徐伟荣
- 作品数：36 被引量：162H指数：8
- 供职机构：宁夏大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学轻工技术与工程更多>>
- ‘红地球’葡萄花芽分化过程中VvARF18基因克隆与表达分析
- 2023年
- ARF是植物中一类重要的转录因子,广泛参与植物生长发育及各种生理过程。本研究以葡萄(Vitis vinifera) VvARF18基因为研究对象,进行生物信息学分析,并探究设施栽培条件下‘红地球’葡萄花芽分化进程中其表达丰度与光环境的关系,为设施栽培葡萄花芽分化的分子调控机理研究提供理论基础与参考。利用PCR技术从‘红地球’葡萄中同源克隆出VvARF18基因,该基因全长2 040 bp,编码679氨基酸,分子质量为60.399 kDa,理论等电点为8.81;VvARF18蛋白具有ARF家族蛋白特有的B3 DNA结合结构域和Auxin_resp结构域。系统进化分析表明VvARF18和茶树CsARF18亲缘关系最近,亚细胞定位与转录自激活结果表明VvARF18是一个定位在细胞核中且具有转录激活活性的转录因子。实时荧光定量PCR分析结果表明,在花芽分化进程中处理组VvARF18表达量均高于对照组,推测VvARF18响应红/蓝光4:1诱导表达参与葡萄花芽分化进程,其具体调控机制有待进一步研究。
- 袁苗徐伟荣刘鑫党仕卓周娟张亚红
- 关键词：花芽分化基因克隆
- 山葡萄低温诱导酵母双杂三框cDNA文库构建和VaCIPK18互作蛋白筛选鉴定被引量：4
- 2020年
- 类钙调磷酸酶B亚基蛋白CBL(calcineurinB-likeprotein)与其互作蛋白激酶CIPK(CBL-interacting protein kinase)组成的CBL-CIPK系统,在真核生物钙信号转导及各种胁迫应答途径中发挥重要作用。采用SMART与LD-PCR技术构建了山葡萄‘双丰’(Vitis amurensis Rupr.‘Shuangfeng’)叶片组织低温胁迫下的均一化酵母双杂交三框cDNA文库,库容量分别为1.7×106、1.3×106与1.9×106cfu·mL(-1),外源基因插入片段长度约为500~2000 bp,重组率为100%,符合后续双杂交筛选要求。以本课题组前期鉴定受低温诱导表达、具有核质亚细胞定位的山葡萄VaCIPK18全长(VaCIPK18)、激酶结构域缺失(VaCIPK18△STKc)以及NAF结构域缺失(VaCIPK18△NAF)为诱饵,进行酵母双杂交筛选,获得了17个候选互作靶蛋白;从中选取并克隆了7个参与非生物胁迫的候选互作蛋白进行酵母回转验证,仅发现1个ABA信号通路上游信号调节因子VaPYL9与VaCIPK18有互作关系。通过酵母双杂交和双分子荧光互补验证,确定了VaPYL9可与VaCIPK18和VaCIPK18△NAF在酵母中物理互作,而在植物拟南芥原生质体中VaPYL9与VaCIPK18△STKc和VaCIPK18△NAF互作,但与全长VaCIPK18不互作。
- 郑巧玲申威姚文孔徐伟荣
- 关键词：山葡萄低温胁迫
- 褪黑素在霞多丽葡萄种子体细胞胚诱导发生中的作用被引量：6
- 2021年
- 【目的】探究褪黑素在酿酒葡萄种子体细胞胚发生及循环诱导中的作用,建立以种子为外植体的体细胞胚诱导体系,为缩短葡萄属植物体胚诱导周期提供依据。【方法】以花后60、70、80 d的欧洲酿酒葡萄品种霞多丽、马瑟兰与美乐种子为外植体,研究不同切种和放置方法下,5种不同质量浓度(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg·L^(-1))褪黑素对其初生子叶胚萌发及二次胚循环诱的作用。【结果】花后80 d种子诱导率为18.33%,明显高于70 d和60 d,采用纵切法正放接种外植体30 d时,初生子叶胚萌发率达到最高,为33.07%,纵切倒放、横切正放和横切倒放的萌发率依次降低,为10.98%、5.71%和3.24%。褪黑素诱导3个酿酒葡萄品种萌发初生子叶胚的作用均强于2,4-D,其中,霞多丽种子在MS+0.6mg·L^(-1)褪黑素+2.0 mg·L^(-1)6-BA+30 g·L^(-1)蔗糖+3 g·L^(-1)植物凝胶+0.5 g·L^(-1)活性炭的培养基诱导30 d时,其初生子叶胚诱导率最高,为18.33%。