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冷休克诱导大鳞副泥鳅雄核发育单倍体的研究: 为探索诱导鱼类雄核发育单倍体的新方法及形成机制,以大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)为研究对象,无须卵子失活,仅用冷休克诱导雄核发育单倍体,并对其后代的早期胚胎发育、染色体数目、分裂胚细胞学观察...; 王玉生李雅娟于长宁姜志强李霞王伟刘博高养春李佳奇; 关键词：大鳞副泥鳅雄核发育单倍体; 文献传递

泥鳅杂交三倍体和二倍体胚胎发育的比较研究被引量：3: 2014年; 对杂交三倍体泥鳅Misgurnus anguillicaudatus(2n♀×4n♂,DT)和二倍体泥鳅(2n♀×2n♂,DD)的胚胎发育进行观察,详细记录了其胚胎发育的形态特征和发育特点。结果表明:DT受精卵在水温(25±1)℃的条件下,整个胚胎发育过程约需36 h 19 min;对照组DD受精卵在水温(25±1)℃的条件下,整个胚胎发育过程约需35 h 57 min;DT(DD)的胚胎发育包括卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、器官形成期和孵化出膜期6个时期,DT(DD)受精卵约40 min(40 min)后进入卵裂期,3 h 45 min(3 h 40min)后进入囊胚期,6 h 30 min(6 h 24 min)后进入原肠期,9 h 32 min(9 h 20 min)后进入神经胚期,15 h 45 min(15 h 30 min)后进入器官形成期,36 h 19 min(35 h 57 min)后出膜。研究表明,DT的胚胎发育时序及形态特征与DD基本相似,说明DT具有正常的胚胎发育过程,本研究可为杂交三倍体泥鳅苗种培育提供生物学依据。; 高养春李雅娟姜志强李霞王伟刘博王玉生庞义猛; 关键词：泥鳅二倍体胚胎发育

不同倍性泥鳅鳍细胞培养及染色体标本制备方法的研究: 本研究以天然二倍体、杂交三倍体(4n♀×2n♂)以及天然四倍体泥鳅(Misgurnusanguillicaudatus)的鳍组织为材料,对短期培养的消毒方法、秋水仙素的浓度和处理时间以及低渗处理时间等细胞培养技术及染色体...; 刘博李雅娟李霞隋燚高养春王玉生马辰; 关键词：泥鳅二倍体细胞培养染色体; 文献传递

冷休克诱导大鳞副泥鳅雄核发育单倍体被引量：7: 2014年; 为探索诱导鱼类雄核发育单倍体的新方法及形成机制，以大鳞副泥鳅为研究对象，无须卵子失活，仅用冷休克诱导雄核发育单倍体，并对其后代的早期胚胎发育、染色体数目、分裂胚细胞学观察等进行了系统分析。早期胚胎发育结果显示，0℃与3℃处理组的孵化率分别为0．83％和57．42％，二者之间孵化率差异显著（P〈0．05），0℃和3℃处理组均表现出单倍体综合征。染色体倍性鉴定结果显示，0℃处理组染色体分布为18～27，单倍体率为81．40％，3℃处理组染色体分布为20-30，单倍体率为68．97％。分裂胚细胞学观察结果显示，3℃处理组受精后60min，卵核和第二极体位于胚表面，有一同释放迹象。结果表明，对大鳞副泥鳅受精卵进行3℃冷休克处理60min，可以成功诱导雄核发育单倍体，研究推测冷休克诱导大鳞副泥鳅雄核发育的细胞学机制是雌核和第二极体一同释放。; 王玉生李雅娟于长宁姜志强李霞王伟刘博高养春李佳奇; 关键词：大鳞副泥鳅雄核发育单倍体

3种鱼类的单个胚胎染色体标本制备方法被引量：1: 2013年; [目的]为建立1种准确、快捷、高效的鱼类染色体制备方法。[方法]以泥鳅、红鳍东方鲀和德国镜鲤的单个胚胎作为材料,通过秋水仙素、低渗、卡诺固定等操作制备染色体标本。[结果]3种鱼类均获得大量形态清晰、长度适中、分散良好的中期分裂相。[结论]以鱼类肌肉效应期为材料可成功制备染色体标本,为鱼类染色体标本制备提供了新方法。; 王玉生李雅娟李佳奇徐雯高养春刘博; 关键词：泥鳅红鳍东方鲀德国镜鲤染色体

