沈哲
- 作品数:24 被引量:56H指数:5
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- 寡核苷酸抑制LINGO-1基因表达调控的实验研究
- 2011年
- 目的:利用人工合成以LINGO-1基因的mRNA为靶目标的内切磷硫酰核酸序列的寡聚脱氧核糖核苷酸(oligodeoxyribonucleotides,ODN-PSsXT-1),对脊髓损伤部位进行干预,分析LINGO-1表达的改变。方法:采用新生SD大鼠60只制成脊髓损伤模型后,再随机分为ODN-PSsXT-1实验组30只和实验对照组30只进行干预实验;在不同的时间段,利用免疫组化染色,Western blot和RT-PCR方法对细胞表达的LINGO-1 mRNA进行分析。结果:Western blot和RT-PCR分析结果表明,XT-1ODN-PSs可减少LINGO-1基因的表达。结论:人工合成XT-1ODN-PSs寡核苷酸对脊髓损伤后LINGO-1表达有明显的抑制作用,从而有利于脊髓损伤后的再生。
- 卢文浩余铮沈哲
- 关键词:寡核苷酸脊髓损伤LINGO-1
- 1,25(OH)_(2)D_(3)调控维生素D受体表达对H_(2)O_(2)诱导的髓核细胞氧化应激损伤的影响
- 2024年
- 目的 探讨1,25(OH)_(2)D_(3)介导维生素D受体(VDR)表达对髓核细胞氧化应激损伤的影响。方法 将人椎间盘髓核细胞随机分为对照组、H_(2)O_(2)组(400μmol·L^(-1 )H_(2)O_(2))、1,25(OH)_(2)D_(3)组[100.00 nmol·L^(-1) 1,25(OH)_(2)D_(3)+400μmol·L^(-1 )H_(2)O_(2)],1,25(OH)_(2)D_(3)+si-NC组[100.00 nmol·L^(-1) 1,25(OH)_(2)D_(3)+400μmol·L^(-1 )H_(2)O_(2)+si-NC],1,25(OH)_(2)D_(3)+si-VDR组[100.00 nmol·L^(-1) 1,25(OH)_(2)D_(3)+400μmol·L^(-1 )H_(2)O_(2)+si-VDR]。以噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,以蛋白质印迹法检测各组细胞蛋白表达水平,以流式细胞术、JC-1荧光探针法、DCFH-DA探针法分别检测细胞凋亡、线粒体膜电位、活性氧(ROS)水平,以试剂盒检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果 对照组、H_(2)O_(2)组、1,25(OH)_(2)D_(3)组、1,25(OH)_(2)D_(3)+si-NC组和1,25(OH)_(2)D_(3)+si-VDR组的细胞存活率分别为(100.00±2.43)%、(63.79±5.21)%、(90.11±7.24)%、(88.79±6.48)%和(55.31±4.65)%,VDR蛋白相对表达水平分别为0.79±0.06、0.28±0.03、0.68±0.05、0.69±0.06和0.34±0.04,细胞凋亡率分别为(4.12±0.26)%、(19.37±1.21)%、(8.49±0.57)%、(8.23±0.60)%和(14.68±1.37)%,线粒体膜电位水平分别为(100.00±4.31)%、(49.46±5.02)%、(82.14±7.02)%、(83.14±5.12)%和(67.16±5.48)%,ROS水平分别为1.79±0.12、7.98±0.51、3.87±0.34、3.92±0.22和5.79±0.28,Beclin-1蛋白相对表达水平分别为0.86±0.09、0.35±0.04、0.76±0.07、0.75±0.08和0.46±0.05,LC3-Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白相对表达水平分别为1.00±0.07、0.25±0.04、0.78±0.07、0.85±0.08和0.42±0.05。H_(2)O_(2)组的上述指标与对照组比较,1,25(OH)_(2)D_(3)组的上述指标与H_(2)O_(2)组比较,1,25(OH)_(2)D_(3)+si-VDR组的上述指标与1,25(OH)_(2)D_(3)+si-NC组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 1,25(OH)_(2)D_(3)可能上调VDR表达促进髓核细胞自噬、抑制细胞凋亡,发挥抗氧化应激损伤。
- 沈哲蓝涛郭伟壮
- 关键词:髓核细胞维生素D受体氧化应激
- MIS-TILF技术对腰椎退行性疾病治疗的临床疗效
- 目的总结MIS-TILF技术对腰椎退行性疾病治疗的临床效果.方法采用MIS-TILF技术对腰椎退行性疾病进行治疗,其中腰椎管狭窄症患者35例;腰椎间盘脱出症49例;腰椎滑脱症21例,年龄29岁-82岁,平均年龄46.7岁...
