毛琼国
- 作品数：24 被引量：75H指数：6
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 小鼠IL-3 cDNA逆转录病毒载体的构建及在NIH3T3细胞中的表达
- 1993年
- 为了探讨放射损伤小鼠IL-3基因治疗可能性,本文作者将小鼠IL-3cDNA亚克隆到逆转录病毒载体pLXSN上。将重组的逆转录病毒载体用电穿孔法和磷酸钙共沉淀法转染双向包装细胞系PA317,经新霉素类抗菌素G418选择,得到了多个产病毒细胞克隆。用含有复制缺陷病毒的产病毒细胞培养上清转化NIH3T3细胞,得到了数个自发分泌IL-3的克隆。在去掉G418,传代15代,约2个月后,这些克隆分泌IL-3的能力没有明显的变化。
- 刘昕朱锡华谭骏毛琼国王艳
- 关键词：基因治疗
- 压电C肽免疫传感器的实验研究
- 2002年
- 目的 构建一种新型压电C肽免疫传感器。方法 AT切向、基频 10MHz的石英晶体用金属夹具和乳胶套圈固定形成检测池 ,抗人C肽单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电极表面制成抗体敏感膜 ,构成压电C肽免疫传感器。结果 构建的压电C肽免疫传感器对C肽的响应特性良好 ,其线性检测范围为 0 3 75～ 12 0ng ml ,胰岛素、胰岛素原对C肽的检测基本无干扰 ,传感器可再生后重复使用 5次 ;5 8例临床标本检测结果与放射免疫检测法符合 (P >0 0 5 ) ,两种方法的相关系数为 0 94。结论 研制的压电C肽免疫传感器具有灵敏度高、特异性好、不需标记、操作简单、省时、能实时在线检测和重复使用等优点 ,对比实验表明其检测结果准确 ,能用于临床实验诊断 ,具有临床推广价值。
- 张波府伟灵毛琼国汤万里俞凡
- 关键词：传感器免疫C肽压电
- 人促红细胞生成素cDNA逆转录病毒载体的构建及在NIH3T3和CHO细胞中的表达
- 1997年
- 贫血是慢性肾衰病人常见的症状,其发生的主要原因之一是由于肾脏表达促红细胞生成素(EPO)的量减少。输入基因工程重组的人EPO可以有效地改善病人的症状。由于在体内只有完全糖基化的EPO才有生理活性,所以目前临床所用EPO均来自工程化的哺乳动物细胞,价格昂贵。随着基因治疗研究的进展,人们设想可以采用基因治疗的方法,在体内表达一些有治疗作用的蛋白质。
- 刘昕毛琼国章波郭华阳纪贤文
- 关键词：人促红细胞生成素重组逆转录病毒载体CHO细胞NIH3T3细胞CDNA
- 人白细胞介素3突变体的构建及其在大肠杆菌中表达的研究
- 1997年
- 人白细胞介素3(IL-3)是与造血有关的细胞因子,可直接诱导人骨髓和外周血干细胞的集落形成和增殖。IL-3可通过高亲合力的结合位点对成熟骨髓效应细胞(巨噬细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞)发挥作用,可促进巨噬细胞、嗜酸性细胞和嗜碱性细胞的活力,延长存活期并抑制其死亡。rhIL-3还可提高巨噬细胞和嗜酸性细胞的细胞毒、杀菌以及杀癌细胞的能力。IL-3以非融合型蛋白难于在大肠杆菌中高效表达。本室应用遗传工程技术构建了pBV220
- 王燕刘昕万瑛易绍萱纪贤文梁红毛琼国朱锡华
- 关键词：大肠杆菌中表达突变体嗜酸性细胞分子生物起始密码子
- 人T细胞基因组随机MARs的分离、克隆及序列分析被引量：4
- 2004年
- 目的 分离、克隆人基因组随机MARs片段 ,分析其序列特征 ,为进一步研究MARs在真核细胞DNA复制及基因表达调控中的作用与机制奠定基础。方法 用DNaseⅠ、高盐和蛋白酶K处理细胞核 ,分离人T细胞基因组随机MARs片段 ,并将其克隆进入PUC19质粒 ;用体外结合实验筛选能与核基质蛋白结合的克隆并测序 ,生物信息学分析其序列的特征。结果 从人T细胞基因组中分离得到大量的MARs片段 ,构建成MARs库 ,初步任意挑选 5 8个克隆 ,体外结合实验证实其具有与核基质蛋白结合活性 ,对其中 1个克隆的序列分析表明 ,其序列AT含量较高 ,不仅含有AC 和ATAT基序 ,还包含有多个转录 复制起点、增强子序列、弯曲DNA和扭结DNA基序以及多个反向重复序列。结论 分离获得的DNA片段具有MAR的特性 ,同一DNA序列中存在不同的元件组合 ,其参与基因表达调控的功能应该是复杂。
