2025年1月29日
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曹亮
作品数:
3
被引量:4
H指数:2
供职机构:
汕头大学医学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
生物学
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合作作者
钟叔平
香港大学
吴文翰
香港大学
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医药卫生
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印迹法
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人野生型P5...
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克隆
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基因
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基因表达
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P53
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P53蛋白
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P53基因
1篇
CDNA
1篇
纯化
机构
2篇
汕头大学
2篇
香港大学
作者
2篇
吴文翰
2篇
曹亮
2篇
钟叔平
传媒
1篇
中国病理生理...
1篇
免疫学杂志
年份
1篇
1999
1篇
1997
共
3
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人野生型p53 cDNA的克隆、表达和意义
被引量:2
1999年
目的:为探讨肿瘤细胞wtp53蛋白功能失活机制的研究,检测肿瘤患者血清抗p53抗体辅助临床诊断提供人wtp53蛋白。方法:将人wtp53基因cDNA片段插入到大肠杆菌表达载体pQE-30中,得到重组表达质粒pQE30-p53;用pQE30-p53重组质粒转化大肠杆菌M15细胞,转化菌落经PCR扩增和BamHⅠ、XbaⅠ酶切证实p53基因插入。IPTG诱导大肠杆菌表达wtp53蛋白,通过Ni-NTA亲和层析柱纯化,SDS-PAGE分离。结果:IPTG诱导后的大肠杆菌出现明显的53kD蛋白带,免疫印迹进一步证实:大肠杆菌可表达高水平的人wtp53蛋白。结论:这种原核细胞表达的人wtp53蛋白具有天然的p53蛋白的抗原性,可用于p53蛋白的体外分析。
钟叔平
曹亮
吴文翰
关键词:
印迹法
P53基因
CDNA
克隆
基因表达
p53蛋白的免疫亲和层析纯化
被引量:2
1997年
建立了p53单克隆抗体pAb1801的免疫亲和层极法纯化p53蛋白,所纯化的p53蛋白经WesternBlot(ECL法)检测证明:用此法从p53阳性的SW480细胞中分离到p53蛋白。银染显示pH2.0甘氨酸缓冲液比pH2.8的甘氨酸缓冲液洗脱效果好,这种方法的建立将为分离肿瘤细胞中引起p53蛋白功能失活和研究肿瘤发生机制提供一种有效途径。
钟叔平
曹亮
吴文翰
关键词:
P53
纯化
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