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细粒棘球绦虫(中国大陆株)谷胱甘肽s-转移酶重组蛋白(rEgGST)的免疫保护性研究被引量：5: 2011年; 目的应用细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)诊断抗原GST重组蛋白进行动物免疫,探讨GST免疫保护性及其作为候选疫苗的潜在价值。方法 ICR小鼠随机分为蛋白免疫组和对照组,每隔2周皮下免疫1次,在第3次免疫后4周,用Eg原头蚴进行攻击感染,感染后20周剖杀小鼠,检获棘球蚴包囊,计算免疫保护力,并用ELISA法测定血清中IgG及其亚型和IgE水平。结果与佐剂对照组比较,蛋白免疫组小鼠的免疫保护力为89.39%;与免疫前比较,免疫后和攻击感染后蛋白免疫组小鼠血清IgG及其亚型和IgE均有不同成程度的升高(P<0.05)。结论 rEgGST能诱导小鼠产生部分免疫保护力,表明rEgGST是具有发展前途的抗包虫病候选疫苗。; 高鹏雄英杜娟李居怡王娅娜李宗吉赵巍; 关键词：细粒棘球蚴谷胱甘肽S-转移酶免疫保护力

细粒棘球蚴谷胱甘肽s-转移酶免疫保护力观察及其免疫机制的研究: 目的:在已克隆并成功构建细粒棘球蚴（Echinococcus granulosus,Eg）重组原核表达质粒pET-28a/GST的基础上，表达并纯化出重组蛋白Eg.GST，进行动物免疫保护力实验及免疫机制研究，以鉴定其疫...; 雄英; 关键词：细粒棘球蚴免疫保护力免疫机制

细粒棘球蚴中国大陆株铁蛋白生物信息学的初步分析及其结构和功能预测被引量：1: 2010年; 目的应用生物信息学分析软件预测细粒棘球蚴中国大陆株铁蛋白(Eg.ferritin)氨基酸序列的结构与功能。方法利用DNAman、NCBI/BLAST公共数据库对目的基因的同源性进行比较分析。应用DNAstar、Bi-osun等生物分析软件对铁蛋白的二级结构、抗原表位进行预测分析,应用SWISSMODEL对蛋白的三维结构进行模拟。结果检索Eg.ferritin氨基酸序列在其功能区的130AA内同源性为97.7%。不同生物间的同源性平均达40.79%。生物软件预测:Eg.ferritin的分子量约16.7 kD,含非极性氨基酸68个,预测其抗原表位肽段为7N-12E,36H-43V,55S-62H,69Q-76R,82A-89E,102I-107E,117A-124S,129L-136T。结论 Eg.ferritin的结构和功能及其抗原表位的预测对选取有价值的抗原肽段提供了依据。; 雄英王娅娜李宗吉孙俊峰棘怀庆赵巍; 关键词：细粒棘球蚴中国大陆株铁蛋白生物信息学

细粒棘球蚴中国大陆株谷胱甘肽s-转移酶结构与功能的生物信息学分析被引量：1: 2009年; 目的应用生物信息学分析软件预测细粒棘球蚴中国大陆株谷胱甘肽s-转移酶(EgGST)氨基酸序列的结构与功能。方法应用DNAStar、NCBI/BLAST、Biosun、SWISS-MODEL等生物信息学软件分析EgGST的基因序列,推算出其编码的氨基酸序列与其他物种的同源序列,进行多序列同源比对,构建分子进化树;预测二级结构、拓扑结构;同源模建预测三级结构;预测主要抗原表位等。结果经RT-PCR扩增得到的660bpEgGSTDNA片段,经DNAman分析软件同源性比较发现,与GenBank中检索的EgGST基因序列同源性为99%;EgGST与不同生物间的同源性平均达45%;该基因编码的蛋白分子量为25492.53Da,有219个氨基酸,等电点为7.532,有31个酸性氨基酸,32个碱性氨基酸,52个极性氨基酸和7个非极性氨基酸;有8个抗原表位肽段15G-29R,30E-39C,40S-68R,69G-82Q,83I-90M,91D-120A,121P-133Q,134L-144N。结论EgGST可能是免疫诊断、药物作用及疫苗潜在的靶分子。; 棘怀庆孙俊锋雄英李宗吉王娅娜赵巍; 关键词：细粒棘球蚴中国大陆株谷胱甘肽S-转移酶生物信息学

