赵刚
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 供职机构：湖南农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项北京市科委基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 狂犬病病毒P蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
- 本试验旨在建立一种检测狂犬病抗体的方法。通过传代培养BHK21细胞扩增狂犬病毒LEP-Flury株病毒,并根据GenBank发表的狂犬病病毒(Rabies Virus, RV) LEP-Flury株的基因序列设计一对引物...
- 赵刚
- 关键词：狂犬病病毒原核表达间接ELISA
- 文献传递
- 胶体金免疫层析检测犬、猫抗狂犬病病毒IgG抗体的研究被引量：6
- 2010年
- 目的建立检测犬、猫抗狂犬病病毒(RV)IgG抗体的胶体金免疫层析方法。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金用以标记SPA,同时将重组RVN蛋白、抗SPA抗体分别包被至硝酸纤维素膜的检测线与质控线上,制备一种检测犬、猫抗RVIgG抗体的胶体金检测卡,进行了特异性和灵敏度试验,并与ELISA同时检测临床样品、统计结果。结果 GICA试纸条检测灵敏度为0.5IU/mL,与犬瘟热病毒、犬细小病毒等阳性血清无交叉反应,并与ELISA相比,两者的符合率为94.6%。结论成功建立了检测犬、猫抗RVIgG抗体的通用型胶体金免疫层析方法 ,该方法灵敏度高,特异性强,检测速度快,操作简便,可广泛应用于基层。
- 范晓娟李刚邱文英赵刚
- 关键词：狂犬病N蛋白胶体金免疫层析IGG抗体SPA
- 狂犬病病毒P基因的原核表达及间接ELISA方法的应用被引量：4
- 2010年
- 目的以狂犬病病毒P蛋白作为检测抗原,用间接ELISA方法检测狂犬病病毒抗体。方法根据GenBank发表的狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)LEP-Flury株的基因序列设计引物,通过RT-PCR扩增出P基因的全长序列,克隆于pGM-T载体中,获得重组质粒pGM-T-P,将重组质粒用限制性内切酶NotI和EcoRI进行双酶切,酶切产物定向克隆于原核表达载体pET-32a(+)中,构建原核重组表达质粒pET-32a-P,阳性重组质粒转化原核表达宿主菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western-blot分析确定蛋白表达量和特异性。用纯化的蛋白作为诊断抗原,通过对反应条件的优化,初步将间接ELISA方法应用于狂犬病病毒抗体的检测中。结果扩增RV P基因,构建了克隆质粒pGM-T-P、原核表达质粒pET-32a-P,高效表达了主要以可溶性形式存在的P蛋白,并能与RV阳性血清发生特异性反应。用表达的狂犬病病毒重组P蛋白建立了用于RV抗体检测的间接ELISA方法。结论成功表达了磷蛋白,用其作为固化抗原以间接ELISA方法检测RV抗体。
- 赵刚李刚陈铁桥范晓娟
- 关键词：P基因原核表达
- 狂犬病病毒P基因的原核表达及间接ELISA方法的应用
- 根据GenBank发表的狂犬病病毒（Rabies Virus,RV）LEP-Flury株的基因序列设计引物,通过。RT-PCR扩增出P基因的全长序列,克隆于pGM-T载体中,获得重组质粒pGM-T-P,将重组质粒用限制性...
- 赵刚李刚范晓娟
- 关键词：P基因原核表达间接ELISA
- 文献传递
- 湖南农村居民体育消费行为研究 ——以长株潭为例
- 农村体育是我国体育事业的组成部分之一,不仅关系到我国居民的身体健康,还是建设社会主义新农村文化建设的新任务。随着国家经济的发展,农村居民的生活水平不断提高,越来越多的农民对身体锻炼的重视程度增加,使得农村体育消费市场扩大...
- 赵刚
- 关键词：体育消费体育市场
- 文献传递
