徐冬
- 作品数：11 被引量：14H指数：2
- 供职机构：天津医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：天津市高等学校科技发展基金计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 慢性粒细胞白血病cyclin D2基因的表达研究被引量：8
- 2004年
- 目的 研究cyclinD2基因表达与慢性粒细胞白血病 (CML)特征性的P2 10 BCR ABL蛋白酪氨酸激酶活性之间的相关性。方法 以RT PCR、免疫印迹法及流式细胞术检测cyclinD2基因在BCR ABL +K5 6 2细胞系中的表达。通过表达抗ABL蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体的模型即K5 6 2 ib eGFP细胞 ,检测cyclinD2表达的变化。结果 在P2 10 BCR ABL 蛋白酪氨酸激酶活性受抑制的K5 6 2 ib eGFP细胞中 ,cyclinD2的表达 (18.90 % )明显低于K5 6 2细胞组 (48.10 % ) ,且K5 6 2 ib eGFP组S期细胞比例(40 4 0 % )也明显低于K5 6 2细胞组 (6 4 .34% )。结论 cyclinD2可能是CMLP2 10 BCR ABL 蛋白酪氨酸激酶下游相关信号传递分子 ,其表达增高可能促进了CML细胞的过度增殖。
- 宋俊敏徐冬范尔进徐世荣李董赵春华
- 关键词：慢性粒细胞白血病CYCLIN酪氨酸激酶恶性克隆性疾病
- 抗ABL酪氨酸激酶区胞内抗体促进K562细胞凋亡
- 目的:观察人慢性粒细胞白血病细胞转导抗ABL酪氨酸激酶区胞内抗体基因后,对其体外凋亡特性的影响。方法:构建逆转录病毒载体MSCV—ib—IRES—eGFP,将胞内抗体基因转导K562细胞,观察胞内抗体的表达和细胞内c— ...
- 徐冬任秀宝李慧张维红赵燕仪付晓达
- 关键词：胞内抗体K562细胞酪氨酸激酶凋亡
- 文献传递
- 可溶性sCD80-Linker-sCD40L融合蛋白诱导非特异性抗肿瘤免疫被引量：1
- 2007年
- 目的:观察可溶性sCD80-Linker-sCD40L融合蛋白对体外非特异性抗肿瘤免疫的影响。方法:以含sCD80-Lin- ker-sCD40L、sCD80、sCD40L编码基因的重组腺病毒载体或对照病毒载体转染人卵巢癌细胞SKOV3,ELISA检测上清中可溶性sCD80-Linker-sCD40L融合蛋白及sCD80、sCD40L蛋白的表达。由卵巢癌患者外周血单个核细胞培养树突状细胞(dendritic cells,DCs),将DCs和自体T细胞共同培养并加入不同上清诱导48h;用异基因混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)检测诱导的DCs刺激淋巴细胞增殖能力;以诱导的T细胞为效应细胞,SKOV3细胞或K562细胞为非特异性靶细胞,通过乳酸脱氢酶(lactate dehydrogemse,LDH)释放实验检测杀伤活性。