- 毛琼国白云张波黄钢王燕代佳平
- 关键词：核基质核基质附着区基因组DNA
- 压电石英晶体免疫传感器在前列腺特异抗原检测的实验研究被引量：13
- 2003年
- 目的 构建一种检测前列腺特异抗原 (PSA)的新型压电石英晶体免疫传感器。方法采用AT切型、基频 10MHz的金膜电极石英晶体用金属夹具和乳胶套圈固定形成检测池 ,抗人PSA单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电极表面制成抗体识别膜 ,构成压电PSA免疫传感器 ,同时对 5 6例临床血清标本进行检测 ,并与化学发光免疫分析法进行比较。结果 构建的压电PSA免疫传感器对PSA的响应特性良好 ,其线性检测范围为 1 2 5～ 5 0ng/ml,批内、批间变异系数 (CV)分别小于 4 0 %和 6 0 % ,与化学发光免疫分析法具有良好的相关性 (r =0 95 ,P >0 0 5 ) ,癌胚抗原(CEA)、甲种胎儿球蛋白 (AFP)、人绒毛膜促性腺激素 (hCG)等对PSA的检测基本无干扰 ;传感器可再生后重复使用 5次。结论 压电PSA免疫传感器具有灵敏度高、特异性好、不需标记、操作简单、省时、能实时在线检测和重复使用等优点 ,是一种检测PSA的新方法 ,适用于临床检测 ,有推广价值。
- 张波府伟灵毛琼国张雪陈鸣蒋天伦俞凡
- 关键词：前列腺特异抗原前列腺肿瘤
- 压电胰岛素-C肽微阵列免疫传感器研究被引量：6
- 2004年
- 以 AT切型、基频 10 MHz的镀金膜石英晶体作为换能器 ,将抗人胰岛素和 C肽单克隆抗体固定在石英晶体电极表面 ,用 2× 5检测池固定夹具构建一种新型压电胰岛素 - C肽微阵列免疫传感器 .研究了抗体固定方法、抗体工作浓度、固定量、一致性以及传感器的响应参数如检测温度、时间和特异性等的影响 .该微阵列传感器在胰岛素浓度为 2 .5～ 16 0 .0 m IU/ L、C肽浓度为 0 .375～ 12 .0 ng/ m L范围内响应特性良好 ,压电晶体频率偏移值与胰岛素和 C肽浓度呈良好的线性关系 .将此微阵列传感器用于人血清标本的测定 ,结果与放射免疫法符合 ( r为 0 .92和 0 .94 ) .此微阵列传感器具有灵敏度高、特异性好 ,低密度阵列结构 ,检测通量较高 ,不需标记 ,操作简单、能实时在线检测和重复使用等优点 ,能用于临床实验诊断 ,具有临床推广应用价值 .
- 张波府伟灵毛琼国张雪汤万里俞凡
- 关键词：压电免疫传感器微阵列胰岛素C肽
- 引物二聚体在目的基因克隆中的应用初探被引量：3
- 2001年
- 目的 根据引物二聚体形成原理 ,建立一种新的克隆目的基因的方法。方法 人工合成两条或两条以上 3′端互补配对的寡核苷酸链 ,寡核苷酸链、Taq酶和dNTP按一定比例混合 ,PCR扩增延伸 ,琼脂糖凝胶电泳鉴定结果。结果 PCR产物经电泳鉴定 ,可见一条清晰的特异条带。结论 此方法能合成 5 0 0bp以下的短片段目的基因。
- 徐祥刘昕梁华平代佳平毛琼国罗艳
- 关键词：基因克隆聚合酶链反应
- 压电石英晶体凝血酶时间检测传感器的构建及初步研究被引量：3
- 2006年
- 采用AT切向、基频10MHz的银膜石英晶体为压电元件,建立一种检测血浆凝血酶时间(TT)的压电石英晶体传感器。加入凝血酶启动凝血反应后,晶体振荡频率呈阶梯状快速下降,终点附近频率瞬时上升,然后缓慢降低达到平稳,频率下降的起点为血浆凝集反应的起始点,频率从快速上升变为下降的转折点为凝集反应终点,两点之间的时间差即为TT。该方法检测重复性较好,批内变异系数(CV)为2.26%,批间CV为7.53%,临床检测结果与STAGO检测法的相关性好(相关系数γ=0.964)。压电石英晶体传感器检测TT,凝集反应起点和终点判断方便、可靠,检测成本低廉,结果准确,是一种敏感性高、重复性好的TT检测新方法,具有推广应用价值。
- 张波府伟灵毛琼国陈庆海张雪汤万里俞凡
- 关键词：压电石英晶体传感器凝血酶时间
- 人基因组随机MARs的分离、克隆及其功能的初步研究
- 背景与目的
随着人类基因组序列草图的完成,基因组学研究的广泛开展,基因表达调控研究已经逐渐从单个基因点、线式的调控拓展到立体层面上多基因、基因簇以至整个基因组的调控网络。在遗传调控过程中,反...
- 毛琼国
- 关键词：基因组基序克隆
- 文献传递
