郑宁宁
- 作品数:18 被引量:39H指数:4
- 供职机构:中国医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金辽宁省科学技术计划项目沈阳市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 高压氧预处理对小鼠皮肤移植术后脾淋巴细胞及其黏附分子的影响(英文)被引量:4
- 2010年
- 本研究探讨高压氧预处理对同种异体小鼠皮肤移植排斥反应的影响及其分子机制。BALB/c供鼠与C57BL/6受鼠,各自或共同接受高压氧预处理;受鼠在皮肤移植术后,腹腔注射常规免疫抑制剂环孢素A。采用免疫荧光染色技术和流式细胞术,观察不同处理方案对小鼠脾淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+细胞百分率及淋巴细胞表面黏附因子LFA-1(CD11a/CD18)表达的影响。结果表明,与对照组相比,HBO预处理组小鼠脾淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+及其表面黏附分子CD4+CD11a+、CD4+CD18+、CD8+CD11a+、CD8+CD18+的表达均下降,以供鼠和受鼠都接受HBO预处理同时与环孢素A联合应用组下降最明显(p<0.05);HBO预处理与环孢素A联合应用组小鼠一般状态好于单独应用HBO预处理或环孢素A组。结论:高压氧预处理与环孢素A联合应用较单独应用高压氧预处理和环孢素A可更好地降低皮肤移植术后的免疫排斥反应,其保护作用的分子机制与调节淋巴细胞的活性并抑制其表面黏附因子的表达作用相关。
- 宋晓宇孙鲁宁郑宁宁张海鹏
- 关键词:高压氧预处理黏附分子免疫排斥
- RNA干扰作用对小鼠脾淋巴细胞分泌TNF-α的影响
- 肿瘤坏死因子(TNF-α)由活化的巨噬细胞和T细胞产生,分跨膜型和分泌型,是一类重要的细胞因子。TNF-α具有广泛的生物学活性,包括对造血、免疫和炎症的调节,对血管和凝血的影响以及对多种器官的作用。TNF-α参与了众多疾...
- 郑宁宁
- 关键词:RNA干扰转录后基因沉默LPSSIRNA
- 文献传递
- RNA干扰对小鼠脾淋巴细胞TNF-α表达的影响被引量:1
- 2007年
- 目的:触发哺乳动物细胞内RNA干扰,研究肿瘤坏死因子(TNF-α)特异性小片断双链RNA对活化的小鼠淋巴细胞TNF-α表达的影响。方法:原代培养小鼠脾淋巴细胞并用脂多糖激活,确立细胞分泌TNF-α的峰值,将针对TNF-α靶序列的干扰片断经PCR扩增后转染入细胞,ELISA法检测TNF-α浓度,RT-PCR法检测TNF-αmRNA的表达。结果:终止刺激后48h淋巴细胞分泌TNF-α达高峰,TNF-α特异RNA干扰组与阴性对照组比较TNF-α浓度降低近30%,TNF-αmRNA表达抑制率达54.5%。结论:TNF-α小片断双链RNA可特异性抑制哺乳动物淋巴细胞TNF-α的表达;RNA干扰具有严格的序列特异性,只特异的沉默靶基因而不影响其他基因的表达。
- 宋晓宇郑宁宁孙杰张海鹏赵昕
- 关键词:RNA干扰肿瘤坏死因子Α脾淋巴细胞
- 靶向TNF-α基因shRNA干扰片段的筛选和重组体的构建
- 2009年
- 本研究利用RNA干扰技术,筛选出可以高效、特异性抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的小发夹状RNA(shRNA)片段,设计并构建重组质粒,进行序列分析,为探索TNF-α相关疾病的基因治疗提供新途径。取原代培养小鼠腹腔巨噬细胞,置于15%DMEM中,调细胞浓度为2×107/L,接种于6孔板,3ml/well;细胞用脂多糖(LPS)激活,ELISA法测不同时间培养上清中TNF-α的浓度;将针对TNF-α基因的5段shRNA干扰片段的表达框经PCR扩增、纯化后,与转染试剂混合转染入巨噬细胞,细胞用LPS激活24小时后用ELISA法测培养上清中TNF-α的浓度,RT-PCR法测细胞TNF-αmRNA的表达;将最有效抑制TNF-α表达的干扰片段插入质粒载体,转化E.coliDH5α感受态菌株,提取质粒,进行测序分析。结果表明:LPS刺激巨噬细胞24小时后,细胞分泌TNF-α达高峰;转染了干扰序列1的细胞培养上清中TNF-α浓度与对照组相比下降最明显(p<0.05),达59.46%,TNF-αmRNA的表达被抑制了61.2%;将干扰序列1DNA序列克隆到载体上,经测序鉴定确实为所需序列。结论:成功筛选出靶向TNF-α基因的shRNA干扰片段并构建重组质粒,可进一步利用克隆所得到的shRNA干扰TNF-αmRNA的表达,为TNF-α相关疾病的基因治疗提供新手段。
