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重组类丝状蛋白在大肠杆菌中的表达及其溶液态结构分析: 2006年; 利用基因重组技术表达了具有[(GVPGV)2GG(GAGAGS)3AS]n一级结构的类丝状蛋白质(BcEn),该蛋白是把源于弹性蛋白的氨基酸序列GVPGV插入到蚕丝蛋白的结晶序列GAGAGS中,以期利用该弹性片段来调控类丝状蛋白质材料高级结构的形成以及结晶程度,从而达到控制材料性能的目的。利用园二色CD光谱对BcEn在溶液状态下的结构进行了初步分析,结果显示在对BcEn具有良好溶解性的氟有机物水合六氟丙酮中,其结构的形成依赖于BcEn分子量的大小,分子量越大越易形成比较稳定的α-螺旋结构。; 姚菊明励丽李媛; 关键词：弹性蛋白

桑蚕丝素-RGD融合蛋白的固态结构及其细胞粘附性分析被引量：9: 2006年; 利用基因工程方法把含有短肽RGD的氨基酸序列连接到桑蚕丝素蛋白的结晶序列GAGAGS上,通过调节DNA的聚合度,合成了具有[TGRGDSPA(GVPGV)2GG(GAGAGS)3AS]n一级结构、不同分子量大小的桑蚕丝素-RGD融合蛋白,并且通过在M9培养基中添加[3-13C]Ala的方法进行融合蛋白的稳定同位素标记.13CCP/MASNMR结果显示,融合蛋白中的GAGAGS部分具有与天然桑蚕丝素结晶部分相同的分子结构,即SilkI处理后为均一的分子结构,而SilkII处理后为不均一的分子结构,它包含了三种不同的结构成分.另一方面,通过对小鼠成纤维细胞BALB/3T3在不同蛋白材料载体上的粘附和增殖性能的测定结果显示,融合蛋白对细胞的增殖性能与天然胶原蛋白相近,但表现出了比胶原蛋白更好的细胞粘附性能.该研究结果显示,如果对该桑蚕丝素-RGD融合蛋白进行适当加工,可能适合于组织工程支架材料的应用.; 姚菊明祝永强李媛励丽; 关键词：RGD 融合蛋白核磁共振细胞粘附性

家蚕丝素-RGD融合蛋白的盐析纯化工艺探讨被引量：2: 2007年; 利用基因重组技术合成了具有良好细胞粘附活性的重组家蚕丝素-RGD融合蛋白质(Silk-RGD),探讨了其盐析的工艺条件。研究发现,在融合蛋白等电点pH8附近,当硫酸铵在溶液中的饱和度较低(10%)时,其蛋白质沉淀量随着温度的升高而增加;当硫酸铵的饱和度升至20%时,蛋白质沉淀量不再随着温度的变化而变化,但与低饱和度硫酸铵时相比,沉淀量明显增加;当硫酸铵的饱和度升至30%或以上时,沉淀中杂蛋白含量明显增多,不利于目的蛋白的纯化。Silk-RGD融合蛋白相对合理而且易操作的盐析纯化条件为:pH8,硫酸铵在溶液中的饱和度为20%,室温(约20℃)。利用该工艺条件,可以低成本、高效率地生产Silk-RGD融合蛋白,从而满足新型材料规模化开发的需要。; 李媛白利强姚菊明; 关键词：精氨酸甘氨酸天冬氨酸盐析法

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李媛