- 杨欣建颜滨曾腾辉沈哲
- 关键词:脊柱融合术微创
- 长臂单轴椎弓根螺钉与单平面椎弓根螺钉内固定治疗创伤性胸腰椎骨折复位力度比较被引量:2
- 2023年
- 背景:经皮入路行长臂单轴椎弓根螺钉固定与微创经皮单平面椎弓根螺钉内固定均是临床常用的经典微创手术方案,但两种术式在治疗胸腰椎骨折方面尚存在争议。目的:对比经皮入路长臂单轴椎弓根螺钉与微创经皮单平面椎弓根螺钉内固定治疗胸腰椎骨折的优势与局限。方法:纳入2017年3月至2021年6月广州中医药大学深圳医院(福田)收治的90例胸腰椎骨折患者,利用随机数表法分对照组(n=45)与试验组(n=45)。对照组进行微创经皮单平面椎弓根螺钉内固定手术,试验组进行经皮入路长臂单轴椎弓根螺钉内固定手术,对比两组围术期一般情况、疼痛程度、恢复情况相关指标及并发症。结果与结论:①与对照组相比,试验组术中失血量较少、手术时间及住院时间缩短(P<0.05);②术后2周、1个月,试验组Oswestry功能障碍指数、Cobb角均低于对照组(P<0.05),伤椎前缘高度与后缘高度大于对照组(P<0.05);术后2个月,试验组Oswestry功能障碍指数、Cobb角均低于对照组(P<0.05),两组间伤椎前缘高度与后缘高度比较差异无显著性意义(P>0.05);术后2周,试验组目测类比评分低于对照组(P<0.05);③对照组45例中发生切口感染2例、运动障碍2例、植入物相关不良反应1例,总发生率为11%;试验组45例中发生运动障碍2例,总发生率为4%,两组间并发症总发生率比较差异无显著性意义(P>0.05);④结果显示,经皮入路长臂单轴椎弓根螺钉与微创经皮单平面椎弓根螺钉内固定治疗胸腰椎骨折均可取得较好效果,但经皮入路长臂单轴椎弓根螺钉内固定手术时间较短、术中失血量少,故在获取同等效益情况下其是理想术式选择。
- 陈肖何斌斌周友亮赵亮张新国蒋子云沈哲
- 关键词:胸腰椎骨折
- PKP在治疗骨质疏松性脊柱压缩骨折中的应用被引量:10
- 2008年
- 目的评价经皮椎体后凸成形术(PKP)治疗骨质疏松性脊柱压缩性骨折的初步临床疗效。方法7例骨质疏松性脊柱压缩性骨折采用PKP手术治疗,统计手术前后疼痛视觉评分(VAS)和Oswestry功能评分,测量椎体高度和Cobb角。结果VAS评分由术前平均(8.6±0.2)分改善到术后(2.0±0.3)分(P<0.01),Oswestry评分由术前(43±1.12)分到术后(20±0.19)分(P<0.01),椎体高度由术前(15.1±1.8)mm到术后(24.3±2.1)mm,Cobb角由术前的(21.2±4.3)°到术后(10.1±3.2)°(P<0.05)。结论PKP手术可有效恢复骨质疏松性椎体压缩性骨折椎体高度,缓解疼痛,是一种安全、有效的治疗方法。
- 陈扬李振宇闫洪印曾腾辉何伟余铮颜滨沈哲
- 关键词:椎体压缩骨折骨质疏松PKP
- 寡核苷酸对脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白聚糖表达调控的实验研究
- 2010年
- 目的用人工合成的内切磷硫酰寡脱氧核糖核苷酸(ODN-PSs)对脊髓损伤进行干预,分析硫酸软骨素蛋白聚糖表达,探讨ODN-PSs与神经损伤修复的关系。方法采用改良AllenWD法[1]制成脊髓损伤模型后,再随机分为ODN-PSsXT-1实验组30只和实验对照组30只进行干预实验;利用免疫组化染色,Western blot和RT-PCR方法对细胞表达的硫酸软骨素蛋白聚糖和木糖基转移酶-1(XT-1)mRNA进行分析。结果免疫印迹和RT-PCR分析结果表明,XT-1ODN-PSs可减少减少CSPG蛋白和XT-1基因的表达。结论人工合成XT-1ODN-PSs寡核苷酸对脊髓损伤后硫酸软骨素蛋白聚糖表达有明显的抑制作用,从而有利于损伤神经核突起的再生。
