熊鹰飞
- 作品数：14 被引量：26H指数：4
- 供职机构：第四军医大学基础医学部神经科学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 高渗刺激引起培养的大鼠下丘脑星形胶质细胞和C6细胞合成并释放谷氨酸(英文)被引量：1
- 2008年
- 目的观察高渗刺激对培养的大鼠下丘脑星形胶质细胞或C6细胞合成、释放谷氨酸的影响。方法获取一日龄SD大鼠下丘脑组织,进行星形胶质细胞培养、纯化和鉴定。培养细胞随机分五组:(1)等渗组:用新鲜等渗培养液置换原先的培养液,将细胞分成5个亚组,分别孵育1、3、5、10和15min。(2)高渗组:用320 mOsm NaCl高渗溶液置换原先的培养液,将细胞分成5个亚组,分别孵育1、3、5、10和15min。甘伯酸(carbenox olone,(3)CBX,一种缝隙连接阻断剂)+等渗组和(4)CBX+高渗组:用含有CBX(终浓度为100mmol/L)的等渗培养液作用1h,后分别用等渗或高渗培养液置换出原培养液,将细胞分成5个亚组,分别孵育1、3、5、10和15min。(5)Ca2++高渗组:用含有Ca2+(1000μmol/L)的等渗培养液作用1h,后用高渗培养液置换出原培养液,将细胞分成5个亚组,分别孵育1、3、5、10和15min。每个亚组5个培养皿。收集各组的细胞,进行抗谷氨酸和抗胶质原纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)的双重免疫荧光染色,Confocal显微镜观察。用反相高效液相色谱荧光测定法测定细胞培养液中谷氨酸的含量。培养的C6细胞分为四组:等渗组,高渗组,CBX+等渗组和CBX+高渗组,用于流式细胞仪(flow cytometry,FCM)定量检测细胞内谷氨酸的含量。结果星形胶质细胞内抗GFAP染色的荧光强度在五组间无明显差异。星形胶质细胞内抗谷氨酸染色的荧光强度在等渗组中各时间点无明显变化,高渗组中在刺激1min后表达增加,5min达到高峰,15min恢复到正常。CBX+高渗组的抗谷氨酸染色荧光强度明显高于CBX+等渗组和等渗组,一直维持到15min不下降。培养基中的谷氨酸浓度在等渗组各时间点无明显变化,高渗组中谷氨酸浓度从5min到15min明显增加。Ca2++高渗组和CBX+高渗组中,培养基中谷氨酸浓度明显低于高渗组,各时间点之间没有明显变化。FCM测定的结果表明高渗或
- 曹荣江山段丽熊鹰飞高蓓饶志仁
- 关键词：星形胶质细胞谷氨酸免疫荧光染色
- 人参皂甙-Rd对SNI大鼠痛觉异常及脊髓背角内谷氨酸和NR2A/B表达的影响被引量：8
- 2011年
- 目的:探讨人参皂甙-Rd(G-Rd)对大鼠神经病理性痛的镇痛效果及其机制。方法:成年雄性SD大鼠(30只)随机分成五组:空白对照组(blank control)、坐骨神经分支选择损伤组(spared nerve injury,SNI)、假手术组(sham operation)、SNI+saline(腹腔注射,i.p.)组、SNI+G-Rd(i.p.)组。行为学用von Frey法测定上述各组手术侧后肢机械缩足反射阈值(PWMT),以评定大鼠SNI术后痛敏变化以及人参皂甙-Rd的镇痛效果;用免疫荧光法检测对比上述各组大鼠脊髓L4-6节段背角内谷氨酸样和N-甲基-D-天冬氨酸受体2A/B亚单位(NR2A/B)样免疫阳性物的平均荧光强度(MFI)。结果:SNI术后10 d,手术侧PWMT值明显低于空白对照组和假手术组,术后20 d达到最低值,SNI+G-Rd组PWMT值明显高于SNI+Saline组(P<0.05)。免疫荧光染色显示SNI术后20 d,脊髓L4-6节段手术侧背角内谷氨酸样和NR2A/B样免疫阳性产物的MFI明显高于空白对照组和假手术组(P<0.05);SNI+G-Rd组脊髓L4-6节段手术侧背角内的谷氨酸样免疫阳性产物的MFI明显低于SNI和SNI+S组(P<0.05),而NR2A/B的MFI未见显著变化(P>0.05)。结论:人参皂甙-Rd可显著改善SNI引起的大鼠痛过敏行为,其可能的脊髓机制之一是与其有效地减少相应脊髓节段背角内谷氨酸的含量有关。
- 屠令锋曹荣段丽熊鹰飞饶志仁
- 关键词：神经病理性痛谷氨酸
- 低渗刺激下大鼠视上核星形胶质细胞对神经元反应的调控机制
- 2008年
- 目的观察低渗刺激后大鼠视上核(SON)星形胶质细胞对神经元反应的调节机制,以及牛磺酸拮抗剂(TAG)和缝隙连接阻断剂-甘珀酸(CBX)对反应的影响。方法成年SD大鼠20只,对照组经尾静脉注射0.9%盐水;低渗组经尾静脉注射低渗盐水(0.83%葡萄糖+0.3%NaCl);TAG+低渗组和CBX+低渗组分别经侧脑室注射TAG或CBX,2h后经尾静脉注射低渗盐水。常规固定取材制片。切片进行抗Fos、抗加压素(VP)、抗甘氨酸受体(GlyR)、抗胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、抗缝隙连接蛋白43(Cx43)免疫荧光染色,镜下观察在视上核神经元和星形胶质细胞的表达。结果低渗组视上核星形胶质细胞的GFAP和Cx43表达高于对照组,GlyR阳性神经元较对照组多,Fos和VP阳性神经元较对照组少;TAG+低渗组和CBX+低渗组,星形胶质细胞的反应同低渗组,而GlyR阳性神经元较低渗组少,VP-、Fos-阳性神经元较低渗组均有所增加。结论低渗刺激激活视上核星形胶质细胞,被激活的星形胶质细胞可能经缝隙连接释放牛磺酸而抑制神经元,减少VP的释放,此过程可被TAG和CBX所阻断。
- 高蓓段丽江山熊鹰飞曹荣王新红徐燕饶志仁
- 关键词：星形胶质细胞神经元视上核免疫荧光
- 50、高(低)渗刺激下大鼠视上核内星形胶质细胞对神经元活动的调节机制
- 目的： 观察高(低)渗刺激大鼠后，视上核(SON)内星形胶质细胞调节神经元活动的信息通路。实验分2部分：一、高渗刺激部分方法：大鼠分为4组：(1)等渗对照组，经尾静脉注入生理盐水；(2)高渗刺激组，经尾静脉注入高渗盐...
