许兰珍
- 作品数：70 被引量：323H指数：10
- 供职机构：西南大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家现代农业产业技术体系建设项目重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 分泌型CecropinB抗菌肽基因转化血橙提高其抗溃疡病水平被引量：9
- 2014年
- 为了利用Cecropin B(CB)抗菌肽基因提高柑橘对溃疡病的抗性,人工合成了两个含有信号肽的Cecropin B抗菌肽基因PR1aCB和AATCB。洋葱表皮瞬时表达分析表明,与非分泌型CB抗菌肽相比,PR1aCB和AATCB抗菌肽在细胞间隙中优势积累。进一步构建了CaMV 35S调控PR1aCB和AATCB基因的植物表达载体,转化塔罗科血橙(Citrus sinensis Osbeck)上胚轴,获得转基因植株。GUS组织化学染色、PCR和Southern blot分析表明外源基因已成功整合入柑橘基因组。Real-time PCR定量分析表明,抗菌肽基因在转基因植株中成功表达。柑橘叶片离体抗性分析表明,转PR1aCB和AATCB基因植株的抗性显著强于非转基因植株,其抗性水平与高抗品种‘南丰蜜橘’(C.succosa Hort.Ex Tan)和‘四季橘’(C.madurensis)相当。
- 邹修平彭爱红刘琦琦何永睿王军政许兰珍雷天刚姚利晓陈善春
- 关键词：柑橘抗菌肽柑橘溃疡病
- 柑橘溃疡病相关基因CitEX3的克隆与表达分析被引量：1
- 2016年
- 利用RT-PCR和PCR扩增技术,获得纽荷尔脐橙富亮氨酸重复序列受体样蛋白激酶EXS(EXTRA SPOROGENOUS CELLS)基因CDs全长,命名为Cit EX3.生物信息学分析表明,该基因CDs全长2 667bp,编码888个氨基酸,最大开放阅读框2 667bp,属于富亮氨酸重复序列蛋白激酶家族(LRR-RLKs).Cit EX3基因所编码蛋白EXS3分为胞外域、跨膜域和胞内激酶结构域,胞外域中存在保守的LRR重复序列,胞内激酶结构域中存在一个保守的丝/苏氨酸催化域重复序列.Southern Blot分析表明,在纽荷尔、椪柑、四季桔和金柑中该基因都以单拷贝形式存在.实时荧光定量PCR分析表明,接种溃疡病病菌后,该基因受溃疡病诱导上调表达,推测该基因可能与柑橘溃疡病抗性相关.
- 段敏杰陈善春周鹏飞陈敏许兰珍彭爱红何永睿邹修平
- 关键词：纽荷尔脐橙CITSOUTHERNBLOT实时荧光定量PCR
- 一种农产品产业信息的地图化呈现方法
- 本发明属于信息平台传播技术领域，公开了一种农产品产业信息的地图化呈现方法，所述农产品产业信息的地图化呈现方法引入开放地图，将信息直接标注到地图上，结合筛选器、在数据库里抓取视图范围有效的信息并呈现到地图上，通过响应用户对...
- 姜国金许兰珍
- 文献传递
- 一种基于双菌株/双质粒遗传转化柑桔的共转化方法
- 本发明提供了一种基于双菌株/双质粒遗传转化柑桔的共转化方法，包括外植体预培养，农杆菌浸染步骤，其特征在于：预培养基础培养基为MS培养基，添加4mg/L 6‑苄氨基腺嘌呤（6‑BA）、1mg/L吲哚乙酸(IAA)、100μ...