天然四倍体泥鳅雄核发育二倍体诱导条件优化被引量：6: 2015年; 为探索安全、易操作的鱼类雄核发育新途径。以天然四倍体泥鳅为父本,二倍体泥鳅为母本人工催产授精,冷休克诱导雄核发育二倍体。试验选用L9(34)设计,进行三因素三水平正交试验,受精后时间为A,设0、5和10 min;处理温度为B,设0、3和6℃;处理时间C,设45、60和75 min。染色体倍性鉴定采用单个胚胎染色体计数法。结果表明,最高雄核发育二倍体诱导率为63.33%;根据正交试验直观分析结果,得出诱导天然四倍体泥鳅雄核发育二倍体各因素最优水平组合:受精后5 min,处理温度3℃,处理时间60 min;影响雄核发育三因素主次顺序为:受精后时间→处理温度→处理时间。; 林忠乔李雅娟张赛赛姜志强王伟王玉生; 关键词：冷休克正交试验

杂交三倍体泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)染色体CMA_3/DA/DAPI及FISH分析: 为阐明杂交三倍体泥鳅染色体的核仁组织区(NORs)数目,本研究对二倍体泥鳅与自然四倍体泥鳅正、反交(正交2n×4n,反交4n×2n)获得的杂交三倍体后代的早期胚胎染色体进行CMA3/DA/DAPI及FISH等系列研究。结...; 高养春刘博王玉生隋燚李佳奇徐雯李雅娟; 文献传递

不同倍性泥鳅鳍细胞培养及染色体标本制备方法的研究被引量：5: 2013年; 以天然二倍体、杂交三倍体(4n♀×2n♂)和天然四倍体泥鳅Misgurnus anguillicaudatus的鳍组织为材料,对短期培养的消毒方法、秋水仙素的浓度(1.0、1.5、2.0μg/mL)与处理时间(2、3、4 h)和低渗处理时间(30、40、50 min)等细胞培养技术,及染色体标本制备方法进行了研究。结果表明:选择100 g/L的碘伏溶液杀菌效果良好,对于细胞生长影响较小,尤以处理15 min时的效果最明显,细胞迁出迅速;在终止培养前3 h加入秋水仙素至终浓度为1.5μg/mL,天然二倍体、杂交三倍体和天然四倍体泥鳅鳍细胞中期分裂相染色体众数最高,分别为93.33%、90.00%、70.00%;25℃下低渗处理40 min时,可以获得大量图像清晰、长度适中、分散良好、染色体数目完整的染色体中期分裂相。本研究中初步建立了以鳍组织培养法作为材料来源快速制备不同倍性泥鳅染色体标本的方法。; 刘博李雅娟李霞隋燚高养春王玉生马辰; 关键词：泥鳅二倍体染色体

不同倍性泥鳅杂交后代染色体数目组成的研究被引量：16: 2012年; 以泥鳅Misgurnus anguillicaudatus为研究对象,通过染色体计数法,对二倍体泥鳅与天然四倍体泥鳅正交(2n×4n)、反交(4n×2n)杂交后代的早期胚胎、6月龄及12月龄阶段的染色体数目进行了统计分析。结果表明:早期胚胎正、反杂交后代的染色体数目为67～81、67～82,在良好的中期分裂相(100、100个)中,染色体数目为75的整三倍体众数百分比最高(22%,20%),此外还有大量染色体数目<75的亚三倍体(37%,51%)和染色体数目>75的超三倍体(41%,29%);6月龄正、反杂交后代的染色体数目为68～79、66～80,在良好的中期分裂相(58、63个)中,整三倍体(3n=75)众数百分比最高(26%,41%),此外还有大量亚三倍体(34%,49%)和超三倍体(40%,10%);12月龄正、反杂交后代的染色体数目为68～82、69～83,在良好的中期分裂相(71、50个)中,三倍体(3n=75)众数百分比最高(28%,54%),此外还有大量亚三倍体(48%,20%)和超三倍体(24%,26%)。研究表明,二倍体泥鳅与天然四倍体泥鳅正、反杂交后代均出现大量能存活的非整三倍体个体,并随养殖时间的延长,非整三倍体率呈下降趋势。; 李雅娟钱聪印杰高敏高养春刘博王玉生; 关键词：泥鳅染色体数目

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王玉生

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