邹斌
- 作品数：9 被引量：34H指数：3
- 供职机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西高等学校科研项目广西壮族自治区自然科学基金更多>>
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- α玉米赤霉醇影响小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化
- 目的:探讨α-玉米赤霉醇对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响。 方法:采用全骨髓培养差速贴壁法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞，取第3代细胞分为6组:非诱导组加含体积分数为10％胎牛血清、1％双抗的IMDM普通培...
- 邹斌
- 关键词：Α-玉米赤霉醇骨髓间充质干细胞成骨细胞分化动物实验
- 文献传递
- 黄精多糖对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中ALP和BGP表达的影响被引量：15
- 2014年
- 目的探讨黄精多糖(PSP)对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和骨钙素(bone gla protein,BGP)表达的影响。方法取8周龄雄性BALB/C小鼠1只,无菌操作分离小鼠股骨和胫骨,注射器冲出骨髓制成细胞悬液,传代3次后分为7组用于实验。诱导组细胞采用体积分数为0.1双抗、含不同浓度PSP的血清+IMDM培养,非诱导组细胞采用体积分数为0.1双抗血清+IMDM培养。每天在倒置显微镜下观察各组细胞的生长情况及形态变化。在培养第3,5,7,9,11,13天用四唑盐法(MTT)检测细胞的生长情况并绘制细胞生长曲线。在培养第7天、第14天采用ELISΑ酶联免疫吸附法分别测量细胞碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)的表达量。结果①小鼠骨髓间充质干细胞经PSP诱导后呈三角形、多角形、不规则状,可重叠生长。②各组细胞生长曲线总体趋势基本相同,在第7,9,11,13天,非诱导组细胞不再生长,而各PSP诱导组细胞均继续生长。③各不同浓度PSP诱导组均比非诱导组高表达ALP和BGP(P<0.01)。结论PSP可显著促小鼠骨髓间充质干细胞向成骨分化过程中ALP和BGP的表达,且随着浓度的增高该促进作用逐渐增强。
- 曾高峰宗少晖邹斌李柯柯
- 关键词：黄精多糖骨髓间充质干细胞成骨细胞分化碱性磷酸酶骨钙素
- α-玉米赤霉醇影响小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化被引量：1
- 2014年
- 背景:骨髓间充质干细胞具有向成骨细胞分化的能力,植物雌激素α-玉米赤霉醇对小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化可能有促进作用。目的:探讨α-玉米赤霉醇对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响。方法:采用全骨髓培养差速贴壁法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,取第3代细胞分为6组:非诱导组加含体积分数为10%胎牛血清、1%双抗的IMDM普通培养基;空白诱导组仅加入等量成骨条件培养基(含0.1μmol/L地塞米松、10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠、50μmol/L维生素C);阳性对照诱导组加入等量成骨条件培养基及10-8 mol/L雌二醇;高、中、低α-玉米赤霉醇组分别加入成骨条件培养基及10-5,10-6,10-7 mol/L梯度浓度的α-玉米赤霉醇。倒置显微镜下观察细胞形态变化,MTT实验测定细胞增殖状态绘制细胞生长曲线,酶联免疫吸附法测定碱性磷酸酶、骨钙素的表达。结果与结论:非诱导组细胞呈长梭形,生长密集时有接触抑制,各诱导组的细胞增殖受促进,诱导后细胞呈三角形、多角形、不规则形状,细胞可重叠生长;非诱导组低表达碱性磷酸酶、骨钙素,低浓度(10-7 mol/L)α-玉米赤霉醇组和阳性对照诱导组高表达碱性磷酸酶、骨钙素,与空白诱导组相比,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结果说明α-玉米赤霉醇可以促进骨髓间充质干细胞的增殖,低浓度α-玉米赤霉醇可显著促进体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化。而上调碱性磷酸酶、骨钙素的表达量可能是α-玉米赤霉醇诱导促进骨髓间充质干细胞骨向分化的作用机制之一。
