目的:研究T24膀胱癌细胞中Toll样受体4(Toll like receptor-4,TLR4)信号通路活化对B7-H1表达的影响,并探讨其参与膀胱癌免疫逃逸的可能机制。方法:培养膀胱肿瘤T24细胞系,以脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)模拟TLR4在体内的激活过程,分别用1μg/mL的LPS刺激T24细胞0、2、4、6、8和12h,流式细胞技术检测T24细胞表面TLR4的表达,RT-PCR技术检测T24细胞中B7-H1mRNA的表达,蛋白质印迹法检测T24细胞中B7-H1蛋白的表达。结果:流式细胞学检测结果显示,以1μg/mL的LPS刺激不同时间T24细胞TLR4表达的阳性率,0h为(3.34±0.86)%,2h为(6.71±1.38)%,4h为(9.71±1.24)%,6h为(11.57±0.91)%,8h为(25.24±5.32)%,12h为(21.67±1.81)%,组间差异均有统计学意义,F=83.049,P<0.05。RT-PCR检测结果显示,LPS刺激0h时B7-H1mRNA的相对表达量为0.86±0.06,2h为1.30±0.11,4h为1.67±0.20,6h为1.99±0.10,8h为2.57±0.23,12h为1.51±0.04,组间差异均有统计学意义,F=84.719,P<0.05。蛋白质印迹检测结果显示,LPS刺激0h时B7-H1蛋白质相对表达量为0.66±0.08,2h为0.65±0.10,4h为0.87±0.11,6h为1.07±0.23,8h为1.45±0.19,12h为1.13±0.06,组间差异均有统计学意义,F=195.258,P<0.05。TLR4表达分别与B7-H1mRNA(r1=0.753)及蛋白(r2=0.836)表达显著正相关,P<0.05。结论:通过LPS激活TLR4信号通路可以上调B7-H1mRNA及蛋白的表达,而这有可能是TLR4信号通路参与膀胱癌免疫逃逸的机制之一。
