公共文化服务平台

共 9 条记录，以下是 1-9

全选清除导出

排序方式：

可表达人呼吸道合胞病毒融合蛋白的辅助病毒依赖型腺病毒载体的构建与制备: 目的:人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory Syncytial Virus，RSV)广泛流行于世界各地，是婴幼儿下呼吸道感染的最重要病原。目前尚无安全、有效的疫苗用于预防RSV感染。RSV两个重要的糖蛋白...; 杨兵; 关键词：逆转录聚合酶链式反应免疫印迹人呼吸道合胞病毒; 文献传递

Glut-1、VEGF在胰腺癌中的表达及意义: 原发性胰腺癌是临床上表现隐匿、病情进展讯速、恶性度非常高的肿瘤，预后极差、生存率极低。其生物学特点是:易侵犯神经、血管、淋巴结，同时转移率高，加上其解剖位置深在、隐蔽及缺乏特异性标记物和特异性症状等特点，易发生肿瘤的复发...; 杨兵; 关键词：胰腺癌葡萄糖转运蛋白肿瘤标记物血管生成免疫组织化学染色; 文献传递

T7 RNA聚合酶的克隆及其介导基因转录功能的鉴定被引量：7: 2007年; 目的构建含T7RNA聚合酶(T7RNA Polymerase,T7RNP)的真核表达载体,同时构建含T7启动子、增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)和T7RNP转录终止信号的载体,并通过观察EGFP的表达推测T7RNP表达和T7表达系统介导基因转录的功能。方法根据编码T7RNP的基因序列,应用PCR技术从含有T7RNP基因的E.coli BL21(DE3)基因组中扩增编码T7RNP的基因片段,克隆至载体pcDNA3·1(+)。同时从px8δt载体和pGEM-Teasy/EGFP上切下T7RNP识别的终止信号(terminator,TER)和编码EGFP的基因,克隆至载体pcD-NAII。将获得的两个重组质粒共转染BHK细胞。48h后,通过观察EGFP基因在真核细胞内的表达情况,推测T7RNP基因的表达及表达后识别T7启动子介导基因转录功能。结果成功构建了含T7RNP编码基因的真核表达载体pcDNA3·1(+)/T7RNP和原核表达载体pcDNAII/EG-FP/TER,共转染BHK细胞后,可观察到EGFP表达的绿色荧光。结论T7RNP能顺利在真核细胞内表达,并通过与T7启动子和TER的相互作用,成功实现了EGFP基因的转录和表达。; 虞结梅杨兵谢灿陆燕燕何金生

人呼吸道合胞病毒RNA聚合酶复合体蛋白N、P的表达鉴定被引量：1: 2006年; 本研究根据编码A亚型人呼吸道合胞病毒(HumanRespiratorySyncytialVirus,HRSV)核壳体蛋白(Nucleocapsidprotein,N)和磷蛋白(phosphoprotein,P)的基因序列,各设计一对特异性的引物,应用RT-PCR技术,从感染HRSV的HEp-2细胞中扩增获得n和p的基因片断,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)。获得的重组质粒通过脂质体Lipofectamine2000转染COS-7细胞,72h后再用Westernblot鉴定蛋白的表达。结果显示真核表达载体pcDNA3.1(+)/N和pcDNA3.1(+)/P的限制性内切酶分析结果与预期一致,基因序列分析显示没有发生无义突变,利用蛋白印记方法也检测到了N和P的特异性条带。于是我们认为成功构建了含有HRSVN和P编码基因的真核表达载体,在真核细胞内能顺利表达。为进一步开展HRSV反向遗传学等研究奠定了基础。; 虞结梅何金生李栋梁杨兵袁媛; 关键词：磷蛋白真核表达

102例尿路结石成分分析被引量：26: 2011年; 目的探讨102例尿石症患者尿路结石成分组成,为临床防治尿石症提供一定依据。方法对102例尿路结石标本进行物理方法的红外光谱测定,并结合临床资料进行分析。结果尿路结石发病男性高于女性,比例为2.64∶1;好发年龄20～60岁,占85.29%;上尿路结石高于下尿路结石,占94.12%;混合性结石高于单一性结石,占83.33%。结石中草酸钙测出率最高,单一成分全部为草酸钙结石,混合结石中几乎都含有草酸钙成分。结论结石成分分析对于了解结石成因、预防结石形成和复发、建立结石防治体系具有重要意义。; 杨兵孙西钊李龙王贺彬吴刚陈冬武立新方志启

