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焦石: 作品数：23 被引量：21H指数：3; 供职机构：延边大学农学院更多>>; 发文基金：吉林省自然科学基金吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学经济管理更多>>

合作作者

牛卵形巴贝斯虫PCR检测方法的建立及初步应用被引量：4: 2012年; 为建立牛卵形巴贝斯虫(B.ovata)快速检测方法,本研究根据GenBank中登录的B.ovata CCTη基因序列设计引物,建立了PCR检测方法。对该方法的最佳反应条件进行优化,并进行特异性、敏感性及临床样本检测试验。结果表明,建立的PCR方法扩增B.ovata CCTη基因片段大小为1 008 bp,与参考株序列同源性为100%。该方法对牛巴贝斯虫、牛双芽巴贝斯虫、牛瑟氏泰勒虫基因组DNA扩增结果均为阴性。最低可以检测样品中34个拷贝的DNA。通过对49份临床样本的检测,该方法比姬姆萨染色镜检阳性率高8.2%。本实验为B.ovata的诊断提供了一种特异、敏感的检测技术。; 黄国明贾立军薛书江李闯焦石张守发; 关键词：PCR

犬新孢子虫MAG1与IFN-γ融合基因重组真核质粒的真核共表达及免疫学评价: 2012年; 为对犬孢子虫MAG1与IFN-γ融合基因重组真核质粒进行免疫学评价,本实验以含有MAG1-IFN-γ基因片段的克隆质粒为模板,扩增MAG1-IFN-γ目的片段,构建pVAX-MAG1-IFN-γ重组真核表达质粒,将其转染Vero细胞,采用间接免疫荧光(IFA)和western blot技术检测MAG1基因在Vero细胞中的表达,并免疫BALB/c小鼠,进行免疫学评价。结果表明,PCR扩增获得基因片段大小为1 536 bp,与GenBank中登录的MAG1和IFN-γ核苷酸序列的同源性为99%;IFA检测MAG1基因在Vero细胞中获得瞬时表达,转染的Vero细胞呈现特异性绿色荧光;western blot分析表达蛋白的分子量为57 ku,具有较好的反应原性。将构建的重组真核表达质粒免疫BALB/c小鼠,经间接ELISA和T淋巴细胞亚群含量测定表明,重组质粒具有较好的免疫原性。本实验为新孢子虫病核酸疫苗的深入研究奠定了基础。; 焦石贾立军张立霞钱年超刘明明黄国明张守发; 关键词：犬新孢子虫

牛源犬新孢子虫MAG1基因的克隆及原核表达: 为了解牛源犬新孢子虫MAG1基因的生物学特性。本试验应用PCR技术扩增牛源犬新孢子虫MAG1基因,将PCR产物连接到pMD18-T Simple载体,构建pMD18-T-MAG1克隆质粒,PCR鉴定、酶切鉴定及测序分析后...; 焦石贾立军薛书江刘明明黄国明张守发; 文献传递

犬新孢子虫MAG1与IFN—γ融合基因重组真核质粒的真核共表达及免疫学评价: 2013年; 为对犬孢子虫MAGI与IFN-γ融合基因重组真核质粒进行免疫学评价，本实验以含有MAGI—IFN—γ基因片段的克隆质粒为模板，扩增MAGI—IFN—γ目的片段，构建pVAX-MAGI—IFN-γ重组真核表达质粒，将其转染Vero细胞，; 焦石贾立军张立霞; 关键词：犬新孢子虫基因重组共表达 VERO细胞

牛新孢子虫NcSAG1基因工程亚单位疫苗的免疫试验被引量：4: 2010年; 为了解新孢子虫NcSAG1表面蛋白基因工程亚单位疫苗对实验动物的免疫效果,本试验提取延边黄牛新孢子虫野毒株基因组DNA,用PCR技术扩增新孢子虫NcSAG1表面蛋白基因,并在大肠杆菌中进行原核表达,将Western-blot鉴定具有免疫活性的重组蛋白与弗氏佐剂混合制备NcSAG1基因工程亚单位疫苗,免疫BALB/c小鼠,应用间接ELISA方法测定体液免疫水平,应用流式细胞技术测定细胞免疫水平,以此评价疫苗对实验动物的免疫应答反应。结果显示,制备的NcSAG1基因工程亚单位疫苗免疫BALB/c小鼠后,在三免后第3天时,检测抗体的OD450nm值达0.688;CD4+/CD8+值达3.650,均显著高于重组蛋白免疫组和PBS对照组,说明制备的基因工程亚单位疫苗能够提高实验动物的体液免疫和细胞免疫水平。本试验为牛新孢子虫NcSAG1表面蛋白基因工程亚单位疫苗的深入研究奠定了基础。; 贾立军张守发栾杨焦石; 关键词：新孢子虫基因工程亚单位疫苗免疫试验

犬新孢子虫MAG1与IFN-γ融合基因重组质粒的构建及原核共表达被引量：2: 2013年; 根据发表的犬新孢子虫MAG1基因序列(EF580924.1)和Bov IFN-γ基因序列(M29867.1)设计2对引物。分别以犬新孢子虫基因组DNA和pET28α-IFN-γ重组质粒为模板,通过重叠延伸拼接聚合酶链式反应(SOE-PCR)将犬新孢子虫MAG1基因与IFN-γ基因拼接,构建pMD18-T-MAG1-IFN-γ克隆质粒和pGEX-4T-MAG1-IFN-γ重组表达质粒,将鉴定正确的pGEX-4T-MAG1-IFN-γ重组表达质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western-blotting分析表达产物。结果表明,SOE-PCR扩增获得双基因融合片段大小为1 491bp,与GenBank中发表的MAG1(EF580924.1)和IFN-γ(M29867.1)核苷酸序列的同源性为99%;MAG1-IFN-γ融合基因表达蛋白大小为82 000,具有较好的反应原性。; 焦石贾立军张立霞钱年超刘明明黄国明张守发; 关键词：犬新孢子虫 IFN-Γ

延边黄牛新孢子虫NcSAG1基因工程疫苗的免疫试验: 为了解新孢子虫NcSAG1表面蛋白基因工程疫苗对实验动物的免疫效果,本试验提取延边黄牛新孢子虫野毒株基因组DNA,用PCR技术扩增新孢子虫NcSAG1表面蛋白基因,并在大肠杆菌中进行原核表达,将Western-blott...; 贾立军栾杨焦石曹世诺张守发; 文献传递