郭惠玲 作品数:28 被引量:69 H指数:5 供职机构: 中国人民解放军总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
新型免疫抑制剂J2对角膜移植小鼠淋巴细胞中白细胞介素10及干扰素γ分泌的影响 被引量:2 2011年 背景:小分子化合物J2是以CD4为靶点的新型免疫抑制剂,课题组以往的实验已经验证了J2对正常小鼠及角膜移植后小鼠脾细胞的影响。目的:探讨小分子化合物J2对异基因角膜小鼠的淋巴细胞中白细胞介素10及干扰素γ分泌的影响。方法:BalB/c(H2d)小鼠随机数字表法分为4个组,安慰剂组、环孢素A组和J2组接受C57BL/6-BALB/c同种异体角膜移植后给予相应药物干预,空白对照组不接受角膜移植,观察各组角膜移植片存活时间。取各组大鼠脾细胞给予刀豆蛋白Ⅵ型刺激细胞增生,采用ELISA法测定细胞上清中白细胞介素10及干扰素γ水平,比较各组细胞增生指数及细胞因子含量。结果与结论:J2可能通过抑制CD4+T淋巴细胞而抑制角膜排斥反应的发生,延长角膜植片存活时间;J2能够明显抑制ConA刺激角膜移植后小鼠脾细胞的增生及Th1细胞因子的产生。这些效应与环孢素A的效果相似。 王大江 郭惠玲 黄一飞 陈国江 张晗 黎燕关键词:角膜移植 免疫抑制剂 免疫排斥 小鼠 白细胞介素10 干扰素Γ 原子力显微镜观测小分子化合物J2对原代培养的大鼠角膜上皮细胞膜表面超微结构的影响 2021年 目的探讨小分子化合物J2对体外培养的大鼠角膜上皮细胞膜表面超微结构的影响。方法实验研究。取SD大鼠原代培养的角膜上皮细胞进行研究。采用密度梯度离心分离法获取大鼠单个核细胞(MNC),将MNC加入角膜上皮细胞共培养,再用小分子化合物J2处理作为实验组,未进行小分子化合物J2处理的MNC及角膜上皮细胞作为对照组,空白对照组仅为角膜上皮细胞。应用流式细胞术检测角膜上皮细胞CD80的表达。采用原子力显微镜(AFM)观测角膜上皮细胞膜表面形态学参数,包括平均粗糙度(Ra)、均方根粗糙度(Rq)、平均低谷高度(Rvm)及波峰至波谷的粗糙度(Rt)。多个样本均数间的总体比较采用单因素方差分析,组间的多重比较采用LSD-t检验。结果实验组、对照组及空白对照组角膜上皮细胞CD80的表达量分别为1.944±0.237、3.128±0.175及1.082±0.120,组间比较差异有统计学意义(F=156.31,P<0.01)。AFM观测角膜上皮细胞膜表面超微结构:实验组、对照组及空白对照组Ra值分别为86.75±12.60、120.23±12.11、61.94±10.62,组间差异有统计学意义(F=306.92,P<0.01);3个组Rq值分别为102.53±9.45、138.30±10.13、91.96±7.25,组间差异有统计学意义(F=361.85,P<0.01);3个组Rvm值分别为-42.21±14.22、-67.36±10.89、-32.18±19.01,组间差异有统计学意义(F=72.22,P<0.01);3个组Rt值分别为437.32±15.66、495.32±13.96、339.92±11.22,组间差异有统计学意义(F=1634.26,P<0.01);3个组两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论经MNC活化的SD大鼠角膜上皮细胞呈CD80高表达,在小分子化合物J2作用后CD80表达减少;应用AFM可以观测到SD大鼠角膜上皮细胞膜表面超微结构经MNC活化后更加粗糙,颗粒状突起明显增加,在小分子化合物J2作用后超微结构的改变有所减轻。 