张海龙
- 作品数：95 被引量：653H指数：13
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目广东省医学科学技术研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 深圳市鼠类感染汉坦病毒的分子特征被引量：4
- 2008年
- 目的 了解深圳市宿主动物携带汉坦病毒状况、病毒型别及分子特征。方法 笼日法捕鼠，计算鼠密度，确定鼠种构成。共捕获宿主动物472只，褐家鼠为优势鼠种，占87．29％。免疫荧光抗原阳性鼠肺标本中提取病毒RNA，应用汉坦病毒型特异性引物进行逆转录,套式PCR扩增M片段基因和核苷酸序列测定，对汉坦病毒进行基因分型和同源性分析。结果 21只来自我市不同区褐家鼠的鼠肺标本中均发现携带汉城型病毒，汉坦病毒M片段核苷酸同源性高达95．4％以上，属于同一亚型。系统进化树显示它们可以分为6个小进化分支，与SZ2083进化关系相对最近。但发现来源于地理位置较近的病毒株并没有显示出较高的基因组核苷酸序列的同源性，反而相隔较远的病毒株呈现出一致性。结论 深圳市汉坦病毒的主要宿主动物是褐家鼠，携带的汉城型汉坦病毒之间的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列同源性较高，但也存在一定的差异。这种差异形成的原因有待进一步研究。
- 刘建军阳帆何建凡张小岚梁焯南张顺祥张海龙杨洪
- 关键词：汉坦病毒基因分型同源性分析
- 深圳地区肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16基因组特征及诊断试剂研究
- 何雅青金奇杨洪李琳琳周世力张海龙杨帆肖性龙姚相杰谭洁阳帆周丽吕星
- 本研究于1998-2007年连续十年对深圳地区手足口病的重要病原--肠道病毒71型（简称EV71）和柯萨奇病毒A16（简称CA16）进行监测，掌握深圳地区流行的EV71和CA16的遗传学背景和种系进化关系，病毒变异规律和...
- 关键词：
- 关键词：肠道病毒71型柯萨奇病毒A16基因
- 丙型肝炎病毒Core基因重组表达载体Pet32a-Core的构建被引量：1
- 2008年
- 目的扩增丙型肝炎病毒核心区(HCV-Core)基因,并构建HCV-Core基因的重组表达载体。方法设计合成HCVCore基因全长引物,提取丙型肝炎患者血清中的HCV RNA,应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增C区基因片段,用限制性内切酶BamH1和SaL1双酶切后,连接到Pet32a表达载体中,并转化到BL21大肠杆菌中;然后PCR和双酶切鉴定转化菌落。结果扩增得到目的基因长度约600bp,经测序证实为HCV-Core基因,表明HCV-Core基因重组表达载体Pet32a-Core构建成功。结论成功构建HCV-Core基因表达载体Pet32a-Core,为下一步Core蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备奠定基础。
- 杨洪房师松何雅青姚相杰张海龙阳帆冼慧霞
- 关键词：丙型肝炎病毒核心基因
- 2010—2015年广东省深圳市其他感染性腹泻监测分析被引量：44
- 2017年
- 目的分析广东省深圳市2010—2015年其他感染性腹泻监测数据,探讨下一步监测思路。方法通过中国疾病预防控制信息系统的"传染病报告信息系统"和"突发公共卫生事件管理信息系统"分别收集2010—2015年深圳市其他感染性腹泻病例信息和突发公共卫生事件相关信息资料,通过"深圳市疾病控制信息管理系统"收集同期聚集性疫情和病原谱哨点监测数据,运用描述性流行病学方法进行分析。结果深圳市2010—2015年其他感染性腹泻年报告发病率波动在250.00/10万左右,但2013年高达383.44/10万。其他感染性腹泻监测病例以轮状病毒腹泻为主,占69.16%,细菌性腹泻占14.22%,未标注病原类型占16.44%。细菌性腹泻在6—9月高发,病毒性腹泻一般10月至次年2月为高峰。感染性腹泻病例均以≤5岁儿童为主,占87.43%。病原谱哨点监测显示,病毒性腹泻以诺如病毒和轮状病毒为主,细菌性腹泻以沙门菌、副溶血性弧菌和大肠埃希菌为主,阳性检出率与疫情月份分布情况基本一致。诺如病毒是导致感染性腹泻暴发疫情的主要病原体,每年10月至次年3月为高峰,托幼机构和中小学占90.76%。结论深圳市现有的其他感染性腹泻监测体系可充分掌握就诊病例及暴发疫情的流行病学和病原学特征。但在社区非就诊病例监测和疾病负担评估等方面仍需进一步改进。
