管内皮细胞凋亡试验,分析重组血管生成抑制素的生物学活性,在血管瘤模型(公鸡肉垂)中注射血管生成抑制素,分析血管生成抑制素对血管瘤的药效。结果血管生成抑制素在毕赤酵母中高效表达,经过纯化,收获达98%的重组血管生成抑制素;重组血管生成抑制素具有抑制CAM血管生成和诱发血管内皮细胞凋亡的活性;重组血管生成抑制素与血管瘤模型作用14 d后,瘤体血管生长抑制率为51%(P<0.01),血管瘤增殖抑制率为39%(P<0.05)。结论成功制备重组血管生成抑制素药物,血管生成抑制素对于血管瘤模型具有显著的药效。; 符策奕张泽华张爱联罗进贤; 关键词：血管生成抑制素血管瘤

用pGAP启动子在P.pastoris中组成型表达漆酶被引量：2: 2011年; 目的:用pGAP启动子在P.pastoris中组成型表达漆酶。方法:用PCR从枯草芽孢杆菌基因组中扩增漆酶基因lac2。用NotⅠ和EcoRⅠ双酶切将lac2基因重组于表达载体PGAP9K。通过电转法将其转化于P.pastoris基因组,筛选高G418抗性以及高表达Lac2酶的重组子作为工程菌Gs115(pGAP9k-lac2)。用甘油作为碳源在50L生物反应器中表达重组漆酶Lac2。用ABTS法测定发酵液中的漆酶活力。结果:在发酵30h时,其Lac2酶的表达达峰值,其活性为136.67U/L。其峰值的Lac2酶的表达量为50mg/L。表达产物具有分解ABTs的活性。结论:成功克隆了漆酶基因lac2,并首次实现用pGAP启动子在P.pastoris中组成型表达漆酶,为用P.Pastoris规模化生产漆酶奠定了基础。; 张泽华杨穗珊张爱联; 关键词：漆酶毕赤酵母酶活力

用毕赤酵母表达理氏木霉的β-葡萄糖苷酶基因: 2012年; 目的:为提高β-葡萄糖苷酶的产量,用毕赤酵母取代理氏木霉用于生产,以弥补理氏木霉在大规模生产中的缺陷。方法:用套叠PCR法从理氏木霉基因组中扩增β-葡萄糖苷酶基因(bglⅠ)。用T4DNA连接酶和限制性DNA内酶将bglⅠ重组于P.pastoris表达载体pPIC9K的多克隆位点,获得含bglⅠ的重组表达载体pPIC9K-bglⅠ。通过电转法将其pPIC9K-bglⅠ载体转化于P.pastoris基因组,筛选高G418抗性以及高表达bglⅠ酶的重组子作为工程菌。结果:用BMGY-BMMY培养基体系,在摇瓶中发酵48 h,表达BglⅠ30 mg/L,在P.pastoris中表达的BglⅠ能水解对硝基苯-β-D-葡萄糖苷具有β-葡萄糖苷酶活性。其酶活力为56 U/L发酵液。结论:通过这种方法,可以成功地用毕赤酵母表达理氏木霉的β-葡萄糖苷酶基因。; 林海鹏沈锦城尹慧祥张泽华张爱联; 关键词：Β-葡萄糖苷酶毕赤酵母套叠PCR 酶活力

生产葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶的方法: 本发明公开了生产葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶的方法。属生物技术领域。首先克隆木霉的葡聚糖内切酶基因、葡聚糖外切酶基因和β-葡萄糖苷酶基因；构建含这三种酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌表达载体和毕赤酵母表达载体；...; 张爱联张泽华张添元易国辉; 文献传递

一种利用植物纤维素和半纤维素生产乙醇的方法: 本发明属于生物技术领域，具体是一种利用植物纤维素和半纤维素生产乙醇的方法，首先对系列酶基因进行扩增，分别构建由pGAP调控的酿酒酵母表达载体，并转化为酿酒酵母基因组；经验证、筛选后得到酿酒酵母工程菌；将植物或植物废弃物于...; 张爱联屠发志易国辉屈直张添元罗进贤崔艳艳张泽华马德勇; 文献传递

一种提高植物发酵沼气产量的方法: 本发明公开了一种提高植物发酵沼气产量的方法。属生物技术领域。首先克隆白腐真菌的木质素过氧化物酶基因和猛过氧化物酶基因，枯草芽孢杆菌的漆酶基因和木霉的葡聚糖内切酶基因、葡聚糖外切酶基因和β葡萄糖苷酶基因；构建含以上六种基因...; 张爱联屠发志易国辉符仙张泽华张添元尹慧祥罗进贤杨穗珊; 文献传递

生产葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶的方法: 本发明公开了生产葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶的方法。属生物技术领域。首先克隆木霉的葡聚糖内切酶基因、葡聚糖外切酶基因和β-葡萄糖苷酶基因；构建含这三种酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌表达载体和毕赤酵母表达载体；...; 张爱联张泽华张添元易国辉; 文献传递

工程菌P.pastoris GS115(pPIC9K-lac2)的构建及诱导表达漆酶的研究: 2013年; 用PCR法扩增枯草芽孢杆菌的漆酶基因lac2。构建表达质粒pPIC9K-lac2。通过电转法将lac2基因重组于P.pastoris基因组,筛选高G418抗性和高表达漆酶的转化子作为工程菌GS115(pPIC9K-lac2)。在发酵罐中发酵GS115(pPIC9K-lac2)表达重组蛋白。在50 L发酵罐中加入20 L无机盐发酵培养基。在发酵的第一阶段连续24 h补加50%甘油-0.8%PTM4增殖P.pastoris,然后用甲醇-0.8%PTM4诱导49 h。在发酵过程中,通过调节搅拌的频率和通气量,将溶氧维持于20%～30%,用氨水维持pH 5.0.放罐时生物量为A_(600)=266.5,表达漆酶1097.5U/L发酵液。; 沈锦城张泽华杨穗珊张添元罗进贤张爱联; 关键词：漆酶 PASTORIS 高密度发酵

一种提高植物发酵沼气产量的方法: 本发明公开了一种提高植物发酵沼气产量的方法。属生物技术领域。首先克隆白腐真菌的木质素过氧化物酶基因和猛过氧化物酶基因，枯草芽孢杆菌的漆酶基因和木霉的葡聚糖内切酶基因、葡聚糖外切酶基因和β葡萄糖苷酶基因；构建含以上六种基因...; 张爱联屠发志易国辉符仙张泽华张添元尹慧祥罗进贤杨穗珊; 文献传递