宋静 黄一飞 黄一飞 郭惠玲关键词:角膜 上皮细胞 移植物排斥 准分子激光手术中OUP-SBK刀头制作超薄角膜瓣矫治近视的疗效分析 被引量:5 2011年 目的分析准分子激光手术中采用OUP-SBK刀头制作超薄角膜瓣矫治近视的疗效。方法准分子激光近视手术的患者578例,随机分为薄角膜瓣组378例745只眼和厚角膜瓣组200例389只眼。分别在手术后1d、1周、1和3个月随访检查裸眼视力(uncorrected visual acuity,UCVA)、最佳矫正视力(the best corrected visual acuity,BSCVA)、屈光度,并对数据进行统计学分析。结果手术前薄角膜瓣组球镜和柱镜较厚角膜瓣组偏大,差异有显著意义(P<0.05);手术后UCVA达到1.0的百分率,术后1 d薄角膜瓣组为90.2%,厚角膜瓣组为91.4%;术后3个月薄角膜瓣组为95.6%,厚角膜瓣组为96.6%;差异均无显著意义(P>0.05);手术后3个月BSCVA较术前丢失1行的比例薄角膜瓣组为11.0%,厚角膜瓣组8.8%,差异没有显著意义(P>0.05)。手术后3个月屈光度±0.50 D以内薄角膜瓣组为90.6%,厚角膜瓣组为92.6%;±1.00D以内薄角膜瓣组为97.5%,厚角膜瓣组为97.4%;差异均无显著意义(P>0.05)。结论利用OUP-SBK刀头制作超薄角膜瓣矫正近视安全有效,手术效果稳定,可为患者保留更多的基质床厚度,扩大近视的矫治范围,有助于高度近视且角膜薄的患者以及二次手术矫治屈光回退提供机会。 杜改萍 黄一飞 郭惠玲 宫玉波 余继峰 宋静 葛梅关键词:准分子激光原位角膜磨镶术 角膜瓣 近视 新型免疫抑制剂J2纳米混悬液抑制大鼠角膜移植排斥反应的实验研究 被引量:1 2015年 目的观察计算机辅助药物设计的新型免疫抑制剂J2纳米混悬液(nano-suspension,NS)结膜下注射对大鼠角膜移植排斥反应的抑制作用。方法成年雌性Wistar大鼠为供体,Sprague-Dawley(SD)大鼠为受体,建立同种异体穿透性角膜移植模型。手术大鼠随机分成3组,每组各16只(32眼氉),A组:SD大鼠自体角膜移植,结膜下注射空白溶剂0.05 mL;B、C组为同种异体角膜移植组,术后分别给予结膜下注射空白溶剂0.05 mL及10 g·L-1J2 NS。术后记录角膜植片排斥指数(rejection index,RI),当RI≥6,确定为排斥。各组于角膜移植后7 d、14 d随机选取2只行术眼及同侧颌下淋巴结病理学检查。结果 A组:术后2~3 d角膜植片由透明逐渐变为混浊、水肿,随后保持透明。B组:术后3~5 d角膜植片开始水肿、混浊,7~10 d时水肿、混浊发展迅速。C组:术后1周反应与A组相似,之后出现角膜水肿、混浊,术后9~14 d角膜完全混浊。A、B、C组的角膜植片生存时间分别为(30.00±0.00)d、(10.75±1.60)d、(14.33±2.93)d,三组间差异有统计学意义(均为P〈0.05)。组织学观察发现:A组术后炎症反应轻微,基质厚度基本正常或增厚,内皮层完整。B组术后14 d时可见典型的免疫排斥反应,植片角膜上皮空泡样改变、部分崩解坏死。C组较B组角膜植片中细胞成分和新生血管均少,同侧颌下淋巴结增生明显减弱。结论 J2 NS结膜下注射有抑制大鼠角膜移植排斥的作用,可减轻角膜移植术后角膜植片和同侧颌下淋巴结的细胞增生,抑制免疫应答。 