细粒棘球绦虫(中国大陆株)14-3-3重组蛋白的免疫保护力被引量：6: 2012年; 目的探讨细粒棘球蚴Eg14-3-3重组蛋白的免疫保护性及其伴随的免疫反应。方法 ICR小鼠随机分为rEg14-3-3蛋白免疫组和PBS佐剂对照组,每隔2周背部皮下免疫1次,连续免疫3次。在第3次免疫后6周,用细粒棘球蚴活的原头蚴进行攻击感染,感染后24周杀鼠取脾,分离培养脾细胞,MTT检测淋巴细胞增殖率,用试剂盒检测脾细胞培养上清液的IL-2、IFN-γ、IL-10和IL-4水平,同时检获棘球蚴包囊数并计算减囊率,用ELISA法测定血清中IgG及其亚型和IgE水平。结果与佐剂对照组比较,rEg14-3-3蛋白免疫组小鼠的免疫保护力为84.47%,rEg14-3-3蛋白免疫组小鼠血清IgG、IgG1、IgG2a抗体水平高于对照组(P<0.05);IgE略低,但两组间差异无统计学意义;淋巴细胞增殖实验结果显示rEg14-3-3免疫组小鼠脾淋巴细胞特异抗原刺激后增殖显著,免疫组淋巴细胞培养上清中IFN-γ、IL-2分泌水平显著高于对照组,而IL-4、IL-10在两组间差异无统计学意义。结论 rEg14-3-3蛋白能诱导小鼠产生高水平的免疫保护力,是潜在的疫苗候选抗原分子。; 李宗吉雄英孙俊峰赵巍; 关键词：细粒棘球蚴免疫保护力 IL-4 IGE

细粒棘球蚴重组EgP-29诱导免疫小鼠脾细胞增殖及细胞因子水平的变化被引量：3: 2009年; 目的探讨细粒棘球蚴重组抗原(rEgP-29)接种小鼠后的免疫保护机制。方法ICR小鼠随机分为免疫组和对照组,采用rEgP-29免疫、Eg原头蚴攻击感染小鼠后20周,以MTT法检测经刀豆蛋白(ConA)和rEgP-29刺激后T淋巴细胞增殖水平,ELISA法检测体外脾细胞诱生的IL-2、IL-4和IFN-γ水平。结果MTT法检测证实rEgP-29免疫组小鼠脾淋巴细胞增殖水平明显高于对照组(P<0.05);ELISA法检测表明,免疫组小鼠经ConA或rEgP-29诱生的IL-2、IFN-γ水平与对照组相比显著增加(P<0.05),而IL-4水平无明显变化。结论rEgP-29可能诱导Th1型免疫应答为主,对抗Eg原头蚴攻击感染。; 罗永云李昭宇师志云棘怀庆雄英孙俊峰赵巍; 关键词：细粒棘球蚴细胞因子

生物信息学方法初步筛选细粒棘球蚴防治靶位蛋白: 2010年; 目的用生物信息学方法从世界权威数据库检索筛选能用于诊断或治疗的细粒棘球蚴靶蛋白。方法基于其他相近物种的寄生虫及其靶蛋白研究,在美国生物技术信息中心(NCBI)连接的SwissProt,PIR,PRF,PDB等数据库进行有价值靶蛋白及其同源蛋白的筛选,最终筛选出在其他寄生虫目前用于靶蛋白研究的蛋白或多肽,通过讨论分析,找出能作为细粒棘球蚴诊断或药物疫苗靶位的蛋白质和多肽。结果通过检索扁形动物门的蛋白,筛选出目前该门类下所有物种已经成熟应用或正在研究的有价值的候选蛋白:共得到154条包括32种蛋白。结论通过高通量快速筛选法,找出32种可能用于包虫病诊断和防治的靶位蛋白,为今后蛋白质组学高通量筛选细粒棘球蚴靶标分子提供理论依据和参考。; 孙俊锋棘怀庆雄英李宗吉王娅娜赵巍; 关键词：细粒棘球蚴生物信息学扁形动物门高通量筛选

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雄英