秦永华
- 作品数：6 被引量：14H指数：3
- 供职机构：中南大学湘雅医学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划湖南省重点学科建设项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗日本血吸虫病天然分子靶基因pVAX1//SjRPS4·CB双价疫苗与联合免疫的研究
- 本实验室前期的研究已经证实,日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原26-28kDa/(SIEA26-28kDa/)和成虫31-32kDa蛋白/(Sj31-32kDa/)天然分子均可诱导宿主产生较好的抗雌虫、抗卵胚免疫效果。但是由...
- 秦永华
- 关键词：日本血吸虫双价疫苗免疫保护
- 文献传递
- 检测日本血吸虫病胶体碳试纸条的研制与初步应用(英文)被引量：3
- 2009年
- 目的:开发一种快速检测血清中日本血吸虫抗体的免疫诊断方法。方法:用胶体碳标记日本血吸虫成熟虫卵可溶性抗原(SEA),与待测血清中日本血吸虫抗体结合,再用SEA包被在硝酸纤维素膜(NC膜)上以捕捉碳标SEA-血吸虫抗体复合物,达到检测血吸虫抗体的目的。结果:检测137份血清,与间接血凝法(indirect haemagglutination assay,IHA)检测结果一致性为98.54%,如经IHA试剂盒检测呈阳性者即视为阳性血清,则该方法的检测敏感性为98.99%,特异性为97.37%;且检测条带的灰度与血清效价具有曲线关系,因而可以对待测血清作半定量分析。结论:胶体碳试条层析法操作简便,快速,具有较高的敏感性和特异性,适合作血吸虫现场检测。
- 汪世平余路新车宏莉陈秀春秦永华高冬梅刘明社
- 关键词：日本血吸虫病抗体检测可溶性虫卵抗原
- 抗日本血吸虫病阻断传播型疫苗的研究
- 日本血吸虫病是一种人兽共患寄生虫病,终末宿主众多,可在多种家畜和野生动物之间传播流行,加上药物只能在短期内降低血吸虫病发病率,不能阻止再感染的发生,难以提供长期的保护,这给我国湖区血吸虫病的防治带来了诸多困难。
- 汪世平李宏实周松华周火炬何卓刘芬彭先楚余俊龙高冬梅秦永华
- 文献传递
- 日本血吸虫尾蚴66～68kD单特异性血清对尾蚴cDNA文库的免疫学筛选被引量：2
- 2008年
- 目的:获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)尾蚴66～68 kD抗原的编码基因,为日本血吸虫疫苗和诊断研究提供材料。方法:以Sj尾蚴66～68 kD抗原免疫家兔获得的单特异性血清为探针,对Sj尾蚴cDNA文库进行免疫筛选,将所获阳性克隆的插入片断进行PCR扩增、琼脂糖电泳初步鉴定,并挑选出4个强阳性克隆进行测序,通过互联网NCBI/BLAST进行核苷酸序列分析。结果:共获得21个持续阳性克隆,其中10个阳性克隆初步鉴定显示为单一扩增条带,且插入的cDNA片段大小分布于0.5～3.0 kb之间;4个强阳性克隆分别与日本血吸虫SJCHGC05187,SJCHGC05173,SJCHGC06989,SJCHGC01894显著同源。结论:获得了4种日本血吸虫相关的编码基因。
- 秦永华周帅锋汪世平高冬梅余路新李林
- 关键词：日本血吸虫尾蚴CDNA文库免疫筛选
- 抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26～28kDa单链抗体与EGFP的融合表达及靶向性研究被引量：3
- 2008年
- 目的体外观察抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26-28kDa单链抗体与日本血吸虫各阶段的靶向部位，探讨单链抗体在抗血吸虫病疫苗研究中的应用价值。方法扩增增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因．克隆至PET32a／SIEA26～28kDa-scFv质粒，构建PET32a／EGFP-scFv质粒。转化至感受态E．coli BL21（DE3）中。并诱导表达单链抗体融合蛋白。分析单链抗体融合蛋白与SIEA26～28kDa的结合特异性。单链抗体融合蛋白与日本血吸虫成虫、虫卵切片孵育，荧光显微镜下观测GFP信号。确定特异性单链抗体的靶向性。结果重组质粒PET32a／EGFP-scFv构建成功．Trx-EGFP-scFv融合蛋白高效表达．与SIEA26-28kDa特异性结合。GFP信号主要集中在未成熟卵卵胚．雌虫卵巢、卵黄腺及与生殖系统邻近的肠腔组织。结论SIEA26-28kDa单链抗体与血吸虫未成熟卵胚胎及雌虫生殖系统具有较强的靶向性，具有潜在抗卵胚发育、抗雌虫生殖作用，为SIEA26-28kDa单链抗体在抗日本血吸虫病疫苗免疫靶向方面的研究奠定了基础。
- 何卓汪世平周帅锋秦永华高冬梅汪希雅李林余路新徐绍锐
- 关键词：日本血吸虫靶向性
- pVAX1/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4·CB双价疫苗的构建及其免疫效果观察被引量：6
- 2009年
- 目的构建日本血吸虫天然分子疫苗相关靶基因的双价疫苗pVAX1/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4·CB,并观察其免疫保护效果。方法分别以pcDNA3.0/SjRPS4、pcDNA3.0/SjCB为模板,设计引物扩增SjRPS4、SjCB,重叠PCR法将SjRPS4、SjCB拼接,扩增,经双酶切后与真核质粒载体pVAX1、pcDNA3.0连接,转化DH5α细胞,筛选阳性克隆;提取双价重组质粒、空质粒及pVAX1/SjRPS4,经左腿股四头肌注射昆明小鼠,14d后取肌肉组织切片进行间接免疫荧光及酶免疫组织化学染色,证实双价重组质粒的表达;提取pVAX1/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4、pcDNA3.0/SjCB及相应空载体,100μg/只或等量PBS经左腿股四头肌注射昆明小鼠,4周后以(20±1)条尾蚴贴腹感染,6周后检测减虫率、减卵率。结果PCR、EcoRI/XhoI双酶切及测序证实双价疫苗pVAX1/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4·CB构建成功;肌肉组织间接免疫荧光及酶免疫组织化学染色证实重组质粒能够在小鼠肌肉细胞内成功表达;与PBS组相比,pVAX1/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4、pcDNA3.0/SjCB免疫小鼠各组间差异均有统计学意义(P<0.05),各组与相应的空质粒组相比各指标差异亦具有统计学意义(P<0.05);两种不同载体构建的双价疫苗之间比较差异则无统计学意义(P>0.05)。结论成功构建真核双价重组质粒pVAX1/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4·CB,二者免疫昆明小鼠均可以产生比单价疫苗更好的免疫保护效果。
- 罗四维秦永华汪希雅高冬梅何卓周帅锋陈秀春余路新汪世平
- 关键词：日本血吸虫病疫苗
