马洁
- 作品数：12 被引量：10H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程化学工程更多>>
- H_2S对ATP诱导小胶质细胞活化的影响
- 2017年
- 目的:研究硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)对三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)诱导大鼠小胶质细胞炎性因子释放的调节,并探讨小胶质细胞条件培养基对神经元样细胞凋亡的影响。方法:选定的大鼠小胶质细胞随机分4组:(1)正常对照组:常规培养;(2)ATP组:细胞接种24 h后用ATP处理;(3)Na HS(sodium hydrosulfide,H_2S供体)+ATP组:ATP处理前用Na HS预孵育30 min,且Na HS始终存在于反应体系中;(4)KN-62(异喹啉衍生物,嘌呤受体拮抗剂)+ATP组:ATP处理前用KN-62预孵育30 min。用ELISA检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-6的变化,用Western Blot检测各组丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)P38和JNK表达水平。用人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)研究条件培养基对神经元的影响,其方法与上述大鼠小胶质细胞处理相同。用倒置显微镜观察SH-SY5Y细胞形态变化及凋亡情况,用MTT法检测各组细胞活力。结果:当ATP浓度3 mmol/L时,大鼠小胶质细胞释放TNF-α和IL-6水平增加(P<0.05),同时上调大鼠小胶质细胞p-P38、p-JNK蛋白表达水平(P<0.05)。当ATP浓度5 mmol/L时,小胶质细胞活化后的条件培养基可以使SH-SY5Y细胞形态发生改变,其细胞活力降低(P<0.05)。ATP引起的上述变化可以通过Na HS预处理而逆转(P<0.05),其作用与P2X7R阻断剂KN-62相类似。结论:H_2S可下调被ATP诱导的p-P38和pJNK MAPK蛋白表达,减少TNF-α和IL-6等炎性因子的释放,从而对神经元产生保护作用。
- 王娇娇马洁马洁李超堃李璐宋景贵
- 关键词：三磷酸腺苷丝裂原活化蛋白激酶
- ATP处理导致PC12细胞通透性变化及NaHS的干预作用被引量：1
- 2018年
- 目的:观察NaHS(H_2S供体)对ATP(三磷酸腺苷)诱导的PC12细胞存活率及膜通透性变化的影响,探讨H_2S对抗ATP致伤作用的可能机制。方法:高分化PC12细胞置于含有高浓度ATP的培养基中3 h制备细胞损伤模型。在ATP处理前30 min,把NaHS或CBX(生胃酮,Pannxin-1通道阻滞剂)加入培养基中,作为预处理。用CCK-8检测细胞存活率,Fura-2/AM荧光染料检测细胞[Ca^(2+)]_i,YO-PRO-1或Lucifer Yellow(荧光黄)荧光染料检测RFU(胞内相对荧光单位),研究NaHS干预后细胞存活率和膜通透性的变化。结果:ATP(3、5mmol/L)处理使PC12细胞存活显著降低,NaHS(200μmol/L)和CBX(10μmol/L)预处理均可显著拮抗ATP(3 mmol/L)诱导的细胞存活率下降。ATP(3、5 mmol/L)可使PC12细胞内[Ca^(2+)]_i明显增加,而NaHS(200μmol/L)和CBX(10μmol/L)预处理可使ATP(3 mmol/L)诱导的胞内[Ca^(2+)]_i的增幅明显降低。ATP(3、5mmol/L)使PC12细胞对YO-PRO-1和Lucifer Yellow通透明显增加,而NaHS(200μmol/L)和CBX(10μmol/L)预处理可显著阻遏ATP诱导的膜通透性增加。结论:Pannxin-1蛋白在ATP诱导PC12细胞膜孔形成中有重要作用,干预膜孔形成可能是NaHS拮抗ATP损伤作用的机制之一。
- 沈慧马洁王国红王璐李新娟张利彬魏琳郁李超堃赵红岗李东亮
- 关键词：ATP硫化氢PC12细胞
- H2S对ATP引起的PC12细胞通透性改变的影响
- 沈慧尹雅玲马洁张庆乐魏林郁李超堃李东亮
- 硫化氢在胞外高浓度ATP诱导的PC12损伤中的作用观察
- 目的 观察内源性和外源性H2S在胞外高浓度三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)诱导的PC12细胞损伤中的作用.方法 采用分光光度法测定ATP损伤PC12细胞培养液中H2S的含量, 采用wes...
