王建荣
- 作品数：20 被引量：127H指数：7
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- DNA序列测定质粒模板法的改良被引量：1
- 1994年
- 研究了以质粒为模板Ｓａｎｇｅｒ双脱氧链终止法测定ＤＮＡ序列的操作条件。用本实验改良的制备质粒模板方法和测序反应程序，使以３２Ｐ为ＤＮＡ合成标记、双链质粒为模板的测序结果基本达到以３５Ｓ以３３Ｐ为标记、Ｍ１３单链ＤＮＡ为模板的测序效果，实验操作简便、成本低。
- 王建荣张曼夫杨颐龚晓磊张平沈建英顾朝旭赵洪兴
- 关键词：质粒DNA
- 初情期前枫泾小母猪超数排卵及其胚胎发育研究(英文)被引量：4
- 2000年
- 24头初情期前的枫泾小母猪以 PMSG、HCG进行超排处理 ,平均获得 2 3.4枚卵子 ,人工授精后 2 8～ 5 0 h超排的卵母细胞的受精率为 98.1% ( 472 /4 81) ,受精卵发育至桑椹胚和囊胚的比例为 89.7% ( 5 2 /5 8)。采用外科手术将 180枚受精卵移植至 8头同期发情的枫泾母猪子宫 ,其中有 5头妊娠 ,产仔 44头 ,胚胎移植妊娠率为 62 .5 %。
- 张德福王凯王英陈茵张平鲍世民王建荣
- 关键词：初情期前小母猪超数排卵胚胎移植胚胎发育
- 猪垂体Poly（A）~＋RNA的制备及其体外翻译
- 1994年
- 本文用ＬｉＣｌ沉淀法提取了猪垂体总ＲＮＡ，经。ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ柱亲和层析，分离纯化了猪垂体Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ．用自制的兔网织红细胞体外翻译体系鉴定，表明该Ｐｏｌｙ／（Ａ）＋ＲＮＡ具有较高的翻译活性．ＳＤＳ－ＰＡＯＥ，放射自显影分析翻译产物提示，在制各的猪垂体Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ中，编码猪生长激素前体的ｍＲＮＡ占有较高的比例．
- 王建荣杨颐张平龚晓磊顾朝旭赵洪兴张德福顾雪耿
- 真菌高分子量核DNA的提纯被引量：11
- 1992年
- 目前,提取真菌核DNA的方法常用的有两种。一种是先制备原生质体,再从中提取核DNA;另一种是先用密度梯度超离心法提取粗核,再从粗核中提DNA。用这些方法虽能获得高分子量的核DNA,但操作均太繁琐,且对所用试剂和仪器要求较高。schwartz等建立了一种采用脉冲电泳技术分离巨大DNA分子的方法。
- 王建荣张曼夫
- 关键词：真菌DNA提纯
- 绿色木霉纤维素酶CBHⅡ基因的结构研究被引量：50
- 1995年
- 实验经限制性酶切和双向Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交将重组质粒ｐＣＢＨＩＩ－１４的１４ｋｂ外源片段上的绿色木霉纤维素酶ＣＢＨＩＩ基因定位于４．４ｋｂ的ＥｃｏＲＩ片段上，将该片段克隆于质粒ｐＵＣ１９，获得重组质粒ｐＣＢＨＩＩ。通过限制性分析构建了ｐＣＢＨＩＩ上４．４ｋｂＥｃｏＲＩ片段的物理图谱。在此基础上用质粒制作该片段的亚克隆，采用Ｓａｎｇｅｒ双脱氧链终止法测定了含绿色木霉纤维素酶ＣＢＨＩＩ基因的４０７４ｂｐ的ＤＮＡ序列，由ＧＴ－ＡＧ规则和ｃＤＮＡ序列推知该结构基因由４个外显子和３个内含子组成，总长１６１３ｂｐ，５′端存在与一般真核基因类似的两个特征性调控序列，但３′端不存在真核基因通常具有的特征序列而存在功能未明的短重复序列和嘧啶富集区。并对纤维素酶基因间的同源性和可能的功能作了初步的探讨。
- 王建荣张曼夫黄涛
- 关键词：纤维素酶木霉基因
- 奶山羊β-乳球蛋白cDNA的克隆
- 1997年
- 从奶山羊乳腺中快速抽提总ＲＮＡ，根据已发表的绵羊β乳球蛋白（ｏＢＬＧ）基因的序列，设计并合成与ｏＢＬＧ基因第一个外显子和最后一个外显子的部分序列相对应并能与特定载体末端互补的一对引物，经反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法扩增获得了特异性片段。将扩增片段与线性化质粒ｐＤＩＲＥＣＴ退火，获得重组质粒ｐＤＢＬＧ。ＰＣＲ鉴定、限制性分析和分子杂交均表明已克隆到奶山羊ＢＬＧ的ｃＤＮＡ。
- 王建荣张平李伯良杨新颖
- 关键词：奶山羊Β-乳球蛋白CDNA克隆