结果:ELISA检测证实病毒转染SKOV3细胞上清中sCD80-Linker-sCD40L融合蛋白、sCD80蛋白和sCD40L蛋白表达量分别为2.791 ng/ml、1.956 ng/ml和1.407 ng/ml。MLR证实,与对照相比,融合蛋白上清诱导的DCs[刺激-反应细胞比例1:100,(0.382±0.053)vs(0.167±0.028),P<0.01;刺激-反应细胞比例1:50,(0.636±0.164)vs(0.311±0.067),P<0.01;刺激-反应细胞比例1:10,(1.245±0.271)vs(0.423±0.156),P<0.01]和sCD40L上清诱导的DCs[刺激-反应细胞比例1:100,(0.341±0.062)vs(0.167±0.028),P<0.01;刺激-反应细胞比例1:50,(0.567±0.106)vs(0.311±0.067),P<0.01;刺激-反应细胞比例1:10,(1.098±0.263)vs(0.423±0.156),P<0.01]刺激同种异基因混合淋巴细胞增殖能力明显增强。LDH释放实验提示,sCD40L上清诱导的T淋巴细胞对靶细胞非特异性杀伤活性显著强于对照SKOV3组[(42.28±6.27)vs(22.49±3.56),P<0.01]和K562组(47.94±6.72)vs (26.33±2.89),P<0.01],而融合蛋白上清诱导的T淋巴细胞对靶细胞非特异性杀伤活性显著强于sCD40L上清诱导的T淋巴细胞[sKOV3组为(58.97±8.92)vs(42.28±6.27),P<0.05;K562组为(66.55±9.43)vs(47.94±6.72),P<0.05]。结论:可溶性sCD80-Linker-sCD40L融合蛋白能有效诱导体外非特异性抗肿瘤免疫,对肿瘤免疫治疗具�
- 徐冬魏枫付晓达于津浦任秀宝
- 关键词：CD80CD40L抗肿瘤免疫
- 抗ABL酪氨酸激酶区胞内抗体抑制K562细胞体外生长
- 2008年
- 目的:观察人慢性粒细胞白血病细胞转导抗ABL酪氨酸激酶区胞内抗体基因后,对其体外生长的影响。方法:通过表达抗ABL蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体的模型:K562-ibE-eGFP细胞,观察该细胞与对照细胞在有血清培养条件下的细胞生长和无血清培养条件下细胞活力,并观察无血清培养24h细胞形态学变化。结果:与对照组相比,K562-ibE-eGFP细胞在有血清培养条件下生长受抑制,在无血清培养条件下细胞活力显著下降,并且无血清培养24h细胞出现早期凋亡形态变化。结论:通过转导抗ABL酪氨酸激酶区胞内抗体的方法能抑制慢性粒细胞白血病细胞体外生长,并促进其在无血清条件诱导下凋亡,这可能是细胞内酪氨酸激酶活性降低,BCR/ABL信号途径被阻断,逆转了BCR/ABL对细胞生长和凋亡的影响作用。
- 徐冬付晓达魏枫
- 关键词：胞内抗体BCR/ABL酪氨酸激酶
- 重组人FLT-3配体基因工程酵母菌株的发酵培养与纯化
- 任秀宝黄宗堂杨莉莉庞青松李慧于津浦张澎曹水徐冬
- 目的：在毕赤酵母（Pichia pastoris）中高效表达人FLT-3配体，利用3.7L的发酵罐优化发酵条件，探索并建立其纯化工艺。方法：KM71pPIC9K-FL工程菌接种于发酵罐高密度发酵，发酵上清经疏水层析和阳离...
