李飏
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省高技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 华根霉前导肽和成熟肽脂肪酶基因的克隆表达及性质研究被引量：2
- 2009年
- 以华根霉(Rhizopus chinensis CCTCCM201021)为出发菌株,提取总DNA,PCR扩增出前导肽脂肪酶基因(proRCL)及成熟肽脂肪酶基因(mRCL),克隆到原核载体pET-28a,转化E.coli BL21(DE3),诱导表达并纯化出活性目的蛋白。经SDS-PAGE分析,重组蛋白ProRCL和MRCL的分子量分别约43kD和33kD。两重组脂肪酶主要酶学性质基本相似,最适反应温度均为35℃,40℃下较为稳定;最适反应pH相近,分别为8.0和8.5;以pNP脂肪酸酯为底物,均对短链脂肪酸酯底物特异性较高。MRCL上述性质与野生型RCL基本一致。研究结果表明,通过条件控制可以利用E.coli表达系统表达具有活性的华根霉前导肽脂肪酶ProRCL和成熟肽脂肪酶MRCL。与米根霉脂肪酶(ROL)不同,前导序列对华根霉脂肪酶的主要酶学特性没有显著影响。
- 李飏王栋徐岩
- 关键词：华根霉克隆