- 邹斌宗少晖曾高峰方晔高太行
- 关键词：干细胞骨髓干细胞骨髓间充质干细胞Α-玉米赤霉醇成骨细胞分化骨钙素
- α玉米赤霉醇对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中OPG和RANKL蛋白表达的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨α-玉米赤霉醇(α-zearalanol,α-ZAL)对小鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)向成骨细胞增殖、分化的影响。方法采用全骨髓培养差速贴壁法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,取第3代细胞分为空白对照组、雌二醇阳性对照组、低浓度α-ZAL组、中浓度α-ZAL组,高浓度α-ZAL组。镜下每天观察细胞形态变化,碱性磷酸酶染色鉴定成骨细胞纯度,MTT实验测定细胞增殖活性绘制细胞生长曲线,采用酶联免疫吸附法(ELISΑ)测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2),运用蛋白免疫印迹法(Western blotting,WB)检测护钙素(Osteoprotegerin,OPG)和NF-KB受体活化配体(Receptor actiator of nuclear factor-KB ligand,RANKL)的蛋白水平表达变化。结果不同浓度的α-玉米赤霉醇可显著的促进小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞增殖、分化,增加细胞活性(P<0.05),明显提高小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化后ALP和BMP-2的表达(P<0.05),并且显著的上调了成骨细胞内OPG/RANKL的表达率(P<0.05)。结论不同浓度的α-玉米赤霉醇可以促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞增殖、分化,并且通过上调OPG/RANKL的表达率抑制成骨细胞细胞向破骨细胞分化,有望成为临床骨折疏松症治疗的激素替代药物。
- 方晔宗少晖赵劲民曾高峰邹斌彭金珍
- 关键词：骨髓间充质干细胞成骨细胞
- α-玉米赤霉醇在雌激素缺乏所致骨质疏松症中的研究进展被引量：3
- 2014年
- 植物雌激素（phytoestrogen）是一种天然的植物成分，化学结构与天然内源性的雌激素相似，作为天然外源性的植物成分具有与天然内源性的雌激素一样的雌激素样效应生物学特点；根据植物雌激素化学分子结构的差异，人们大致把植物雌激素分为木酚素类（Lignans）、香豆雌酚（Coumes—tans）、二苯乙烯类（Stibenes）、异黄酮类（Isoflavones）及真菌类（Mycoestrogen）5类。
- 方晔邹斌赵劲民宗少晖
- 关键词：Α-玉米赤霉醇植物雌激素骨质疏松症
- 黄精多糖对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中PINP和BMP-2表达的影响被引量：8
- 2014年
- 探讨黄精多糖(PSP)对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用中I型前胶原N端前肽(Procollagen typeⅠN-terminal Propeptide,PINP)和骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)表达的影响。取8周龄雄性BALB/C小鼠1只,无菌操作分离小鼠股骨和胫骨,注射器冲出骨髓制成细胞悬液,传代3次后分为6组用于实验。空白诱导组仅加入等量成骨诱导培养基;阳性对照诱导组加入等量成骨诱导培养基及雌二醇(10-8mol/L);各PSP诱导组:加成骨诱导培养基和各自浓度的PSP(200、300、400、500 mg/mL)。每天在倒置显微镜下观察各组细胞的生长情况及形态变化。倒置相差显微镜镜下观察细胞形态变化。在培养第7 d、第14 d采用ELISA酶联免疫吸附法分别测量细胞PINP和BMP-2的表达量。实验结果显示小鼠骨髓间充质干细胞原代培养呈长梭形,有接触抑制现象,诱导后细胞呈三角形、多角形、不规则形状,细胞生长密集时可重叠生长。各不同浓度PSP诱导组均比非诱导组高表达PINP和BMP-2(P<0.01)。表明PSP呈剂量相关性促进体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化,高浓度PSP可显著促进骨髓间充质干细胞骨向分化过程中BMP-2和PINP的表达。