- 枫泾猪发情周期子宫性腺激素受体含量的变化被引量：1
- 2000年
- 以长白猪为对照 ,测定了枫泾猪发情周期血浆中雌二醇和孕酮及其子宫受体含量。发情期血浆雌二醇的峰值 ,枫泾猪为 ( 57.0 4± 3 .60 ) ng/ L,长白猪为 ( 55.85± 3 .0 4 ) ng/ L,两者无显著差异 ( P >0 .0 5)。孕酮最高水平和间情期平均水平 ,均为枫泾猪高 ( P <0 .0 1 )。孕酮最高水平 ,枫泾猪为 ( 2 4 .1 1± 1 .2 4 ) μg/ L,长白猪为 ( 1 6.67± 0 .2 1 ) μg/ L;孕酮间情期平均水平 ,枫泾猪为 ( 1 8.1 1± 1 .2 4 ) μg/ L,长白猪为 ( 1 1 .0 7± 0 .61 )μg/ L。枫泾猪发情期和间情期的细胞质雌二醇受体 ( CER)分别为每毫克 DNA( 3 87± 2 1 .2 )、( 3 52± 1 8.2 )fmol,其离解常数 ( kd)值分别为 ( 4.8± 0 .4 )、( 3 .8± 1 .0 ) nmol;细胞核雌二醇受体 ( NER)分别为每毫克DNA( 1 2 69.58± 1 56.4 2 )、( 578± 2 1 .4 ) fmol,其 kd值分别为 ( 5.8± 1 .4 )、( 3 .4 8± 1 .0 ) nmol;细胞质孕酮受体 ( CPR)分别为每毫克 DNA( 3 4 3 .0± 51 .4 )、( 1 48± 4 1 .0 ) fmol;细胞核孕酮受体 ( NPR)分别为 ( 3 2 4± 6.9)、( 1 1 5± 2 .4 ) fmol。发情期和间情期子宫 NER含量较长白猪高 ( P <0 .0 5) 。
- 张德福王凯王英陈茵张平王建荣
- 关键词：枫泾猪发情周期子宫受体繁殖生理
- 猪垂体总cDNA的合成和编码猪生长激素成熟肽DNA序列的PCR扩增被引量：1
- 1994年
- 以猪垂体ｍＲＮＡ为模板，Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）（１２～１８）为反转录引物，在ＡＭＶ－ＲＴ的催化下，先合成ｃＤＮＡ第一链，再以ＲＮａｓｅＨ降解的ｍＲＮＡ小分子为引物、ｓｓ－ｃＤＮＡ为模板，在Ｅ．ｃｏｌｔＤＮＡＰｏｌ．Ｉ的催化下合成ｃＤＮＡ第二链，并用Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡｌｉｇａｓｅ连接缺口和Ｔ４ＤＮＡＰｏｌ补齐末端，以获得长度完整的ｄｓ－ＣＤＮＡ分子。根据已知的ｐＧＨ基因序列，设计并合成了一对特异引物分子，以总ｃＤＮＡ为模板，进行ＰＣＲ扩增，分子杂交证明，获得的扩增片段即为侧翼带有重组位点和附加密码的编码ｐＧＨ成熟肽的ＤＮＡ序列。
- 王建荣杨颐龚晓磊张平顾朝旭赵洪兴
- 关键词：反转录生长激素基因
- 国外牛生长激素使用情况评述及我国的对策被引量：11
- 1997年
- 国外牛生长激素使用情况评述及我国的对策王建荣（上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海２０１１０６）李伯良（中国科学院上海生物化学研究所上海２０００３１）１．国内外基因工程牛生长激素（ｒｂＳＴ）的研究开发概况（１）国外ｒｂＳＴ研究开发情况：牛生长激素自然状...
- 王建荣李伯良
- 关键词：生长激素
- 绿色木霉纤维素酶CBHII基因的分子克隆被引量：28
- 1994年
- 本文以噬菌体lambda EMBL3 DNA为载体,通过克隆绿色木酶(Trichoderma viride)高分子量基因组DNA的部分酶解片段,并将重组分子进行体外包装后侵染Escherichia.coli K802,由此构建了绿色木霉基因文库。以李氏木霉(Trichoderma reesei)纤维素酶CBHII基因的末端片段为探针,用轮迥噬菌斑原位杂交从文库中筛选出CBHII基因的阳性克隆5个,随机取其中3个克隆用上述探针作斑点杂交,结果进一步证明克隆了全长或近全长的绿色木霉CBHII基因,用李氏木霉CBHI基因的末端片段探针作斑点杂交,结果提示CBHI与CBHII基因的末端序列之间无同源性存在。从斑点杂交的阳性克隆中提取DNA,酶切鉴定插入片段的长度,并克隆于质粒pUC19,Southern杂交结果证明获得了含绿色木霉CBHII基因的重组质粒pCBHII-14。
- 王建荣张曼夫
- 关键词：木霉纤维二糖水解酶纤维素酶