- 张振李媛路滟江敏张海龙梅树江谢旭
- 关键词：感染性腹泻流行病学病原学监测防控策略
- 2008年深圳市36起手足口病疫情的病原学检测被引量：9
- 2009年
- 目的:了解深圳市手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)疫情的病原学情况,为疫情的控制及病例的治疗提供可靠的实验室依据。方法:设计合成肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CA16)的型特异性引物,提取HFMD病例粪便标本中的核酸,采用RT-PCR方法扩增病毒的特异性片段,检测EV71和CA16核酸。结果:36起手足口病疫情中,13起由EV71引起,14起由CA16引起,构成比分别为36.11%及38.89%;各个行政区均有疫情发生,主要集中在人口密集流动性较大的罗湖区和南山区;疫情主要集中在4、5月份;99份标本中,EV71采样阳性率为28.28%,CA16采样阳性率为23.23%;EV71和CA16的采样阳性率没有显著性差异;不同性别间EV71和CA16的感染率没有显著性差异。结论:2008年深圳市HFMD疫情主要是由CA16和EV71引起,特别要加强对EV71引起的有中枢神经系统并发症的重症病例的监测。
- 杨洪姚相杰何雅青张海龙冼慧霞阳帆
- 关键词：手足口病肠道病毒71型柯萨奇病毒A16型病原学检测
- 丙肝病毒NS3-4A基因的重组杆状病毒穿梭载体的构建被引量：1
- 2011年
- 目的通过克隆丙肝病毒非结构蛋白NS3-4A基因,构建表达HCV-NS3-4A基因的重组杆状病毒穿梭载体。方法设计合成HCV NS3-4A基因全长的特异性引物,应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增非结构蛋白区NS3-4A基因片段,经限制性内切酶EcoR I和Hind III双酶切后克隆到pFastbacDual上,并转化到大肠杆菌DH5α中,最后经PCR和双酶切鉴定转化菌落。结果扩增得到的基因片段长度为2.2kb,该片段成功克隆在杆状病毒穿梭载体pFastBacDual上,经测序证实为HCV NS3-4A基因,这表明HCV-NS3A基因重组杆状病毒穿梭载体构建成功。结论成功构建了表达HCV NS3-4A基因的杆状病毒穿梭载体,这将为下一步HCV杆状病毒载体疫苗的制备打下基础。
- 姚相杰刘涛何雅青杨洪阳帆张海龙冼慧霞
- 关键词：丙肝病毒杆状病毒
- 深圳市HFRS疫源地鼠携带汉坦病毒与人感染汉坦病毒的基因特征对应性研究被引量：1
- 2010年
- 目的 了解深圳市肾综合征出血热（HFRS）疫源地鼠携带汉坦病毒与人感染汉坦病毒二者的病原学特征及联系,为HFRS的防控提供科学依据.方法 收集疑似HFRS病人急性期血清标本,并在相同区域开展笼日法捕鼠,无菌取鼠肺.分别采用ELISA和直接免疫荧光法筛选阳性标本,选择代表性血清标本以及鼠肺标本进行逆转录-套式聚合酶链反应（RT-nested PCR）扩增部分M和S片段及核苷酸序列测定,与国内外的汉坦病毒毒株一起进行同源性比对和系统进化树分析.结果 472份鼠肺经直接免疫荧光检测共获得阳性鼠肺47份,带毒率为9.96%.对60份IgM抗体阳性的血液标本进行RT-nested PCR扩增,检出12份阳性,阳性率为20%.从代表性的8份鼠肺和8份病人血清中提取的标本二者之间M片段核苷酸序列的同源性高达95%以上,S片段之间的同源性高达96.5%以上.其推导的氨基酸序列同源性分别为98.0%～100%、98.4%～100%.深圳市HFRS疫源地鼠携带的汉坦病毒和人感染汉坦病毒均为汉城型S2亚型.结论 深圳市流行的汉坦病毒为SEO型S2亚型.无论是同一地区的鼠和人之间,还是不同地区的鼠和人之间,汉坦病毒都是具有较高的同源性.
