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曹亮

作品数:3 被引量:4H指数:2
供职机构:汕头大学医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇野生型
  • 1篇印迹
  • 1篇印迹法
  • 1篇人野生型P5...
  • 1篇克隆
  • 1篇基因
  • 1篇基因表达
  • 1篇P53
  • 1篇P53蛋白
  • 1篇P53基因
  • 1篇CDNA
  • 1篇纯化

机构

  • 2篇汕头大学
  • 2篇香港大学

作者

  • 2篇吴文翰
  • 2篇曹亮
  • 2篇钟叔平

传媒

  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇免疫学杂志

年份

  • 1篇1999
  • 1篇1997
3 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
人野生型p53 cDNA的克隆、表达和意义被引量:2
1999年
目的:为探讨肿瘤细胞wtp53蛋白功能失活机制的研究,检测肿瘤患者血清抗p53抗体辅助临床诊断提供人wtp53蛋白。方法:将人wtp53基因cDNA片段插入到大肠杆菌表达载体pQE-30中,得到重组表达质粒pQE30-p53;用pQE30-p53重组质粒转化大肠杆菌M15细胞,转化菌落经PCR扩增和BamHⅠ、XbaⅠ酶切证实p53基因插入。IPTG诱导大肠杆菌表达wtp53蛋白,通过Ni-NTA亲和层析柱纯化,SDS-PAGE分离。结果:IPTG诱导后的大肠杆菌出现明显的53kD蛋白带,免疫印迹进一步证实:大肠杆菌可表达高水平的人wtp53蛋白。结论:这种原核细胞表达的人wtp53蛋白具有天然的p53蛋白的抗原性,可用于p53蛋白的体外分析。
钟叔平曹亮吴文翰
关键词:印迹法P53基因CDNA克隆基因表达
p53蛋白的免疫亲和层析纯化被引量:2
1997年
建立了p53单克隆抗体pAb1801的免疫亲和层极法纯化p53蛋白,所纯化的p53蛋白经WesternBlot(ECL法)检测证明:用此法从p53阳性的SW480细胞中分离到p53蛋白。银染显示pH2.0甘氨酸缓冲液比pH2.8的甘氨酸缓冲液洗脱效果好,这种方法的建立将为分离肿瘤细胞中引起p53蛋白功能失活和研究肿瘤发生机制提供一种有效途径。
钟叔平曹亮吴文翰
关键词:P53纯化
共1页<1>
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