- 宋晓宇郑宁宁孙鲁宁张海鹏
- 关键词:肿瘤坏死因子-ΑRNA干扰
- 中西医结合治疗原发性三叉神经痛62例疗效观察被引量:2
- 2007年
- 原发性三叉神经痛是常见而棘手的疾病,病因至今未明。西医治疗主要以镇静、镇痛为主,常用抗癫痫药,但副作用大,疗效不确切,易复发。2005年1月-2006年12月,采用中西医结合治疗原发性三又神经痛62例,与单纯西药治疗的对照组比较,疗效较好。现报告如下。
- 丁旭东孟凌新郑宁宁
- 关键词:三叉神经痛原发性中西结合
- 肠道菌群对代谢综合征影响的研究进展被引量:12
- 2019年
- 近年来,肠道菌群与代谢综合征(MS)的相互关系备受关注。肠道菌群失调所引发的内毒素血症和低程度炎性反应以及糖脂代谢相关的信号通路异常均会不同程度地影响机体代谢,加剧肥胖和胰岛素抵抗进程,从而诱发MS。而肠道内的益生菌则可以改善患者机体内肠道菌群失调,调节糖脂代谢,抑制炎症反应,改善代谢紊乱,从而防治MS及其相关并发症。
- 任巧盈王香懿李曜存郑宁宁孙鲁宁
- 关键词:肠道菌群菌群失调代谢综合征炎症反应糖脂代谢益生菌
- MRPL48基因在代谢综合征诊断中的意义探讨
- 2011年
- 目的通过观察RNA干扰线粒体核糖体大亚基蛋白48(MRPL48)基因表达对Hela细胞线粒体能量代谢的影响,探讨MRPL48基因在代谢综合征诊断中的意义。方法将MRPL48特异性shRNA片段转入体外培养的Hela细胞,48 h后采用Western blotting方法确认shRNA的干扰效果;用JC-1染色法观察线粒体膜电位的变化。结果 MRPL48 shRNA转染细胞后,能够有效抑制Hela细胞MRPL48基因的表达;JC-1染色显示,RNA干扰组Hela细胞较对照组绿色荧光颗粒明显增加,提示线粒体膜电位下降。结论 MRPL48是维持线粒体正常功能的关键蛋白质,该蛋白在细胞代谢过程中起到了非常重要的作用,提示MRPL48可作为代谢综合征临床诊治的新靶点。
- 孙鲁宁张宁宋晓宇郑宁宁张海鹏
- 关键词:RNA干扰代谢综合征
- RNA干扰对小鼠脾淋巴细胞分泌TNF-α的影响被引量:1
- 2006年
- 目的:探讨小干扰RN(A siRNA)对小鼠脾淋巴细胞分泌的肿瘤坏死因子α(TNF-α)的抑制效果。方法:体外PCR扩增合成针对TNF-α靶位点的DNA表达盒,转染经脂多糖(LPS)激活的小鼠脾淋巴细胞,在细胞内源性RNA聚合酶III作用下转录形成siRNA,诱发目标mRNA的降解。于转染后48 h收集细胞培养上清。TNF-α浓度用ELISA方法测定。结果:与空白对照组和无关干扰组相比,干扰组TNF-α分泌量明显降低(P<0.05),抑制率约为16%。结论:RNA干扰技术可以在原代培养的小鼠脾淋巴细胞中发挥特异性干扰作用,产生抑制TNF-α分泌的效果,为TNF-α的基因治疗开拓新途径。
- 郑宁宁丁旭东宋晓宇杜莉莉孙杰金玉楠张海鹏
- 关键词:RNA干扰小干扰RNA转录后基因沉默肿瘤坏死因子Α
- RNA干扰抑制小鼠脾淋巴细胞分泌IL -1α被引量:1
- 2007年
- 目的:确定针对IL-1α的siRNA在细胞内与其具有同源互补序列的靶标位点结合后,特异性降解IL-1α的mRNA,从而抑制其表达的效果。方法:体外PCR扩增合成针对IL-1α靶位点的DNA表达盒,纯化后转染经LPS激活的小鼠脾淋巴细胞,在细胞内源性RNA聚合酶Ⅲ作用下转录形成siRNA,诱发目标mRNA的降解。于转染后48h收集细胞培养上清。用ELISA法测定IL-1α浓度。结果:干扰组IL-1α分泌量明显低于对照组和无关干扰组(P<0.05),抑制率约为15%。结论:RNA干扰技术可以在原代培养的小鼠脾淋巴细胞中发挥特异性干扰作用,产生抑制IL-1α分泌的效果,为IL-1α的基因治疗开拓了新途径。
- 郑宁宁于艳秋宋晓宇丁旭东张海鹏
- 关键词:RNA干扰转录后基因沉默白细胞介素1
- PI3K/AKT信号传导通路在血管瘤发生发展中的作用及靶向该通路治疗血管瘤的实验研究
- 目的
血管瘤是一种常见的血管内皮肿瘤,在我国的发病率约为0.3%~1%,具有一系列广泛的临床表现。从良性的婴幼儿血管瘤,恶性度低的血管内皮瘤,到多发于成人的恶性血管肉瘤。血管瘤及相关的血管畸形可见于多种先天性遗传性...
- 郑宁宁
- 关键词:血管瘤信号传导通路血管内皮生长因子慢病毒介导