杨旦阳
- 作品数:3 被引量:7H指数:1
- 供职机构:宁波大学更多>>
- 发文基金:教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 香鱼CCL4-like基因的克隆、序列分析及免疫相关性表达变化分析
- 香鱼(Plecoglossus altivelis)隶属胡瓜鱼目(Osmeriformes)香鱼科(Plecoglossidae),是一种重要的淡水养殖鱼类。趋化因子是一类能诱导免疫细胞激活和迁移的趋化性细胞因子的总称,...
- 杨旦阳
- 关键词:香鱼鳗利斯顿氏菌分子克隆实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 虹鳟LECT2的酵母表达、纯化及生物活性分析
- 2013年
- 白细胞衍生趋化因子2(leukocyte cell-derived chemotaxin2,LECT2)是一个参与多种生理和病理过程的分泌型细胞因子。该文采用毕赤酵母表达体系分泌表达虹鳟LECT2,用阳离子交换柱结合分子筛层析方法分离纯化目的蛋白,并获得纯度为96%,得率为120mg/L的重组虹鳟(Oncorhynchus mykiss)LECT2酵母培养物。生物学活性验证表明该重组蛋白能趋化虹鳟头肾来源的巨噬细胞,增强其呼吸爆发和杀菌能力,并改变其细胞因子等基因的表达。综上,该实验建立了一种快速有效的虹鳟LECT2活性重组蛋白的制备方法,为后续相关蛋白的功能研究奠定了基础。
- 史雨红章瑞程杨旦阳陆新江陈炯李明云
- 关键词:纯化生物活性虹鳟
- 香鱼CCL4-like基因的克隆、序列分析及免疫相关性表达变化分析被引量:7
- 2013年
- CC型趋化因子是一种多功能的趋化因子,是鱼类先天免疫系统的重要组成部分。该研究通过文库测序方法获得香鱼(Plecoglossus altivelis,ayu)CCL4-like(aCCL-like)基因cDNA序列。它编码一个由123个氨基酸组成的前肽,N-端22个氨基酸为信号肽序列。成熟肽包含4个半胱氨酸残基,可形成2个二硫键。系统进化树分析揭示,aCCL4-like与大西洋鲑(Salmo salar,atalantic salmon)CCL4亲缘关系最近。实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)分析揭示,aCCL4-like基因mRNA在检测的健康香鱼7个组织中均有表达,其中肝的表达量最高;在鳗利斯顿氏菌(Listonella anguillarum)感染后,各组织中aCCL4-like基因mRNA表达均显著变化,但各时间点变化不一,其中肠组织的变化最为明显。随后原核表达了aCCL4-like并制备相关抗血清,Western blot分析揭示,鳗利斯顿氏菌注射后4 h的血清中CCL4-like含量无显著变化,8 h时显著增加,此后表现为持续增加。综上,aCCL4-like基因的表达变化与鳗利斯顿氏菌的感染过程密切相关,推测aCCL4-like可能在香鱼抗病原菌感染的免疫反应过程中有重要作用。
- 杨旦阳陈炯陆新江史雨红李明云
- 关键词:香鱼鳗利斯顿氏菌实时荧光定量PCR