人呼吸道合胞病毒F基因的克隆、真核表达与鉴定被引量：5: 2006年; 目的克隆人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)F基因,构建F基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/F,并进行表达和鉴定。方法根据编码F蛋白的基因序列设计引物,通过RT-PCR从感染HRSV的HEp-2细胞中扩增获得F蛋白的基因,然后克隆到pGEM-3zf载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),行酶切鉴定,脂质体法转染COS-7细胞,应用Western blotting方法分析F基因表达情况。结果测序证实得到HRSV F基因序列,序列分析显示没有发生无义突变。转染COS-7细胞后,利用Western blotting方法检测到了F蛋白的特异性条带。结论成功克隆HRSV F基因,并在真核细胞中获得表达。; 袁媛何金生张梅宋蔚李栋梁虞结梅杨兵; 关键词：人呼吸道合胞病毒 F基因真核表达

HDAd/F载体及制备方法和用途: 一种表达RSV F蛋白的HDAd/F载体，由HDAd载体质粒和含有编码RSV F蛋白基因的HDAd穿梭质粒构建、辅助病毒辅助得到的载体，包括左、右侧末端倒置重复序列ITRs，包装信号ψ，在I－Sce I和I－Ceu I之...; 何金生石长信洪涛杨兵谢灿付远辉张梅彭向雷; 文献传递

真核双表达载体pIRES-hVEGF_(121)cDNA/hBMP-4的构建与鉴定被引量：8: 2007年; 目的构建人血管内皮生长因子(hVEGF121)和人骨形态发生蛋白-4(hBMP-4)的真核双表达质粒,转染COS-7细胞并表达。方法将hVEGF121 cDNA和hBMP-4通过非定向和定向克隆至真核双表达质粒pIRES中,重组质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4,经酶切鉴定后,转染COS-7细胞,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测。结果真核双表达载体pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4构建成功且hVEGF121cDNA和hBMP-4在COS-7细胞中得到了有效表达。结论hVEGF121和hBMP-4在COS-7细胞中成功表达,为进一步研究打下良好基础。; 韩雷汪春兰赵宇何金生王帮河王兴宇杨兵周志林

可表达人呼吸道合胞病毒融合蛋白辅助病毒依赖型腺病毒载体的构建与制备被引量：11: 2007年; 构建可表达A亚型人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytialvirus,RSV)融合蛋白(fusion protein,F)的辅助病毒依赖型腺病毒载体(helper-dependent adenoviral vector,HDAd),并完成大量制备、纯化和F蛋白的体外表达鉴定。将带有CMV启动子序列的F基因亚克隆至克隆载体pSC11,鉴定正确后,克隆至HDAd质粒pSC15B,构建pSC15B/F HDAd重组质粒,PmeⅠ消化pSC15B/F去除原核复制元件及抗性基因,获得HDAd/F DNA分子,经磷酸钙共沉淀法转染293Cre4细胞,16h后感染辅助病毒,收获HDAd/F载体粗提液,随后以HDAd/F粗提液及辅助病毒连续共感染293Cre4细胞直至HDAd/F达到复制极限,同时以可表达β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,LacZ)报告基因的HDAdLacZ载体作为平行对照监测载体复制过程。与辅助病毒共感染293Cre4细胞进一步扩增HDAd/F、CsCl梯度法超速离心制备大量纯化的HDAd/F载体,体外感染293细胞,RT-PCR检测到F基因有转录,Western blot分析表明F蛋白有特异性表达。总之,成功构建HDAd/F载体并在真核细胞中实现表达,为体内免疫学效力试验奠定基础,为研制RSV疫苗提供了一种新方法。; 杨兵何金生石长信张梅虞结梅谢灿陆燕燕付远辉彭向雷洪涛; 关键词：逆转录聚合酶链式反应免疫印迹

全选清除导出

共1页<1>

杨兵