王琦
- 作品数:27 被引量:63H指数:4
- 供职机构:石河子大学更多>>
- 发文基金:新疆生产建设兵团博士基金教育部科学技术研究重点项目国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学交通运输工程机械工程更多>>
- 产毒素大肠杆菌LTB-K99融合基因的构建被引量:3
- 2006年
- 利用PCR技术从原始菌种中扩增得到K99和LTB基因,将K99和LTB基因连接起来,构建了LTB-K99融合基因。融合基因克隆到pBS-T载体上,转化大肠杆菌top10,经Bam HI和Xho I双酶切鉴定重组质粒。测序分析结果表明,该融合基因有正确的阅读框,为以后转入表达载体的构建奠定了基础。
- 许程剑陈创夫武军元王琦张金波刘辉
- 关键词:LTB基因融合基因
- 利用搭桥PCR法实现轮状病毒VP7表位片段的重组
- 2005年
- 选择了RV VP7的3个高度保守可诱发高水平体液免疫反应的中和性抗原表位,人工合成了这3个表位片段。采用了一种不需要限制性内切酶和连接酶的重组DNA方法—搭桥PCR法,方便快速地构建了轮状病毒VP7蛋白的重组表位基因,将其T/A克隆入PBS-T载体,经过测序与报道序列同源性达100%。结果表明:搭桥法PCR简单易行,快速准确,尤其是在构建2个或多个小基因片段的融合时,比酶切、连接方法更具优越性。
- 王琦陈创夫武冬梅许程剑史芳芳张金波祝建波
- 一种叠层行星齿轮式液压机械无级变速器
- 针对液压机械无级变速器双排行星轮系存在的结构问题,本发明创造运用叠层行星齿轮实现汇流,其特征是:动力经动力输入轴(19)分别由啮合齿轮副A(1)和啮合齿轮副B(2)、啮合齿轮副D(3)传给液压路和机械路。行星轮E1(8)...
- 倪向东王琦彭晓睿鲍明喜赵新王剑
- 文献传递
- 重组轮状病毒多表位在烟草中的表达
- 本实验用PCR的方法得到RVVP4的抗原表位核苷酸序列,并人工合成了RVVP7的三个抗原表位核苷酸序列、通用辅助性T淋巴细胞表位(PADRE)核苷酸序列和编码破伤风毒素上T细胞激活位点的核苷酸序列,各表位间以非极性的甘氨...
- 王琦
- 关键词:原核表达植物表达载体转化烟草核苷酸序列农杆菌介导法
- 文献传递
- 一种液压机械无级变速器速比控制系统
- 本实用新型涉及到一种液压机械无级变速器速比控制系统,主要包括工作模式选择模块、手动操纵模块、工控上位机模块、变速器控制单元模块。工作模式选择模块用于切换上位机和手动操控两种控制模式;工控上位机模块用于对速比调节状态或操纵...
- 魏晓朝倪向东赵新李申韩双蔓钟春发王琦
- 文献传递
- 一种叠层行星齿轮式液压机械无级变速器
- 针对液压机械无级变速器双排行星轮系的结构问题,本实用新型一种叠层行星齿轮式液压机械无级变速器,运用叠层行星齿轮实现汇流,其特征是:动力经轴(19)分别由啮合齿轮副A(1)和啮合齿轮副B(2)、啮合齿轮副D(3)传给液压路...
- 倪向东王琦彭晓睿鲍明喜赵新王剑
- 文献传递
- 一种单排复合行星齿轮式多区段液压机械无级变速器
- 目前的液压机械无级变速器多采用多排行星齿轮串联的形式,但存在传动结构复杂,本实用新型提供一种结构简单,加工装配便利,多区段、高效的单排复合行星齿轮式多区段液压机械无级变速器。其特征是:三联行星齿轮6由三个齿轮构成,并且共...
- 倪向东彭晓睿王琦鲍明喜王剑赵新
- 文献传递
- 重组轮状病毒多抗原表位的克隆、表达及植物表达载体的构建被引量:1
- 2006年
- 为了研制基于表位的轮状病毒亚单位疫苗,用PCR的方法得到RV(Rotavirus RV)VP4的抗原表位编码序列,并人工合成了RV VP7的3个抗原表位编码序列,通用辅助性T淋巴细胞表位(PADRE)氨基酸序列和破伤风毒素(Tetanus toxin,TT)上的一个T细胞激活位点[1,2],各位点间以非极性的甘氨酸和脯氨酸分隔以保持各表位的相对独立性,使用搭桥法PCR(Over lapextension PCR)、酶切、连接等基因工程的方法将各个表位片段串联拼接在一起,组合成一条轮状病毒(RV)多表位抗原基因,将其转入原核载体质粒pTHioHis B,在大肠杆菌DH5a克隆,并在BL21中表达,表达蛋白经SDS-PAGE分析,相对分子量与预期结果相符;重组蛋白经轮状病毒快速检测试剂盒检测有抗原性。将此多表位抗原基因插入高效植物表达载体pE1802,为研制重组轮状病毒抗原表位亚单位疫苗、转基因植物口服疫苗做了前期准备。
- 王琦祝建波陈创夫
- 关键词:轮状病毒原核表达植物表达载体
- 大肠杆菌肠毒素STI、STII、LTB融合基因植物表*达载体的构建被引量:1
- 2006年
- 产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)LT和ST是导致人和动物腹泻的主要病原菌。利用PCR方法分别从pGEM-5Zf(+)-STI、K88ab(LT+,ST+)质粒中扩增到了STI、STII基因,然后通过三引物PCR实现了STI、STII基因的融合,再与LTB基因融合,并置同一阅读框。LTB基因的5′位于STII基因的3′端,并在ST基因和LTB基因之间插入7个氨基酸的连接肽。将融合基因STI-STII-LTB构建到带有核基质结合区序列(MARs)的植物表达载体pBI121-MARs中,并通过冻融法导入根癌农杆菌EHA105。
- 武冬梅祝建波陈创夫王琦张金波
- 关键词:产肠毒素大肠杆菌ETECSTI融合基因植物表达载体
- 一种单排双极式液压机械无级变速器
- 本发明公开了一种单排双极式液压机械无级变速器。其特征在于,包括动力输入系统、液压泵控马达调速系统、汇流行星排机构、离合器切换机构、液压机械后退区段机构、后桥输出机构。动力输入轴(23)同步共轴设有单排行星齿轮组齿圈(6)...
- 赵新倪向东王琦鲍明喜李申
- 文献传递