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王正华
作品数:
1
被引量:6
H指数:1
供职机构:
中国药科大学
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发文基金:
江苏省应用基础研究计划
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相关领域:
生物学
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合作作者
刘景晶
中国药科大学
胡卓逸
中国药科大学
明欣
中国药科大学
李志强
中国药科大学
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李志强
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刘景晶
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中国药科大学...
年份
1篇
2001
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假单胞菌海因酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
被引量:6
2001年
目的 :构建海因酶基因工程菌 ,以便实现对羟基苯甘氨酸的工业化生产。方法 :利用PCR技术从恶臭假单胞菌 (Pseudomonasputida) 980 1中扩增得到海因酶基因 ,将该基因插入pMD18 T质粒 ,转化大肠杆菌 (Es cherichiacoli) ,通过地高辛标记原位杂交和海因酶活力测定两种方法 ,筛选出具有海因酶活力的阳性转化子。结果 :工程菌E .coliBL2 1/pMD dht的海因酶活力达到 170 0U/L ,比野生菌恶臭假单胞 980 1菌的酶活力提高 8倍。SDS PAGE显示海因酶的单体分子量约为 5 3KDa ,海因酶的表达量约占菌体总可溶性蛋白的 2 0 %。结论
李志强
刘景晶
胡卓逸
王正华
明欣
关键词:
海因酶
恶臭假单胞菌
基因克隆
基因表达
大肠杆菌
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