- 关键词：
- 关键词：发酵纯化
- 抗ABL酪氨酸激酶区胞内抗体对K562细胞在裸鼠体内生长的影响被引量：5
- 2002年
- 目的观察人慢性粒细胞白血病细胞转导抗ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体基因后，对其在裸鼠体内生长的影响。方法应用基因重组技术构建逆转录病毒载体ＭＳＣＶ－ｉｂＥ－ＩＲＥＳ－ｅＧＦＰ，将胞内抗体基因转导Ｋ５６２细胞，观察胞内抗体的表达和细胞内ｃ－ＡＢＬ及ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶活性的变化；将表达胞内抗体的细胞与对照组Ｋ５６２细胞及转导空载体的细胞分别移植裸鼠，动态观察肿瘤的生长。结果获得表达胞内抗体基因的细胞模型：Ｋ５６２－ｉｂＥ，其靶蛋白酪氨酸激酶活性明显受抑。移植裸鼠后第１４，２１，２８天肿瘤体积均小于对照组的１／２。结论转导抗ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体的细胞在裸鼠体内生长明显受抑制，这可能与胞内抗体显著抑制细胞内ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶活性，阻断ＢＣＲ／ＡＢＬ信号途径，促进细胞凋亡，降低了细胞的体内致肿瘤性有关。
- 徐冬宋俊敏呼莹郭虹曹德骏汪萍刘辉赵春华
- 关键词：胞内抗体K562细胞BCR/ABL酪氨酸激酶裸鼠
- sCD80-Linker-sCD40L融合基因重组腺病毒载体的构建及其在NIH3T3细胞的表达
- 2007年
- 目的:构建人sCD80-Linker-sCD40L融合基因重组腺病毒载体,观测其在真核细胞中的表达。方法:以RT-PCR法从人外周血单个核细胞总RNA扩增IL12B亚基信号肽、sCD80和sCD40L编码序列,以重叠PCR法获得带有IL12B亚基信号肽的sCD80-Linker-sCD40L融合基因。使用AdMax腺病毒包装系统构建携带融合基因的重组腺病毒载体。以重组病毒感染NIH3T3细胞,观察融合基因的表达。结果:经测序证实,正确构建了携带sCD80-Linker-sCD40L融合基因的重组腺病毒载体。RT-PCR和Western blot证实融合基因在NIH3T3细胞中表达。结论:成功构建了携带sCD80-Linker-sCD40L融合基因的重组腺病毒载体,并在真核细胞中表达,为后续研究奠定了基础。
- 徐冬魏枫于津浦付晓达任秀宝
- 关键词：CD80CD40L融合基因腺病毒载体
- 人源化抗人纤维蛋白单链抗体-链亲和素融合蛋白的表达和功能被引量：1
- 2000年
- 目的 探索人源化抗人纤维蛋白单链抗体 链亲和素融合蛋白的表达和功能。方法 构建人源化抗人纤维蛋白单链抗体 (ScFv 8E5 )基因与链亲和素基因的重组表达载体 ,制备融合蛋白 ,ELISA观察其稳定性、与人及不同动物纤维蛋白的反应。结果 人源化融合蛋白可特异性识别人、大鼠、豚鼠纤维蛋白 ,同时有生物素的结合位点 ,且稳定性好 ,可耐受至少两周 4℃保存 ,数次反复冻融或一定时间的 37℃孵育。结论 此人源化融合蛋白适用于大鼠及豚鼠血栓病模型 ,是作临床前研究的有用材料。
- 李文平许静隋建华徐冬宋增璇
- 关键词：抗纤维蛋白人源化融合蛋白链亲和素单链抗体
- 乳腺癌患者来源抗Her-2/neu全人源性单链抗体的构建
- 张斌宋增璇牛瑞芳王欣宁连胜徐冬孙涛
- 采用乳腺癌患者前哨淋巴结作为B细胞来源，并利用拓扑异构酶将扩增出的可变区片段与T载体高效连接构建出了带有SfiⅠ、BssHⅡ酶切位点的pVH-T文库和带有NheⅠ、NotⅠ酶切点的pVκ-T、pVλ-T文库。通过对pCA...
- 关键词：
- 关键词：乳腺癌治疗基因工程
- 慢性粒细胞白血病的基因治疗策略
- 2002年
- BCR/ABL融合基因及其表达产物p210^(BCR/ABL)对慢性粒细胞白血病(CML)的发生具有决定性作用。近年来对CML分子发病机制的深入研究,为治疗CML提供了多种思路,涌现出了包括生物治疗在内的许多新疗法,有些已进入临床试验或临床治疗。本文概述了针对CML BCR/ABL信号转导途径的各种基因治疗策略,大致可分为以下四类:抑制癌基因表达,抑制BCR/ABL信号通路下游重要分子基因表达,阻抑BCR/ABL蛋白产物的功能,免疫治疗。
- 徐冬
- 关键词：慢性粒细胞白血病基因治疗BCR/ABL信号转导