- 彭爱红邹修平何永睿许兰珍雷天刚陈善春
- 文献传递
- 柑橘黄龙病相关水杨酸羧基甲基转移酶基因CsSAMT-1的克隆与表达分析被引量：6
- 2017年
- 为研究水杨酸羧基甲基转移酶(Salicylic acid carboxyl methyltransferase,SAMT)在柑橘防御黄龙病(Huanglongbing,HLB)中的作用,克隆获得Cs SAMT^(-1)基因,并以易感HLB锦橙和耐HLB酸柚为试材进行基因表达分析。q RT-PCR结果表明,易感病锦橙中CsSAMT^(-1)在感染HLB后上调表达,且在叶脉中的表达量显著高于叶肉;而耐病酸柚中CsSAMT^(-1)呈组成型表达。外源水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(MeJA)处理锦橙和酸柚,均可诱导CsSAMT^(-1)上调表达。HLB侵染前,耐病酸柚叶脉中SA和水杨酸甲酯(MeSA)含量分别为11.85和18.18 ng·g^(-1),显著高于锦橙(0.82和0.01 ng·g^(-1));HLB侵染后,锦橙中SA和MeSA含量明显上升,酸柚中SA含量明显下降,MeSA含量基本保持原有水平。研究表明,Cs SAMT^(-1)可能通过调节SA和Me SA信号分子转换来增强对柑橘黄龙病的抗性。
- 白晓晶许兰珍贾瑞瑞周鹏飞陈敏何永睿彭爱红雷天刚李强姚利晓陈善春邹修平
- 关键词：柑橘黄龙病MESA
- 检测柑橘铁螯合还原酶家族基因的方法
- 本发明公开了一种检测柑橘铁螯合还原酶家族基因的方法，包括步骤：1)选取1年生的资阳香橙、卡里佐枳橙和枳的实生苗用作组织表达分析的材料；2)提取各实生苗根、茎、叶组织的RNA；3)以步骤2)提取的RNA为模板，反转录合成c...
- 姚利晓陈善春何永睿许兰珍雷天刚邹修平彭爱红
- 文献传递
- 柑橘溃疡病抗性相关转录因子CitMYB20的功能被引量：2
- 2020年
- [目的]了解柑橘不同品种CitMYB20对柑橘溃疡病菌(Xanthomonas citri subsp.citri,Xcc)和外源植物激素的应答情况,评价转基因植株对柑橘溃疡病的抗性,验证CitMYB20的生物学功能.[方法]根据柑橘基因组序列设计引物,PCR法同源克隆柑橘溃疡病抗性品种金弹金柑(Fortunella japonica)和敏感品种枣阳小叶枳(Poncirus trifoliata)的CitMYB20基因序列和启动子序列,利用在线软件PlantCARE对启动子序列进行顺式作用元件预测.以针刺法对金弹金柑和枣阳小叶枳离体叶片接种柑橘溃疡病菌,用外源激素水杨酸、茉莉酸甲酯和乙烯利处理金弹金柑和枣阳小叶枳的叶片,在处理的不同时期收集材料,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CitMYB20的表达水平.分别构建CitMYB20的过表达载体和抑制表达载体,根癌农杆菌法转化枳上胚轴,随机摘取转基因株系成熟叶片进行柑橘溃疡病离体抗性评价.[结果]金弹金柑和枣阳小叶枳中CitMYB20(GenBank登录号分别为MN689609和MN689608)序列高度保守,相似度达到99%;两者的启动子序列(GenBank登录号分别为MN689611和MN689610)虽然都具有脱落酸和茉莉酸甲酯的响应元件,但金弹金柑中还具有水杨酸响应的顺式作用元件,而枣阳小叶枳中缺少该元件.在体外接种柑橘溃疡病菌5 d时,金弹金柑成熟叶片中CitMYB20表达量显著上升,达到对照的2.5倍;而枣阳小叶枳叶片CitMYB20在整个接菌周期内表达量未发生显著变化.外源激素处理时,CitMYB20对水杨酸和茉莉酸甲酯的响应相似,即在金弹金柑中呈现出先升高后降低的趋势,而在枣阳小叶枳中表达量降低,随后又恢复正常.乙烯利处理时,CitMYB20在金弹金柑中表达量略有下降,在枣阳小叶枳中表达量先升后降.遗传转化共获得7株过表达植株和5株抑制表达植株,转基因植株与对照植株相比在形态发育上未见明显差异.CitMYB20过表达植株能够在一定程度上减弱柑橘溃�
