缪旭
- 作品数：18 被引量：122H指数：8
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- 联用密度梯度离心与免疫磁珠法分离纯化人表皮朗格汉斯细胞被引量：9
- 2005年
- 目的:探讨获取较高纯度和活性的人表皮朗格汉斯细胞(LC)的实验方法。方法:联合采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化人表皮LC,将分选后的细胞用结合有异硫氰酸荧光素(FITC)的鼠抗人CD1a单抗标记,经流式细胞仪检测LC的纯化率,采用0.4%锥虫蓝染色检测细胞的活性。结果:分选所得LC纯化率为84.48%,锥虫蓝染色显示细胞活性>95%。结论:联用密度梯度离心和免疫磁珠法,可获得较高纯度、有活性的LC细胞,且具有操作简单、易于无菌条件下分离纯化的优点。
- 缪旭骆丹吉玺林向飞
- 关键词：朗格汉斯细胞免疫磁珠密度梯度离心细胞分选
- 表没食子儿茶素没食子酸酯减轻UVB诱导的朗格汉斯细胞凋亡作用被引量：9
- 2006年
- 目的研究中波紫外线(UVB)对人表皮朗格汉斯细胞(LC)的光损伤作用以及绿茶活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的光保护作用。方法采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化人表皮LC,将分离纯化的LC随机分为对照组、30 mJ/cm^2 UVB辐射组以及辐射后加用200μg/mL EGCG处理组,4h后以PI染色并经流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果30 mJ/cm^2 UVB辐射组的凋亡率明显高于对照组,EGCG干预组的凋亡率低于单纯UVB辐射组,但仍高于非照射对照组；且辐射后S期细胞数明显增加。几乎没有G)2/M期的细胞,EGCG处理辐射细胞后,S期细胞数减少。结论UVB可诱导人表皮LC凋亡,而EGCG具有一定的保护作用。
- 吉玺骆丹缪旭林向飞
- 关键词：郎格尔汉斯细胞紫外线表没食子儿茶素没食子酸酯细胞凋亡
- 人表皮朗格汉斯细胞的分离纯化及其对咪喹莫特免疫刺激作用的反应被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨获取较高纯度和活性人表皮朗格汉斯细胞(Langerhans cell,LC)的实验方法,并观察分选所获人表皮LC接受免疫调节剂咪喹莫特刺激后细胞因子mRNA表达的变化。方法:联合采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化人表皮LC,将分选后的细胞用结合有FITC的鼠抗人CD1a单抗标记,经流式细胞仪检测LC纯化率,采用0.4%台盼蓝染色检测细胞的活性。将人表皮LC分为实验组和对照组,实验组加5μg/ml咪喹莫特,对照组不加药,处理4小时后提取总RNA,采用RT-PCR法检测各组细胞中细胞因子TNF-α、IL-1β及IL-6mRNA的表达量。结果:流式细胞仪检测分选后LC纯化率为84.48%,台盼蓝染色显示细胞活性>95%。LC经咪喹莫特处理后的实验组TNF-α、IL-1β及IL-6三种细胞因子mRNA表达量均较对照组显著增高(P<0.05)。结论:联合应用密度梯度离心和免疫磁珠法,可获得较高纯度、有活性的LC细胞,且具有操作简单、易于无菌条件下分离纯化的优点。LC能接受咪喹莫特刺激而上调细胞因子mRNA的表达。
- 骆丹缪旭吉玺吴迪徐丽贤朱洁林向飞
- 关键词：密度梯度离心咪喹莫特
- 5%咪喹莫特乳膏对小鼠皮肤3种细胞因子mRNA表达的影响被引量：14
- 2006年
- 目的:研究5%咪喹莫特乳膏对BALB/c小鼠皮肤3种细胞因子的mRNA转录水平的影响。方法:以5%咪喹莫特乳膏刺激BALB/c小鼠皮肤,用逆转录(RT)-PCR法检测皮肤组织中α肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6及IL-1βmRNA的含量。结果:经β2微球蛋白内参校正后,RT-PCR示涂药组2d和7d后TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达均较空白组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:5%咪喹莫特乳膏可上调BALB/c小鼠皮肤细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA的表达水平。
- 吉玺骆丹缪旭林向飞
- 关键词：咪喹莫特Α肿瘤坏死因子白介素-6小鼠