郭惠玲 杜改萍 王大江 胡莲娜 伍春荣 高付林 闫洪欣 黄一飞关键词:免疫抑制剂 角膜移植 排斥反应 颌下淋巴结 J2对同种异体穿透性角膜移植模型大鼠CD4^+和CD8^+T细胞免疫功能的抑制 被引量:1 2016年 背景:J2即是以CD4分子与MHCⅡ类分子复合结合物功能域(CD4-D1/MHCⅡβ)为靶点,在数十万种有机化合物化学数据库中进行计算机筛选获得的小分子化合物。在先期的研究中,作者分别采用口服和腹腔注射等全身用药的方式将J2用于小鼠皮肤移植及角膜移植模型,结果证明J2能够延长移植片的生存时间,抑制排斥反应的发生。为了能更好的发挥药物的靶向作用,并减少全身毒副反应,进一步将J2用于局部治疗角膜移植排斥反应。目的:观察新型免疫抑制剂J2对同种异体穿透性角膜移植大鼠模型CD4^+和CD8^+T细胞免疫功能的抑制作用。方法:以成年雌性Wistar大鼠作为供体,SD大鼠作为受体,建立同种异体穿透性角膜移植模型。A组为正常SD大鼠结膜下空白溶剂0.05 m L注射组。手术大鼠随机分成3组:B组为SD大鼠自体角膜移植结膜下空白溶剂0.05 m L注射组;C组为同种异体角膜移植结膜下空白溶剂0.05 m L注射组;D组为同种异体角膜移植结膜下1%J2-纳米混悬液(NS)0.05 m L注射组。各组动物分别于移植后3 d、1周、2周、3周,使用流式细胞仪检测外周血中T细胞亚群分布情况并进行比较。结果与结论:B组各时间点外周血中淋巴细胞总CD3^+、CD4^+、CD8^+以及CD4^+/CD8^+差异无显著性意义;C组移植后3 d和1周总CD3^+、CD4^+、CD8^+差异无显著性意义,1周和2周总CD3^+、CD4^+、CD8^+数目增多,差异有显著性意义(P<0.05);D组中,1周和2周时CD4^+和CD8^+无显著增生。同一时间点横向比较:3 d、1周、2周时D组总CD3^+明显少于C组,差异有显著性意义(P<0.05),而在第3周时D组与C组差异无显著性意义;CD4^+在移植后3 d和1周时D组较C组数目少,但差异无显著性意义。CD4^+/CD8^+比值,在3 d、1周、3周时D组与C组比较差异均无显著性意义。提示J2通过抑制T淋巴细胞增生,抑制T细胞介导的角膜移植排斥反应。 郭惠玲 杜改萍 王丽强 宫玉波 闫洪欣 黄一飞关键词:角膜移植 移植物排斥 移植动物模型 苦味酸-天狼猩红染色法检测PHEMA人工角膜植入碱烧伤兔角膜中胶原的动态变化 被引量:1 2015年 目的观察新型软性一体式PHEMA人工角膜对碱烧伤兔角膜孔隙内新生组织中胶原成分及分布的影响。方法制备兔角膜碱烧伤模型后,植入软性一体式PHEMA人工角膜材料。分别于术后2、8、16、22周取裙边组织进行苦味酸-天狼猩红染色,偏振光下进行观察。结果这种PHEMA材料中允许角膜及周围组织迁入并生长,多部位形成纤维连接。染色后偏振光下提示孔隙内新生组织主要为Ⅰ型胶原,其生长过程表现为黄绿色的Ⅲ型胶原慢慢变成成熟的、红色的Ⅰ型胶原,并且角膜缘处细胞活跃。结论 PHEMA材料孔隙的胶原和角膜组织的胶原变化与植入正常兔角膜的愈合结果一致。 白华 郭惠玲 王丽强 黄一飞关键词:人工角膜 碱烧伤 PDGF抗体对体外培养人视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用 被引量:1 2007年 目的:探讨血小板源性生长因子(PDGF)抗体对体外培养人视网膜色素上皮细胞(hRPE)增生的影响。方法:体外培养hRPE分为对照组和实验组,对照组未加入抗体,实验组分别加入1×10-6、5×10-6、1×10-5、5×10-5和1×10-4mg.L-1PDGF抗体。