- 曾高峰宗少晖邹斌李柯柯
- 关键词：黄精多糖骨髓间充质干细胞成骨细胞分化
- 小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α-玉米赤霉醇对PⅠNP和BMP-2表达的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α-玉米赤霉醇(α-ZAL)对Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)和骨形态发生蛋白-2(BMP-2)表达的影响。方法采用全骨髓培养差速贴壁法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,取第3代细胞分为空白诱导组、阳性诱导组及高、中、低浓度α-ZAL诱导组。空白诱导组仅加入成骨条件培养基,阳性诱导组加入等量成骨条件培养基及雌二醇,高、中、低浓度α-ZAL诱导组分别加入成骨条件培养基及梯度浓度(10-5、10-6、10-7mol/L)的α-ZAL。采用ELISΑ法测定PⅠNP和BMP-2的表达量。结果小鼠骨髓间充质干细胞原代培养呈长梭形,有接触抑制现象,诱导后细胞呈三角形、多角形、不规则形状,细胞生长密集时可重叠生长。与空白诱导组比较,各组PⅠNP表达量均明显升高(P<0.01),阳性诱导组及低、中浓度α-ZAL诱导组BMP-2表达量均明显升高(P<0.01),高浓度α-ZAL诱导组BMP-2表达量明显下降(P<0.01)。与阳性诱导组比较,低浓度α-ZAL诱导组PⅠNP表达量明显升高(P<0.01),而中、高浓度α-ZAL诱导组PⅠNP表达量明显下降(P<0.01),低、中浓度α-ZAL诱导组BMP-2表达量均明显升高(P<0.01),高浓度α-ZAL诱导组BMP-2表达量明显下降(P<0.01)。结论α-ZAL呈剂量相关性促进体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化,低浓度(10-7mol/L)α-ZAL可显著促进骨髓间充质干细胞骨向分化过程中PⅠNP和BMP-2的表达,随着剂量的升高,促进作用下降。
- 宗少晖曾高峰邹斌李柯柯赵劲民
- 关键词：Α-玉米赤霉醇骨髓间充质干细胞成骨细胞分化
- 基于STAT3信号通路研究IL-17在大鼠急性脊髓损伤模型中的作用研究被引量：2
- 2014年
- [目的]观察白细胞介素17通过激活STAT3信号通路在大鼠急性脊髓损伤模型中的表达。[方法]健康雄性SD大鼠75只,体重(250±25)g,分为对照组和脊髓损伤组,脊髓损伤组随机分到1、24、48和72 h四个亚组(n=15只)。改良Allen氏打击法建立脊髓损伤模型,对照组只切除椎板不损伤脊髓。术后处死前对大鼠脊髓功能进行BBB评分,HE染色观察损伤段脊髓组织形态结构,免疫组织化学检测IL-17、p-STAT3的表达变化,逆转录PCR检测IL-17 mRNA的动态变化。[结果]免疫组织化学检测显示对照组的大鼠脊髓组织中IL-17、pSTAT3表达量较少,损伤后1h明显上升,24 h到达峰值,而后缓慢下降,72 h仍高于对照组(P<0.05)。RTPCR检测显示脊髓损伤后IL-17mRNA表达趋势与免疫组化结果一致(P<0.05)。[结论]大鼠脊髓损伤后可异常激活IL-17过量表达,它可能对继发性脊髓损伤炎症反应有着重要作用。
- 宗少晖曾高峰方晔邹斌高太行
- 关键词：脊髓损伤IL-17STAT3炎症反应
- 大鼠脊髓损伤模型Th17细胞分化中信号转导与转录激活因子3的作用被引量：8
- 2014年
- 目的观察大鼠脊髓损伤模型中磷酸化信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)及Th17相关因子的水平,初步探讨STAT3对脊髓损伤后Th17细胞的作用。方法成年健康雄性SD大鼠75只随机分为对照组(n=15)和模型组(每个时点n=15)。模型组采用改良Allen氏打击法建立脊髓损伤模型,对照组仅行椎板全切除术。在建模后1、24、48和72 h获取模型组大鼠损伤段脊髓、脾脏及外周血,免疫组织化学染色法检测白细胞介素(IL)-17在损伤段脊髓组织中的分布及表达情况,蛋白免疫印迹法检测p-STAT3在损伤段脊髓和脾脏组织中的表达变化,ELISA法检测外周血IL-6、IL-21和IL-23的动态变化,并与对照组大鼠作比较。结果模型组各时点IL-17、p-STAT3、IL-6、IL-21和IL-23的表达明显高于对照组(P<0.05),相关性分析显示p-STAT3的表达均与IL-17、IL-6及IL-21的表达呈正相关性(P<0.05)。结论 STAT3的异常激活可能是造成脊髓损伤后Th17细胞过度表达的重要原因。
- 宗少晖曾高峰方晔邹斌高太行
- 关键词：STAT3白细胞介素-17白细胞介素-21