- 姚利晓范海芳张庆雯何永睿许兰珍雷天刚彭爱红李强邹修平陈善春
- 关键词：柑橘溃疡病过表达
- CjFRO2在转基因枳中的整合与表达被引量：2
- 2011年
- 三价铁螯合物还原酶(Ferric-chelator reductase,FCR)在植物对三价铁的吸收过程中起着关键作用,导入外源三价铁螯合物还原酶基因是改良植物耐缺铁能力的有效途径。香橙(Citrus junos Sieb.ex Tanaka)是目前表现最好的柑橘耐缺铁砧木之一,在铁胁迫时,香橙三价铁螯合物还原酶基因(CjFRO2)在根尖表皮细胞中高效表达,根系三价铁还原活性显著增强。以枳[Poncirus trifoliata(L.)Raf.]上胚轴为材料,利用根癌农杆菌介导法将CaMV 35S-CjFRO2基因表达单元导入枳基因组中,拟通过CjFRO2基因在转基因枳中的组成型表达,提高转基因枳的铁吸收能力。经过PCR检测,Southern杂交分析,获得4个单拷贝的转CjFRO2基因枳株系PF2、PF3、PF5和PF8。Real-TimePCR分析表明,CjFRO2基因在4个转基因枳株系中都能有效表达,并在其无性繁殖后代中也能够稳定表达。为培育耐缺铁优良柑橘砧木新品种奠定了基础。
- 刘小丰彭爱红许兰珍雷天刚姚利晓何永睿陈善春
- 关键词：香橙
- 柑橘栽培品种(系)DNA指纹图谱库的构建被引量：63
- 2009年
- 【目的】构建柑橘栽培品种(系)的DNA指纹图谱数据库,为建立柑橘种苗纯度及真实性鉴定技术体系和技术规范奠定基础。【方法】利用SSR标记和ISSR标记对102个柑橘栽培品种(系)进行DNA指纹分析,筛选适合的特征引物,构建柑橘栽培品种(系)的指纹图谱数据库。【结果】从200对SSR引物中筛选到重复性好、多态性丰富的12对引物作为柑橘品种(系)鉴定的特征引物,12对SSR特征引物组合可鉴别42个品种(系);在此基础上,对未出现SSR特征指纹的60个品种(系)进行ISSR指纹分析,从40个ISSR引物中筛选到2个可用于品种鉴定的特征引物,结合SSR标记,可快速、准确地鉴别70个柑橘的品种(系)。并利用这12对SSR特征引物和2个ISSR特征引物构建了70个柑橘栽培品种(系)的DNA特征指纹图谱数据库。【结论】SSR和ISSR标记适于构建柑橘栽培品种DNA指纹图谱库;指纹图谱库的建立为柑橘种苗纯度及真实性鉴定奠定了基础。
- 雷天刚何永睿吴鑫姚利晓彭爱红许兰珍刘小丰陈善春
- 关键词：柑橘SSRISSR
- 短童期柑桔资源“早花枳”遗传转化技术体系的建立被引量：2
- 2014年
- 早花枳是中国农业科学院柑桔研究所自田间发现的一个短童期资源,播种1年后即可开花结果,是验证柑桔类果树基因功能的模式植物。以早花枳上胚轴为外植体,通过研究早花枳在GFP（绿色荧光蛋白）基因遗传转化过程中,细胞分裂素（6-BA）浓度和卡那霉素（Km）筛选压对不定芽的再生频率和GFP表达率的影响,以及成苗方式对不定芽成苗率的影响,建立了早花枳遗传转化技术体系。结果表明,在共培养基和筛选培养基中加入6-BA 1.5mg/L,筛选培养时以Km 100mg/L作为筛选压,可获得138%的再生频率和32.5%的GFP表达率;早花枳在含有NAA 0.5~2.0mg/L的生根培养基上生根能力都较差,以酸桔为砧木进行试管内茎尖嫁接可获得98%的不定芽成苗率。
- 彭爱红曹立许兰珍邹修平雷天刚何永睿姚利晓陈善春
