李波翰 作品数:5 被引量:10 H指数:2 供职机构: 山东大学第二医院 更多>> 发文基金: 山东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
BMP-2体外诱导小鼠皮肤成纤维细胞向成骨细胞分化的可行性探讨 被引量:2 2018年 目的探讨骨形态发生蛋白-2(BMP-2)体外诱导小鼠皮肤成纤维细胞向成骨细胞分化的可行性。方法培养新生小鼠皮肤成纤维细胞,应用BMP-2诱导骨化,观察细胞形态变化,并应用茜素红染色和BMP免疫荧光进行细胞鉴定。结果应用含有BMP-2细胞培养液培养成纤维细胞,可见细胞形态学逐渐发生变化,具有成骨细胞形态学相关特征,茜素红染色阳性,具有成骨细胞生物学特性。茜素红染色半定量分析结果:含有BMP-2细胞培养液培养6 d后茜素红染色测定染色面积比例为0.3%;培养8 d后染色面积比例为0.75%;培养10 d后染色面积比例为2.42%;培养12 d后染色面积比例为17.61%。培养12 d后茜素红染色面积与其他三个时间点比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。免疫荧光显示,含有BMP-2细胞培养液培养12 d后细胞能够有效表达BMP-2。结论BMP-2可诱导成纤维细胞在体外分化为成骨细胞。 李波翰 赵乾 刘斌 高春正 吴东进 赵延英 潘霄瀚 张颖哲关键词:成骨细胞 骨化 骨形态发生蛋白-2 siRNA抑制转化生长因子-β1对小鼠黄韧带骨化的影响 被引量:6 2014年 目的运用RNA干扰(RNAi)技术抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)在小鼠黄韧带成纤维细胞中的表达,探讨其对脊柱黄韧带骨化的影响。方法培养小鼠黄韧带成纤维细胞,经人重组骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导骨化,对骨化成功的黄韧带细胞(成骨细胞)进行形态学观察,并对其进行碱性磷酸酶(ALP)染色及钙结节茜素红染色鉴定;构建靶向TGF-β1基因的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体(siRNA-pSilencer2.0U6-TGFβ1)并转染成骨细胞,分为3组:真核表达载体转染后细胞为实验组,空载体转染后细胞为阴性对照组,未转染细胞为空白对照组。应用免疫荧光技术检测转染前后细胞中TGF-β1、BMP-2的表达;RT-PCR检测TGF-β1 mRNA在细胞内表达变化;Western blotting检测TGF-β1和BMP-2蛋白在细胞内表达变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞中ALP、骨钙素(OC)水平的变化。结果经诱导骨化成功后,小鼠黄韧带细胞形态学观察可见细胞ALP染色、钙结节茜素红染色均呈阳性,具有典型成骨细胞生物学特征。构建的siRNA表达载体对细胞转染后,免疫荧光检测显示TGF-β1和BMP-2荧光强度下降;RT-PCR检测显示实验组较阴性对照组和空白对照组TGF-β1 mRNA表达分别下降41.94%、47.82%,差异有统计学意义(P<0.01);Western blotting检测显示实验组较阴性对照组和空白对照组TGF-β1/β-action蛋白表达比值分别下降35.88%、44.75%,差异有统计学意义(P<0.01);BMP-2/β-action蛋白表达比值分别下降81.79%、86.06%,差异有统计学意义(P<0.01);ELISA检测显示实验组较阴性对照组和空白对照组ALP分别下降24.14%、32.30%,差异有统计学意义(P<0.01);OC分别下降17.01%、21.63%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论构建靶向TGF-β1基因的siRNA真核表达载体能够有效抑制成骨细胞中TGF-β1以及内源性BMP-2表达,达到抑制脊柱黄韧带骨化的目的。 张颖哲 吴东进 彭长亮 李波翰 宋扬 张程 赵杰 李德全 杨中雁 刘鹏 赵坤 马胜忠 高春正关键词:骨化 骨钙素 转化生长因子-Β1 骨形态发生蛋白-2 周围神经吻合后神经生长因子-纤维蛋白胶包埋的临床观察 2013年 目的回顾分析周围神经损伤吻合后神经生长因子-纤维蛋白胶(NGF-FG)包埋的临床疗效。方法将2006年1月~2011年12月四肢周围神经损伤住院患者76例分为两组,2006~2007年为对照组(36例),2008~2011年为治疗组(40例)。对照组采用单纯外膜缝合,治疗组采用外膜吻合后加用NGF-FG包埋,分析感觉功能、运动功能、临床疗效和肌电图检查结果。结果对照组感觉功能评定有效率为75.00%,优良率为45.00%;治疗组有效率为86.96%,优良率为69.56%。对照组运动功能评定有效率为72.50%,优良率为45.00%;治疗组有效率为86.96%,优良率为65.22%。对照组临床疗效评定有效率为72.50%,优良率为47.50%;治疗组有效率为86.96%,优良率为67.39%。对照组肌电图恢复评定有效率为72.50%,优良率为47.50%;治疗组有效率为86.96%,优良率为69.57%。两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论用含有神经生长因子的纤维蛋白胶包埋离断周围神经的吻合口,能促进神经纤维功能的恢复,是修复周围神经损伤的一种较好方法。 李波翰 吴东进 宋杨 张程 赵杰 李德全 张颖哲 马胜忠 高春正关键词:周围神经损伤 神经生长因子 纤维蛋白胶 神经修复 P200复合波在记忆障碍患者中的诊断价值 被引量:1 2017年 目的探讨脑白质疏松(leukoaraiosis,LA)患者图片刺激事件相关电位(event related potential,ERP)的特征,寻找早期发现和评价LA患者记忆障碍的新方法,提高认知损害的诊断水平。方法连续选择2010年6月~2011年3月在我院经MRI检查确诊为LA的患者30例作为LA组,同时选取健康体检者30例作为对照组,对所有受试者应用学习再认试验范式进行图片刺激,同时记录脑电图,离线处理后对2组受试者所诱发的ERP进行分析比较。结果单纯记忆任务范式图片刺激相关的ERP主要成分为P200,学习与再认过程均未出现明显的N100及P300波。图片再认过程中,对照组旧图图片刺激诱发的P200波幅明显高于新图[(10.08±0.98)μVvs(8.45±1.16)μV,P=0.000],LA组旧图图片刺激诱发的P200波幅与新图无统计学差异[(10.52±1.52)μVvs(11.12±2.99)μV,P=0.331]结论 LA患者存在记忆受损,P200可作为早期评价LA患者记忆受损的辅助工具。 刘美英 黄苗苗 房哲 李波翰 刘斌 朱梅佳关键词:脑白质疏松症 诱发电位 记忆障碍 磁共振成像 周围神经吻合后神经生长因子-纤维蛋白胶包埋的临床观察 研究背景:
周围神经损伤在骨科创伤中十分常见。周围神经损伤后病理过程比较复杂,神经再生速度缓慢,神经吻合后局部组织粘连,肌肉失神经萎缩及运动终板退化变性等因素,均制约着损伤神经再生及功能恢复,临床治疗效果仍不十分理... 李波翰关键词:周围神经损伤 神经生长因子 纤维蛋白胶 文献传递