陆坚峰
- 作品数：9 被引量：21H指数：2
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：中国科学院重点实验室基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 噬菌体抗体
- 1993年
- 1990年英国剑桥大学John McCafferty等介绍一种表达于噬菌体表面,能通过相应抗原而快速、特异筛选的抗体质粒的基因工程新方法;先从供体细胞如脾或外周血淋巴细胞中分离纯化抗体可变区(V区)基因,克隆到丝状噬菌体(fdCAT_1)壳蛋白3的N端,由此构建的以(Gly_4-Ser)_3为Linker的单链抗体(V_HL_H)融合表达在每个丝状噬菌体的端点,这种表达在噬菌体壳蛋白上的抗体称之谓噬菌体抗体(phage antibodies,pAb)(图1)。它具有一般抗体的特异性结合能力,可以吸附在抗原亲和层析柱上。现今已有成套试剂盒出售,仅8天即可完成pAb构建。
- 夏明明陆坚峰
- 关键词：噬菌体抗体
- 重组极端耐热α－淀粉酶的复性与纯化方法
- 本发明公开了一种嗜热α－淀粉酶的制备方法，包括：用去垢剂溶液溶解嗜热α－淀粉酶的包涵体，从而获得含嗜热α－淀粉酶的溶液；和从所获得的溶液中分离出所述的嗜热α－淀粉酶。本发明的方法获得的嗜热α－淀粉酶具有天然蛋白一致的酶活...
- 张毅王丽萨陆坚峰杨胜利
- 文献传递
- 共表达极端菌伴侣蛋白prefoldin提高P450 BM3突变体催化效率（英文）
- 2017年
- P450 BM3来源于巨大芽孢杆菌,其突变体(A74G、F87V、L188Q、D168H)能够在大肠杆菌细胞内催化吲哚合成靛蓝.然而在常规的培养条件下(37℃,250 r/min),大肠杆菌细胞内靛蓝的生物转化量极低.本文将极端嗜热古菌Pyrococcus furiosus的分子伴侣蛋白与P450 BM3突变体在大肠杆菌进行共表达,以研究分子伴侣蛋白是否能够提高靛蓝的生物转化量.实验结果表明,极端嗜热古菌的分子伴侣蛋白prefoldin能够显著提高靛蓝的产量.同时,实验结果发现prefoldin能够明显提高大肠杆菌细胞内的NADPH/NADP^+比率.鉴于NADPH是参与靛蓝生物转化过程的重要因素,靛蓝生物转化量的显著增加可能与该比率的提高有关.
- 彭帅英褚仲梅陆坚峰陆坚峰王永红杨胜利李东晓
- 关键词：细胞色素P450靛蓝PREFOLDINPYROCOCCUS
- 一种制备S-腺苷甲硫氨酸的方法
- 本发明涉及一种制备S-腺苷甲硫氨酸的方法，通过将pet8基因转入S-腺苷甲硫氨酸生产菌株，显著地促进S-腺苷甲硫氨酸生产菌株分泌表达S-腺苷甲硫氨酸。并且，将S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因与pet8基因共转S-腺苷甲硫氨酸生...
- 张毅张允斌陆坚峰杨胜利
- 文献传递
- 抗菌肽Magainin II单克隆抗体的制备及应用被引量：2
- 1999年
- 本文采用硝酸纤维素膜脾内埋植免疫， 利用淋巴细胞杂交瘤技术， 首次制备了抗菌肽ｍａｇａｉｎｉｎ ＩＩ的单克隆抗体（ｍＡｂ）， 获得４ 株稳定分泌抗ｍａｇａｉｎｉｎＩＩｍＡｂ 的杂交瘤细胞株。利用该ｍＡｂ 对提取的ｍａｇａｉｎｉｎ ＩＩ进行竞争性ＥＬＩＳＡ 和免疫组化分析， 均获得较满意的效果。
- 胡泰山魏万贵陆坚峰刘振义陈登鸿屈贤铭杨胜利
- 关键词：MAGAININ单克隆抗体免疫组织化学
- 重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a在大肠杆菌中的表达和纯化被引量：8
- 2002年
- 为了大量制备重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a(rETIa) ,对构建的基因工程菌株E .coliBL2 1(DE3)pET2 2b mETIa进行了表达条件的优化 .用摇瓶培养 ,rETIa蛋白占菌体总蛋白 4 0 %以上 .经破碎菌体 洗涤包涵体 溶解包涵体 复性初步纯化后 ,再经二步柱层析纯化获得电泳纯的rETIa蛋白 .测定了rETIa对胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、组织型纤溶酶原激活因子缺失突变体 (NTA)的抑制活性 .
- 王新陈海旭陆坚峰张毅屈贤铭杨胜利
- 关键词：大肠杆菌纯化
- 重组极端耐热α-淀粉酶的复性与纯化方法
- 本发明公开了一种嗜热α-淀粉酶的制备方法，包括：用去垢剂溶液溶解嗜热α-淀粉酶的包涵体，从而获得含嗜热α-淀粉酶的溶液；和从所获得的溶液中分离出所述的嗜热α-淀粉酶。本发明的方法获得的嗜热α-淀粉酶具有天然蛋白一致的酶活...
- 张毅王丽萨陆坚峰杨胜利
- 文献传递
- 一种制备S-腺苷甲硫氨酸的方法
- 本发明涉及一种制备S-腺苷甲硫氨酸的方法，通过将pet8基因转入S-腺苷甲硫氨酸生产菌株，显著地促进S-腺苷甲硫氨酸生产菌株分泌表达S-腺苷甲硫氨酸。并且，将S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因与pet8基因共转S-腺苷甲硫氨酸生...
- 张毅张允斌陆坚峰杨胜利
- 文献传递