- 中波紫外线照射对表皮朗格汉斯细胞p53蛋白磷酸化表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:研究皮肤朗格汉斯(Langerhans)细胞(LC)在不同剂量中波紫外线(UVB)照射前、后p53蛋白磷酸化水平的差异。方法:联合采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化LC,将LC分为实验组和对照组,实验组分别接受30、60和90mJ/cm2UVB辐射,辐射后4h提取总蛋白,采用Western-blotting法检测各组细胞中p53蛋白及磷酸化p53蛋白的表达量,并比较两者之间的差异。结果:接受UVB辐射后,皮肤LC中p53蛋白表达基本无变化,而p53蛋白磷酸化水平显著升高,差异具有统计学意义,并呈剂量依赖性。结论:UVB辐射可刺激p53蛋白磷酸化,并呈剂量依赖性,进而诱导p53蛋白活化,发挥其下游功能。
- 吉玺骆丹林向飞缪旭吴迪徐丽贤朱洁
- 关键词：朗格汉斯细胞中波紫外线P53蛋白磷酸化
- 解脲脲原体临床分离株中喹诺酮类耐药株的筛选及其耐药基因的研究被引量：38
- 2005年
- 目的:从临床分离的解脲脲原体中筛选出喹诺酮类药物耐药株,了解耐药株发生的比率,并研究耐药株中喹诺酮抗性决定区域(QRDR)出现基因变异的情况。方法:采用药敏试剂盒及96孔微量培养基稀释法收集解脲脲原体的喹诺酮耐药株,PCR扩增阳性标本测序后比较基因变异情况。结果:从104株解脲脲原体临床分离株中筛选出10株耐药株,测序结果显示有7株QRDR的gyrA基因片段中309位均出现了A→G点变异,导致相应编码的氨基酸由组氨酸变为精氨酸。结论:解脲脲原体对喹诺酮类药物的耐药与QRDR中gyrA基因的点变异可能相关。
- 许阳骆丹孙蔚斌缪旭陈希平
- 关键词：基因变异
- UVB诱导皮肤免疫抑制和表没食子儿茶素没食子酸酯光保护作用被引量：7
- 2006年
- 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对不同剂量中波紫外线(UVB)慢性辐射BALB/c小鼠皮肤的保护作用。方法EGCG局部外用于小鼠背部皮肤后予不同强度UVB辐射,每日1次,连续1个月,RT-PCR法检测IFN-γ和IL-10 mRNA的表达水平变化。结果不同剂量UVB慢性辐射后小鼠皮肤中IFN-γmRNA表达水平较对照组降低(P＜0．01),IL-10 mRNA表达水平较对照组升高(P＜0．01),并与UVB辐射强度呈一定剂量依赖关系。EGCG处理后可影响UVB辐射诱导上述细胞因子表达(P＜0．01)。结论UVB辐射下调IFN-γ和上调IL-10转录水平,可能与UVB辐射诱导局部免疫抑制有关。
- 徐丽贤骆丹吉玺林向飞朱洁缪旭
- 关键词：紫外线白细胞介素10表没食子儿茶素没食子酸酯
- 中波紫外线照射对HaCaT细胞p53mRNA和p53蛋白表达的影响被引量：8
- 2005年
- 目的:研究中波紫外线(UVB)照射对永生化角质形成细胞株-HaCaT细胞的p53mRNA和p53蛋白表达的影响。方法:以一定剂量UVB照射HaCaT细胞,分别用RT-PCR法和Western blot方法检测照射后不同时间点的p53mRNA和p53蛋白的表达水平;同时检测不同剂量UVB照射后同一特定时间点p53mRNA和p53蛋白的表达水平。结果:30mJ/cm2的UVB照射后HaCaT细胞的p53mRNA和p53蛋白表达逐渐增加,4h达到峰值,后逐渐恢复至照光后24h接近正常值;不同剂量UVB照射4h后,p53mRNA和p53蛋白表达随剂量增加而增加。结论:HaCaT细胞p53mRNA和p53蛋白表达与UVB照射存在一定的时间和剂量关系。
- 林向飞骆丹闵玮吉玺缪旭朱洁
- 关键词：中波紫外线照射HACAT细胞P53MRNAP53蛋白
- 绿茶提取物对紫外线皮肤光损伤保护作用之纵横观
- 背景许多研究已证实绿茶提取物的活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)具有光保护作用。目的 (1)观察UVB辐射后永生化角质形成细胞株(HaCaT细胞)、成纤维细胞(FB)DNA光产物环丁烷嘧啶二聚体(CPDs)水平...
- 骆丹林向飞缪旭吴迪朱洁吉玺徐丽贤沈春花明亚玲周炳荣徐晶朱健伟
- 文献传递
- 咪喹莫特对朗格汉斯细胞及角质形成细胞细胞因子mRNA表达及分泌水平的影响被引量：4
- 2006年
- 目的观察咪喹莫特(Imiquimod)溶液对人表皮朗格汉斯细胞(LC)及永生化角质形成细胞(KC)株-HaCaT细胞细胞因子mRNA及分泌水平的影响,探讨其免疫调节机制。方法联用密度梯度离心及免疫磁珠法分离纯化人表皮LC,将LC及HaCaT细胞均各分为实验组和对照组,实验组加5μgml咪喹莫特,对照组不加药,处理4h后,提取总RNA,采用RTPCR法分别检测各组细胞中细胞因子TNFα、IL1β及IL6mRNA的表达量,取培养上清,用ELISA方法检测3种细胞因子的含量。结果LC实验组TNFα、IL1β及IL63种细胞因子mRNA表达量及分泌量均较对照组显著增高(P<0.05),而HaCaT细胞组加药后3种细胞因子mRNA表达量及分泌量较对照组未见明显增加(P>0.05)。结论5μgml咪喹莫特溶液能增加LC细胞因子TNFα、IL1β及IL6的mRNA表达量,但其对HaCaT细胞上述3种细胞因子mRNA表达量均未见有明显上调作用。
- 骆丹缪旭吉玺吴迪朱洁林向飞徐丽贤
- 关键词：咪喹莫特细胞因子RTPCR
