王剑
- 作品数：4 被引量：61H指数：3
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划上海市重大科技攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学化学工程医药卫生更多>>
- 200亿芽孢/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂的研制被引量：37
- 2010年
- 以枯草芽孢杆菌B99-2为研究对象,通过对填料、润湿剂、分散剂、稳定剂、UV保护剂的筛选,确定了枯草芽孢杆菌可湿性粉剂的最佳配方。最佳配方为填料硅藻土10%,分散剂PVA7.2%,润湿剂D4254.8%,稳定剂CMC-Na2.0%,保护剂FWA0.1%。测定结果表明:枯草芽孢杆菌可湿性粉剂芽孢含量达2.0×1010cfu/g,悬浮率79%,润湿时间48s,热贮分解率23.6%,产品各项指标均达到国家标准。
- 王剑王楠高观朋尹丹韩王伟
- 关键词：枯草芽孢杆菌可湿性粉剂稳定性
- 三重PCR检测草莓灰霉病菌、炭疽病菌和黄萎病菌被引量：18
- 2010年
- 【目的】探索和优化检测条件,建立同时检测草莓灰霉病菌Botrytiscinerea,炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides和黄萎病菌Verticillium dahliae的三重PCR检测体系,为3种病害的早期快速诊断和鉴定提供技术和方法。【方法】选择可以组合的3种病原菌特异引物,研究多重PCR的影响因素,优化PCR退火温度,采用正交试验方法,以3个引物组、TaqDNA聚合酶、dNTP和Mg2+六因素三水平优化多重PCR体系。【结果】建立并验证适合上述草莓主要病原菌的三重PCR最佳检测体系,可分别扩增出729、539和450bp的特异条带,最适退火温度为50℃,25μL的反应体系中含有0.32μmol·L-1C729+/-、0.032μmol·L-1DB19/DB22、0.32μmol·L-1CgInt/ITS4、1.5UTaq聚合酶、0.15mmol·L-1dNTP、1.6mmol·L-1MgCl2。【结论】利用上述引物组合和反应体系进行三重PCR检测,能够快速从田间发病植株和土壤中将草莓灰霉病菌、草莓炭疽病菌和草莓黄萎病菌检测出来,灵敏度可以达到10pg菌丝DNA。
- 王楠王剑尹丹韩高观朋王伟
- 关键词：草莓灰霉病菌炭疽病菌黄萎病菌分子检测三重PCR
- 培养基组分对hCG核酸疫苗质粒拷贝数的影响被引量：1
- 2009年
- 研究了培养基组分对hCG核酸疫苗质粒拷贝数的影响。结果表明,复合培养基比合成培养基更利于hCG核酸疫苗质粒DNA的生产。通过均匀设计实验确定,当培养基中含有胰蛋白胨10g·L-1、酵母浸出粉8g·L-1、NaCl10g·L-1、甘油10g·L-1、KH2PO40.37g·L-1、K2HPO42.01g·L-1时,单位菌体质粒含量可达6.68mg·g-1;在此基础上添加乙酸2.0g·L-1、谷氨酰胺1.2g·L-1、甘氨酸1.0g·L-1、天门冬氨酸0.4g·L-1,可使质粒拷贝数进一步扩增,单位菌体质粒含量可达9.32mg·g-1,为LB培养基的5.12倍。
- 王剑夏杰陆兵徐殿胜
- 关键词：DNA疫苗质粒拷贝数培养基
- 黄瓜黑星病拮抗菌抑菌谱及产芽孢培养工艺研究被引量：5
- 2011年
- 以黄瓜根际土壤中分离到的1株对黄瓜黑星病有极强防效的生防菌株B99-2为研究对象,对其抑菌谱进行测定,并对其产芽孢的培养工艺进行了研究。首先利用平板对峙法测定了该菌株对常见的30种植物病原真菌的抑菌能力,随后对该菌产芽孢的营养条件进行了初步探索,获得了摇瓶条件下产芽孢的最佳培养基为:玉米粉24.24 g/L、KNO36.99 g/L、大豆粉26.09 g/L、MgSO45.00 g/L、MnSO418 mg/L、KH2PO40.3 g/L、K2HPO42.0 g/L、CaCO34.2 g/L;最后在150 L发酵罐上进行了放大试验,芽孢形成率达96%,芽孢量1.08×1010CFU/mL,为生防菌株B99-2的工业化生产提供技术和方法。
- 王剑王楠高观朋尹丹韩王伟
- 关键词：生防菌株抑菌特性