- 阳帆何建凡刘建军陈戊申冼慧霞张海龙杨洪张仁利何雅青
- 关键词：汉坦病毒基因型PCR系统进化树
- 手足口病病毒分离方法的研究
- 目的：探讨影响手足口病病毒分离培养的可能因素以及方法的改进。方法：取手足口病患儿的粪便、肛拭子或脑脊液、疱疹液、咽拭子，其中以粪便为主，经Hank’s平衡缓冲液(HBSS)重悬震荡后，离心取上清液接种于横纹肌肉瘤传代细胞...
- 罗敏杨洪张海龙冼慧霞陈惠玲吴微姚相杰何雅青
- 关键词：手足口病病毒分离细胞病变效应
- 文献传递
- 2019—2021年深圳地区诺如病毒暴发分子流行特征被引量：2
- 2023年
- 目的了解深圳地区2019—2021年诺如病毒暴发分子流行特征。方法收集2019年1月至2021年12月诺如病毒暴发信息及标本,应用实时荧光反转录聚合酶链式反应样本进行诺如病毒检测,阳性样本通过RT-PCR扩增、测序和序列分析;对其中3株GII.2[P16]进行基因组扩增和序列分析。结果2019年1月至2021年12月,共报告诺如病毒暴发246起,主要发生在幼儿园(132,53.66%)和小学(52,21.14%)。每起暴发发病数范围为3~130,中位数为8。每年11月至次年3月为诺如病毒暴发的流行高峰。211起暴发分型成功,GI和GII分别检出7种和11种基因型,78起(36.97%)诺如病毒暴发由GII.2[P16]引起。对GII.2[P16]基因组分析表明,深圳2020年暴发株仍属于GII.2[P16](2016-2017)亚群,在非结构蛋白P22(L777S)和3C蛋白酶(A1047V和P1074T)上出现氨基酸变异。结论GII.2[P16]是2019年1月至2021年12月引起深圳市诺如病毒暴发的流行株,主要发生在学校和幼儿园,持续监测和基因组分析有助于发现流行株的变异和新毒株的出现。
- 张海龙孟君朱曦陈龙姚相杰韦杏燕杨艳辉杨洪旷翠萍靳淼何雅青
- 关键词：诺如病毒基因型基因组分析
- 2012年-2014年深圳市福田区诺如病毒感染情况分析被引量：3
- 2015年
- 目的了解深圳市福田区诺如病毒的感染情况,为制定预防诺如病毒感染的策略提供依据。方法采用实时荧光定量PCR对2012年-2014年深圳市福田区1 744例疑似腹泻患者粪便标本进行诺如病毒的核酸检测。结果 2012年-2014年福田区诺如病毒的总阳性率为20.87%,2012年阳性率高于2013年、2014年,差异均有统计学意义（P〈0.05）。不同性别阳性率差异无统计学意义（P〉0.05）。夏季的阳性率最高,达26.65%,春季次之（24.53%）,秋季、冬季的检出率则相对较低。除3岁-4岁年龄组患者的阳性率达40.00%外,其他年龄组患者的阳性率为16.67%-21.43%。结论诺如病毒是福田区病毒性腹泻的主要病原,各年度的感染率起伏较大。夏季是诺如病毒感染的高峰,应加强对诺如病毒腹泻的监测。
- 叶郁辉张海龙何雅青杨洪姚相杰钟景成
- 关键词：诺如病毒实时荧光定量PCR
