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李景荣
作品数:
2
被引量:1
H指数:1
供职机构:
江苏先声药物研究有限公司
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发文基金:
“重大新药创制”科技重大专项
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相关领域:
生物学
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合作作者
殷晓进
江苏先声药物研究有限公司
陈悦
江苏先声药物研究有限公司
付中平
江苏先声药物研究有限公司
段须杰
江苏先声药物研究有限公司
张弢
江苏先声药物研究有限公司
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殷晓进
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1篇
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重组蛋白ES-Kringle5的表达、纯化及活性检测
被引量:1
2014年
目的:利用基因工程方法原核表达重组融合蛋白ES-Kringle5并进行纯化及活性检测。方法:ES-Kringle5是将内皮抑素N端的前27个氨基酸与Kringle5通过连接肽相连的重组融合蛋白,合成该重组蛋白的基因片段并插入载体pMD18-T中,然后克隆至大肠杆菌表达载体pET25b中并转化E.coli BL21(DE3)。乳糖诱导表达后经Ni-NTA亲和层析纯化后获得目的蛋白。通过抑制HUVEC细胞增殖实验检测其生物学活性。结果:重组质粒构建正确。利用乳糖诱导表达并降低诱导温度能增加目的蛋白的产量及可溶性表达。纯化后的重组蛋白纯度大于95%。生物学活性证明该重组蛋白具有抑制HUVEC的增殖能力。结论:具有生物学活性的重组蛋白ESKringle5可在大肠杆菌中高效表达,为研究其体内药效、药代及安全性评价奠定了基础。
陈悦
付中平
李景荣
殷晓进
关键词:
原核表达
抗血管生成
KRINGLE5
内皮抑素
一种抗VEGF抗体的用途
本发明涉及生物医药领域,具体公开抗VEGF抗体治疗肿瘤的用途,对于多种癌症均有显著的疗效。
李景荣
张弢
段须杰
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