- 沈哲周文钰余铮
- 关键词:脊髓损伤硫酸软骨素蛋白聚糖
- RNA干涉技术对星形胶质细胞Nogo表达调控的实验研究
- 2009年
- 目的采用RNA干涉技术使Nogo基因沉默,阻断抑制因子的传导通路,通过RNA干涉小发夹抑制内源性Nogo基因在星形胶质细胞的表达,促进中枢神经轴突再生。方法采用星形胶质细胞体外诱导培养技术,制备得到条件培养的细胞;利用斑点杂交、免疫印迹和RT-PCR方法对RNA干涉小发夹有效地沉默了Nogo基因进行分析。结果制备的星形胶质细胞采用抗GFAP抗体进行免疫细胞化学染色法进行鉴定,纯度在95%以上;条件培养星形胶质细胞的免疫印迹和RT-PCR分析结果表明,特异性Nogo干涉小发夹抑制了Nogo在脊髓中的表达。结论人工合成寡核苷酸对星形胶质细胞Nogo基因表达有明显的抑制作用,从而有利于损伤神经核突起的再生。
- 陈扬沈哲李振宇颜滨周文珏
- 关键词:SIRNA星形胶质细胞NOGO基因
- 人尿液干细胞对大鼠脊髓损伤神经凋亡的保护作用及相关机制研究
- 2018年
- 目的探讨人尿液干细胞(h USCs)对大鼠脊髓损伤(SCI)后神经凋亡的保护作用及其相关机制。方法体外获取h USCs进行增殖培养,利用流式细胞仪检测h USCs细胞表型。Allen法制作大鼠脊髓损伤模型,42只大鼠随机等分为3组:对照组,SCI组和h USCs+SCI组。分别于7 d、14 d和21 d对各组大鼠下肢运动功能评分,21 d后取出各组大鼠损伤脊髓进行组织切片染色,并利用Western blot法检测脊髓Bax/Bcl-2含量,ELISA法检测Caspase-3含量。结果h USCs细胞表型CD29表达(98.92±0.62)%,CD73表达(99.14±0.86)%,CD34表达(0.47±0.16)%。与对照组比较,SCI组大鼠下肢运动功能明显下降,Bax蛋白表达、Caspase-3含量明显增加,Bcl-2蛋白表达明显下调。h USCs在7 d、14 d和21 d可明显改善SCI大鼠下肢运动功能;与SCI组比较,h USCs+SCI组大鼠损伤脊髓节段Bax蛋白表达、Caspase-3含量得到抑制,Bcl-2蛋白表达显著提高;ELISA结果显示,h USCs+SCI组可显著降低损伤脊髓中Caspase-3含量。结论 h USCs对大鼠脊髓损伤神经凋亡具有明显抑制作用,可能是通过抑制Bax、Caspase-3,提高Bcl-2蛋白表达实现的。
- 沈哲郭伟壮杨欣建
- 关键词:脊髓损伤凋亡
- 封闭灌洗技术对脊柱内固定术后深部感染的治疗
- 目的:探讨脊柱内固定术后深部感染的治疗策略,寻找最佳的治疗方案。方法:回顾分析我科收治的脊柱内固定术后三个月内深部感染32例的临床资料,根据治疗方式分为传统治疗组(清创、引流、换药)共17例,负压封闭灌洗组(VSD/VK...
- 杨欣建曾腾辉沈哲颜滨
- 颈椎椎弓根螺钉系统在颈椎管狭窄失稳症的应用(附12例临床分析)
- [目的]:探讨颈椎椎弓根钉内固定治疗颈椎管狭窄的临床常见问题及处理方法。[方法]:采用颈椎弓根内固定治疗颈椎管狭窄12例,所有病例术前均行X线,CT及MRI检查并根据测量结果对每一椎弓根钉实施个体化置入。[结果]:12例...
- 陈扬李振宇闫洪印颜滨沈哲周文玉曾腾辉
- 关键词:椎弓根钉内固定术
- 文献传递