- 饶志仁段丽江山熊鹰飞曹荣杨乐孙晓龙
- 文献传递网络资源链接
- Spared Nerve Injury后大鼠脊髓后角P2X4受体的反应性—行为学及光、电镜的观察
- 本实验用成年雄性Sprague-Dawley大鼠,在pentobarbital麻醉下切开背部皮肤,暴露T3-T4胸椎切除椎板,将细的聚乙烯管插入蛛网膜下腔,选术后7天双下肢活动正常大鼠,再次麻醉,按Decosterd等的...
- 熊鹰飞王新红段丽江山曹荣高蓓饶志仁
- 关键词：P2X4受体星形胶质细胞小胶质细胞
- 文献传递
- 高(低)渗刺激下大鼠视上核内星形胶质细胞对神经元活动的调节机制
- ＜正＞目的:观察高（低）渗刺激大鼠后,视上核（SON）内星形胶质细胞调节神经元活动的信息通路。实验分2部分:一、高渗刺激部分方法:大鼠分为4组:（1）等渗对照组,经尾静脉注入生理盐水;（2）高渗刺激组,经尾静脉注入高渗盐...
- 饶志仁段丽江山熊鹰飞曹荣杨乐孙晓龙
- 文献传递
- 不同刺激引起视上核星形胶质细胞释放不同的递质
- ＜正＞本研究观察了大鼠视上核（SON）内星形胶质细胞（AS）和原代培养的下丘脑AS对不同刺激的反应和递质的释放。实验分为在体和培养细胞2部分。第1部分在体实验,SD大鼠被分为（1）模型组:在麻醉下分别向股静脉注射0.15...
- 饶志仁江山曹荣段丽高蓓熊鹰飞王新红
- 文献传递
- Spared Nerve Injury后大鼠脊髓后角P2X4受体的反应性一行为学及光、电镜的观察
- 本实验用成年雄性Sprague-Dawley大鼠,在pentobarbital麻醉下切开背部皮肤,暴露T3-T4胸椎切除椎板,将细的聚乙烯管插入蛛网膜下腔,选术后7天双下肢活动正常大鼠,再次麻醉,按Decosterd等的...
- 熊鹰飞王新红段丽江山曹荣高蓓饶志仁
- 关键词：P2X4受体星形胶质细胞小胶质细胞
- 高(低)渗刺激下大鼠视上核内星形胶质细胞对神经元活动的调节机制
- 饶志仁段丽江山熊鹰飞曹荣杨乐孙晓龙
- 人参皂甙-Rd对SNI大鼠痛敏异常及脊髓背角内P物质和NK-1受体表达的影响被引量：15
- 2011年
- 目的:观察人参皂甙-Rd(Ginsenoside-Rd,G-Rd)对坐骨神经分支选择损伤(spared nerve injury,SNI)大鼠痛敏异常及脊髓背角内P物质(substance P,SP)和NK-1受体表达的影响,进而探讨G-Rd镇痛的脊髓机制。方法:成年雄性SD大鼠(30只)随机分成五组:空白对照组(blank control)、假手术组(sham operation)、坐骨神经分支选择损伤组(spared nerve injury,SNI)、SNI+saline(腹腔注射,i.p.)组、SNI+G-Rd(i.p.)组。行为学采用von Frey法测定上述各组手术侧机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical thresholds,PWMT);用免疫荧光组织化学染色法检测对比上述各组大鼠脊髓L4-6节段背角内SP免疫荧光产物的荧光强度和NK-1阳性细胞的数量。结果:SNI术后10 d,大鼠手术侧PWMT值明显低于正常对照组和假手术组,术后20 d到达最低值;而在SNI+G-Rd组PWMT值则明显高于SNI组和SNI+sline组(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示:术后20 d时,SNI组和SNI+saline组的脊髓手术侧L4-6背角内SP样免疫荧光的强度和NK-1样阳性细胞的数量明显有所增高,与对照组和假手术组相比较具有显著性意义(P<0.05);但SNI+G-Rd组与SNI组和SNI+saline组相比,其SP样免疫荧光的强度和NK-1样阳性细胞的数量则明显有所下降(P<0.05)。结论:人参皂甙-Rd抑制神经病理性疼痛的机制之一可能与有效减少脊髓背角内SP和NK-1受体的表达有关。
- 曹荣屠令锋段丽熊鹰飞李金莲饶志仁
- 关键词：神经病理性痛P物质脊髓