采用生长曲线法及MTT比色法检测PDGF抗体对hRPE细胞增殖的影响,并用流式细胞术检测细胞周期的变化,透射电镜观察抗体作用后细胞超微结构的变化。结果:1×10-6mg.L-1PDGF抗体对hRPE细胞有轻度促增生作用,MTT结果显示其抑制率为-11.74%。5×10-6、1×10-5、5×10-5和1×10-4mg.L-1PDGF抗体对细胞有抑制作用,作用72 h抑制率分别为12.55%、43.72%、55.10%和55.10%。台盼蓝染色检测细胞存活率,各组细胞活力均大于80%。流式细胞仪检测结果显示,5×10-5mg.L-1PDGF抗体作用72 h,细胞明显阻滞于G2/M期,可见凋亡指数明显增加。透射电镜结果显示,5×10-5mg.L-1PDGF抗体作用72 h电镜下可见胞质空化,核染色质轻度趋边凝聚,有早期凋亡的改变。结论:PDGF抗体对hRPE细胞的增生有明显的抑制作用,在一定范围内随着抗体浓度的增大对hRPE细胞增生的抑制作用逐渐加强。PDGF抗体对hRPE细胞增生的抑制作用主要是依赖于诱导细胞的凋亡,而不是促使细胞变性坏死,作用性质比较温和。 吴雅臻 戚卉 范斌 郭惠玲 李飞关键词:色素上皮 细胞培养 苦味酸-天狼猩红染色法检测PHEMA人工角膜植入碱烧伤兔角膜中胶原的动态观察 目的:观察新型软性一体式PHEMA人工角膜植入碱烧伤兔角膜后,孔隙内新生组织中胶原的成分及分布动态变化.方法:制备兔角膜碱烧伤模型后,将软性一体式PHEMA人工角膜材料植入,分别于8周,16周和22周后取裙边组织进行苦味... 白华 郭惠玲 王丽强 黄一飞小分子化合物J2缓释剂型药代动力学及药效学的实验研究 目的:研究和比较小分子化合物J2两种缓释剂型-海藻酸钠微球(Sodium alginate microspheres,SAM)及纳米混悬液(nano-suspension,NS)在体外释放情况和体内眼部药代动力学行为,观... 郭惠玲关键词:海藻酸钠微球 角膜移植 排斥反应 文献传递 不同剂量四氧化二氮对大鼠多焦视网膜电图的影响 被引量:1 2008年 目的研究大鼠在不同剂量的航天器推进剂四氧化二氮(N2O4)染毒后的多焦视网膜电图(multifocal elec-troretinogram,mfERG)改变,从而为航天试验事故的中毒防治工作提供客观依据。方法正常雄性Wistar大鼠,按不同的剂量,在相同的时刻将大鼠用不同剂量的N2O4溶液进行腹腔注射染毒,共分三组:实验1组(n=10),用7.5mgN2O4染毒;实验2组(n=8),用15mgN2O4染毒;对照组(n=6),用生理盐水行腹腔注射。在晚上固定的时间进行苯巴比妥钠溶液腹腔注射麻醉及多焦视网膜电图检查。用Microsoft Excel自带的统计软件对数据进行分析。结果7.5mg染毒后1h组及15mg染毒后1h组的大鼠与正常大鼠的mfERG的总和波及各环b波的潜伏期的差异具有显著性;各组染毒大鼠与正常大鼠mfERG的总和波及各环b波的波幅值的差异均无显著性。7.5mg组与15mg组之间的mfERG的总和波及各环b波的潜伏期的差异具有显著性;而两组之间波幅值的差异无显著性。结论N2O4能够导致大鼠多焦视网膜电图发生显著改变,而其对大鼠多焦视网膜电图潜伏期的影响更为明显。本研究为航天试验事故中N2O4中毒引起的视网膜功能损害的防治及进一步研究提供了客观的依据。 仇长宇 胡莲娜 李建中 李志生 郭惠玲 赵宏伟 麻南关键词:多焦视网膜电图 四氧化二氮