利用霞多丽初生子叶胚切段循环诱导二次体细胞胚60 d时,开始出现二次体细胞胚,进一步诱导形成球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚。诱导至90 d时,在添加0.6 mg·L^(-1)褪黑素的培养基上诱导率最高,为14.40%,0.4 mg·L^(-1)次之,为3.13%,0.2 mg·L^(-1)诱导率为1.89%,而0.8、1.0 mg·L^(-1)褪黑素培养基和2,4-D诱导下无次生胚的形成。【结论】种子成熟度与初生子叶胚的萌发率呈正相关;种子纵切正放接种有利于初生子叶胚萌发;低质量浓度褪黑素对霞多丽种子萌发初生子叶胚及二次胚发生具有缩短诱导时间的作用。
- 张莹雅蓉徐伟荣王佳慧崔莹李俊铎
- 关键词：酿酒葡萄褪黑素接种方式体细胞胚胎发生
- 灵武长枣嫁接和根蘖繁殖植株果实转录组差异分析被引量：2
- 2021年
- 为解析嫁接繁殖和根蘖繁殖灵武长枣果实糖和酸转化差异,本研究以两种繁殖方式的成熟期果实为材料,利用高通量测序平台Illumina/Nova-Seq 2500进行了转录组测序,对转录组数据质量评估获得两样品的序列长度分别为24.48 Gb (嫁接)和28.64 Gb (根蘖),错误率为0.03%,GC含量44.11%~44.56%,Q30大于90.54%,转录组数据与冬枣基因组序列比对,所有的转录组Reads均分布于冬枣12条染色体上,基因定位的Reads数量嫁接繁殖比根蘖繁殖多;差异表达基因分析筛选到27个显著差异表达基因,其中9个显著上调,18个显著下调;GO富集分析表明15个差异基因显著富集到GO的三大功能类别分子功能、细胞组分、生物过程中;KEGG富集分析表明10个差异表达基因显著富集到12条代谢通路中,其中包括3个上调基因和7个下调基因;进一步筛选到调控糖及有机酸代谢关键差异基因BAM1、PCO和HAOX1在淀粉和蔗糖代谢、牛胆素和亚牛磺酸代谢、乙醛酸和二羧酸代谢中显著表达,并在糖和有机酸的相互转化中起着关键调控作用。本研究表明嫁接繁殖和根蘖繁殖灵武长枣果实在糖和有机酸代谢存在差异,为灵武长枣优质果品繁育提供理论基础。
- 马亚平白琳云徐伟荣徐伟荣曹兵宋丽华宋丽华
- 关键词：灵武长枣转录组糖代谢有机酸代谢差异表达基因
- 基于转录组研究光质对转色期红地球葡萄果实着色及品质的影响被引量：5
- 2021年
- 【目的】探讨不同光质对设施红地球葡萄果实着色及品质的影响,并从中挖掘出关键的光调控基因。【方法】以8年生红地球葡萄为试验材料,采用4种不同光质(红蓝光2:1、蓝光、红光、白光)补光处理设施红地球葡萄,以不补光为对照,对果实中花青素、还原糖、可滴定酸和可溶性固形物含量进行测定,并对果皮进行转录组测序。【结果】不同光质处理下果实中花青素、还原糖和可溶性固形物含量均高于对照,其中在蓝光处理下最高。利用FPKM计算基因表达量,以差异表达倍数|log2fold changes|≥1,P-adjust<0.05为筛选条件,共获得1313个差异表达基因,包括上调基因728个,下调基因585个,其中红蓝光、蓝光、红光、白光处理与对照之间的差异基因数目分别为638、434、375和320个。GO分析发现差异基因与代谢过程、细胞过程、膜、催化活性、结合等条目密切相关。KEGG分析发现不同光质通过调控葡萄光合作用、类黄酮生物合成、淀粉和蔗糖代谢等相关基因表达进而影响葡萄果实着色及品质。根据富集结果选取9个差异表达基因,经qRT-PCR验证,基因表达趋势与转录组测序结果一致。【结论】不同光质补光均能改善葡萄果实的着色及品质,其中以蓝光的效果最为明显;葡萄果实中类黄酮基因CHS、F3H及淀粉和蔗糖代谢基因INV、SPS、HK和BG的差异表达,是导致各处理葡萄果实着色及品质差异的重要原因。
- 刘帅张亚红徐伟荣刘鑫袁苗胡泽军
- 关键词：葡萄光质果实着色转录组测序
- 葡萄抗白粉病分子机理及调控关键技术创新与应用
- 余义和徐伟荣张会灵杨英军马慧丽边
- 葡萄白粉病是严重危害世界葡萄生产的一种病害。世界范围内广泛栽培的欧洲葡萄品种，虽然品质优良，但是其对病原菌的抗病性较差。中国是葡萄属植物的重要起源地之一，具有丰富的野生葡萄属种质资源，并携带大量的抗病基因资源。解析葡萄抗...
