李臻
- 作品数：14 被引量：16H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划吉林省应用基础研究项目吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学交通运输工程更多>>
- 链重叠PCR构建抗HIV免疫毒素及其表达与鉴定被引量：3
- 2007年
- 目的提高抗HIV免疫毒素DT-ScFv原核表达的可溶性与生物活性。方法利用链重叠PCR融合的方法,构建了免疫毒素DT-ScFv,二者之间添加了connector序列,免疫毒素基因PCR连接测序以后,将其克隆入pET28a质粒,在BL21(DE3)工程菌中诱导表达,通过免疫印迹鉴定表达的重组蛋白,并通过与表达HIV-1gp120的靶细胞的间接免疫荧光实验,验证免疫毒素的细胞识别结合能力。结果本研究成功地构建了免疫毒素DT-ScFv,经原核表达证明目的蛋白以部分可溶的形式存在于表达菌中,添加的connector序列有助于DT-ScFv在细胞中获得正确折叠,重组免疫毒素能与表达gp120的细胞发生特异性的识别结合。结论利用链重叠PCR融合的方法,添加connector序列,有助于提高免疫毒素表达的可溶性与生物活性。本研究对抗HIV免疫毒素的活性研究与应用研究具有重要的意义。
- 金洪涛金宁一李臻李昌付延军王宏
- 关键词：免疫毒素原核表达
- 一种HIV复合多表位DNA疫苗及其应用
- 本发明公开了一种HIV复合多表位DNA疫苗，其是以HIV－1衣壳蛋白p24为载体骨架分子，以ER信号肽作为引导序列，包含有HIV基因组中26个高度保守的免疫优势表位，其中包括3个中和抗体表位和23个CTL表位；1个HIV...
- 金宁一李昌李霄鲁会军田明尧金扩世申镇维金洪涛李臻付延军
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白和SEA共表达核酸疫苗的构建及鉴定被引量：3
- 2008年
- 构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白和金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)共表达的核酸疫苗,并研究其表达产物的抗原性。将采自长春患PRRS病猪的组织剪碎充分研磨,提取病毒RNA后,用RT-PCR的方法特异性扩增PRRSV长春株的ORF6基因(M蛋白)片段。将该片段定向插入到载体pKS-SEA上,双酶切获得片段SEA-ORF6,再将其克隆到真核表达载体pVAXI中,构建重组质粒pVAXI-SEA-ORF6,转化大肠杆菌。经酶切鉴定后,将构建的阳性重组质粒在BHK细胞中表达。通过间接免疫荧光方法初步检测所表达蛋白的抗原性,用Western blot分析表达蛋白的特异性。结果表明,所构建的重组质粒pVAXI-SEA-ORF6在BHK细胞中得到了表达,为进一步研究PRRSV基因工程疫苗奠定了基础。
- 韩贞珍金宁一沈国顺庄天中孙中锋李臻付延军李太元李红文郑敏
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征核酸疫苗
- DNA表达载体构建及HIV多表位核酸疫苗的设计与表达被引量：3
- 2007年
- 目的利用塞姆利基森林病毒(SFV)复制子构建新型真核表达载体,并对含HIV-1中国流行株B亚型核心蛋白p24及多表位MEG嵌合基因的核酸疫苗进行表达与鉴定。方法将含SFV复制子的元件从pSFV-MCS中切下,连入含CMV启动子及增强子的pIRESneo载体中,构建新型真核表达载体pCS,再将含HIV-1 MEGp24基因插入至pCS载体中,构建重组核酸疫苗pCS-MEGp24。用脂质体法将重组质粒转染入BHK-21细胞,进行表达产物的检测。结果间接免疫荧光检测显示,重组质粒转染的BHK-21细胞能有效表达HIV-1 MEGp24,并与HIV阳性血清反应。结论所构建的核酸疫苗可在BHK-21细胞系内进行表达,且MEGp24基因的表达蛋白具有特异性,为构建新型HIV-1中国流行株核酸疫苗的可行性提供了重要实验依据。
- 付延军金宁一金洪涛李臻辛苏文李萍韩贞珍李太元
- 关键词：人免疫缺陷病毒复制子核酸疫苗
- 新型鸡痘病毒重组转移载体的构建
- 本文将鸡痘病毒的TK基因分三段经PCR克隆,在每两个片断中间设计酶切位点XhoⅠ和HindⅢ/SacⅠ,并连入pMD载体中.由早晚期启动子p7.5控制的筛选标记基因gpt和由晚期启动子pL控制的报告基因LacZ串联后,克...
- 李臻金宁一金洪涛郑敏付延军辛苏文
- 关键词：鸡痘病毒TK基因
- 文献传递
- 表位及多表位疫苗的研究进展
- 随着分子免疫学的飞速发展,人们对于抗原诱导机体免疫反应的机制有了更加深入的了解。同时发现,对于一个大的抗原分子来说,通过免疫细胞的加工、提呈,最后与效应细胞识别、作用的部分只有8-16个左右大小的氨基酸组成的多肽,通常称...
- 金洪涛金宁一李臻
- 文献传递
- 一种HIV复合多表位DNA疫苗及其应用
- 本发明公开了一种HIV复合多表位DNA疫苗，其是以HIV-1衣壳蛋白p24为载体骨架分子，以ER信号肽作为引导序列，包含有HIV基因组中26个高度保守的免疫优势表位，其中包括3个中和抗体表位和23个CTL表位；1个HIV...
- 金宁一李昌李霄鲁会军田明尧金扩世申镇维金洪涛李臻付延军
- 文献传递
- 新型抗病毒蛋白2CVN融合基因的构建、表达与纯化被引量：1
- 2007年
- 目的构建新型抗病毒蛋白2CVN融合基因,增强CVN对病毒的结合性及中和活性,为进一步研究抗病毒药物奠定基础。方法采用PCR法,以pBluescriptⅡSK(+)-CVN质粒为模板,扩增CVN片段,在引物中引入Linker序列,将扩增的CVN片段与载体pET-CVN连接,构建pET-2CVN原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),进行表达及产物纯化。结果表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析,相对分子质量为29000,与理论预期值完全相符。凝胶成像分析表明目的蛋白表达量可占菌体总蛋白的31.48%,纯化后的目的蛋白纯度达95%以上。结论已成功构建了2CVN融合基因,并获得高效表达。
- 刘玉生金宁一李昌于芳佟敬山胡宁宁金洪涛李臻
- 关键词：抗病毒蛋白融合基因原核表达
- 汽车稳定性控制系统中的统一车速估计方法的研究
- 汽车稳定性控制是当前国际上汽车主动安全领域的研究热点,随着控制技术的发展和系统成本的降低,将很有可能全面替代ABS成为现代汽车的标准装备。在我国,汽车稳定性控制的研究刚刚起步,开展这项研究具有重要的现实意义和广阔的应用前...
- 李臻
- 关键词：稳定性控制卡尔曼
- 文献传递
- HIV多表位核酸疫苗免疫实验及鸡痘病毒转移载体的构建研究
- 本研究利用已经设计并人工合成的多表位基因,以HIV-1巨分子颗粒p24为支架,连入安全的真核表达载体质粒pVAX1,构建了新型HIV多表位重组DNA疫苗（pVAX1-MEGN-p24）,细胞转染结果表明,pVAX1-ME...
- 李臻
- 关键词：HIV多表位基因核酸疫苗重组鸡痘病毒
- 文献传递