- 关键词：
- 关键词：葡萄白粉病病害防治
- 一种以葡萄种子为受体材料的农杆菌介导遗传转化方法
- 本发明公开了一种以葡萄种子为受体材料的农杆菌介导遗传转化方法，属于植物基因工程技术领域。该方法包括以下步骤：S1、葡萄种子经预处理后，培养至种皮开裂；S2、采用农杆菌侵染法将种皮开裂的葡萄种子侵染，得到侵染后的葡萄种子；...
- 徐伟荣张俊霞郝新意张宁波
- 山葡萄转录因子VaMYB4a互作蛋白的筛选与鉴定被引量：1
- 2023年
- 以抗寒种质山葡萄(Vitis amurensis Rupr.)‘左山-1’叶片组织为试材,通过Gateway技术构建酵母均一化cDNA文库,库容量为1.36×10^(7)cfu∙mL^(-1),外源基因插入片段均大于1 kb,重组率为100%,符合后续试验要求。以VaMYB4a^(113-252)C端调控区段为诱饵,经酵母双杂交筛选获得17个候选互作蛋白,选取2个与非生物胁迫应答密切相关的候选互作蛋白分别在酵母、拟南芥原生质体中进行互作验证,发现锌指类转录因子VaCOL4、VaCOL5均与VaMYB4a全长及VaMYB4a113-252存在互作关系。经系统进化与蛋白保守结构域分析,推测葡萄COL基因家族中VaCOL2与VaMYB4a具有潜在互作关系,进而通过BiFC验证表明,VaCOL2与VaMYB4发生蛋白互作;顺式作用元件预测表明VvCOL2、VvCOL4与VvCOL5启动子区包含多个激素及逆境应答相关元件,其中VvCOL2包括多个低温响应元件(LTRE);低温胁迫下,VaMYB4a、VaCOL4与VaCOL5具有相同的表达模式,但VaCOL2表达模式不同。综上,VaMYB4a可与VaCOL2、VaCOL4及VaCOL5互作形成蛋白复合体以协同或拮抗的方式调控植物低温胁迫应答。
- 俞沁含李俊铎崔莹王佳慧郑巧玲徐伟荣
- 关键词：山葡萄低温胁迫
- 山葡萄VaCBL6参与非生物胁迫和ABA途径的响应被引量：1
- 2021年
- 对山葡萄(Vitisamurensis)‘左山-1’中的1个类钙调素磷酸酶B亚基蛋白基因VaCBL6进行克隆及功能分析。VaCBL6位于第4条染色体,开放阅读框为777 bp,编码258个氨基酸;结构域分析表明,该蛋白包含4个EF-hand与1个跨膜结构域;蛋白进化树分析表明,VaCBL6与欧洲葡萄VvCBL9和VvCBL6相似性较高,分别为98.84%、94.96%。VaCBL6编码蛋白定位于细胞核与细胞膜。VaCBL6在根与卷须中有较高的表达,且其表达受低温、干旱、NaCl和ABA的诱导。基于酵母体系的转录激活分析表明,VaCBL6无转录激活活性。100~125μmol·L^(-1) NaCl和0.25~1.25μmol·L^(-1) ABA处理均抑制了VaCBL6转基因拟南芥种子的萌发,且转化拟南芥幼苗对NaCl与ABA的敏感性提高。以上结果说明VaCBL6在植物的逆境胁迫应答中具有重要作用。
- 马俊杰宋丽娜李乐马晓春靳磊徐伟荣
- 关键词：山葡萄非生物胁迫功能分析
- 一种提高赤霞珠葡萄幼苗抗倒春寒冻害能力的方法
- 本发明公开了一种提高赤霞珠葡萄幼苗抗倒春寒冻害能力的方法，涉及葡萄种植技术领域。本发明通过对赤霞珠葡萄幼苗的叶面避光喷施褪黑素水溶液，所述褪黑素水溶液的浓度为50‑200μmol/L。本发明能够显著提高幼苗的抗倒春寒冻害...
- 徐伟荣李俊铎郝新意张宁波