- 张勇尹雅玲沈慧马洁卢娜李新娟赵红岗李东亮
- 外源性ATP诱导PC12细胞的膜孔形成被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨外源性三磷酸腺苷(ATP)诱导PC12细胞的膜孔形成及关键分子靶标。方法:用不同浓度的ATP处理培养的PC12细胞,采用倒置相差显微镜观察形态,CCK-8法检测细胞存活率,YO-PRO-1染色检测细胞膜通透性,Western blotting和real-time PCR检测P2X7受体和pannexin1(Panx1)表达的变化。结果:(1)ATP(1mmol/L、3 mmol/L、5 mmol/L)作用3 h,可见随着ATP浓度升高,PC12细胞变圆,脱壁细胞增多;当ATP浓度为3mmol/L或5 mmol/L时,PC12细胞活力较对照组显著下降(P<0.05)。(2)不同浓度的ATP(0、1、3、5 mmol/L)作用1 h,PC12细胞摄入YO-PRO-1的荧光强度随着浓度增加而增加;同一浓度的ATP作用不同时间(15、30、60min),随着时间的增加,胞内的荧光强度也增加。(3)亮蓝G(P2X7受体的抑制剂)预处理可明显拮抗ATP引起的细胞活力下降和胞内荧光强度增强(P<0.05),而生胃酮(Panx1的抑制剂)预处理不改变细胞活力和胞内的荧光强度(P>0.05)。(4)ATP作用3 h使PC12细胞P2X7受体的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),而Panx1mRNA和蛋白表达变化不大(P>0.05)。结论:胞外高浓度ATP引起PC12细胞的膜孔形成可能主要与P2X7受体的表达和激活有关。
- 沈慧尹雅玲李超堃赵红岗马洁李东亮
- 关键词：腺苷三磷酸PC12细胞
- H_2S抑制ATP诱导的大鼠小胶质细胞活化及IL-1β的释放被引量：3
- 2016年
- 目的:观察硫化氢(H_2S)供体硫氢化钠(Na HS)对三磷酸腺苷(ATP)损伤的大鼠小胶质细胞通透性、胞内Ca^(2+)浓度([Ca^(2+)]_i)及IL-1β释放的影响,探讨H_2S对ATP-P2X嘌呤信号通路的作用及其神经保护的分子机制。方法:取对数期形态结构及生长分化良好的大鼠小胶质细胞用于实验。Fura-2/AM荧光染料检测各组[Ca^(2+)]_i,细胞内YO-PRO-1荧光强度检测以反映膜的通透性,ELISA检测ATP-细菌脂多糖(LPS)激活的大鼠小胶质细胞IL-1β的释放水平。结果:随着ATP浓度的增加,大鼠小胶质细胞内YO-PRO-1的荧光强度显著增加,而给予Na HS预处理后细胞膜通透性明显降低,对YO-PRO-1的摄取明显减少(P<0.05),胞内荧光强度明显减弱(P<0.05)。ATP处理大鼠小胶质细胞引起[Ca^(2+)]_i迅速升高后缓慢下降形成持续时间较长的平台期。Na HS预处理虽不能改变[Ca^(2+)]_i的峰值,但可抑制平台期的形成(P<0.05)。ATP与LPS联合作用可促进大鼠小胶质细胞IL-1β的生成和分泌,而Na HS预处理可明显逆转这一效应(P<0.05)。结论:Na HS可降低ATP诱导的大鼠小胶质细胞膜通透性、Ca^(2+)内流和IL-1β释放,抑制该细胞的激活,提示嘌呤信号通路可能介导H_2S的细胞保护作用。
- 马洁王娇娇王璐李新娟王国红赵红岗李东亮
- 关键词：三磷酸腺苷小胶质细胞
- NaHS对ATP诱导大鼠小胶质细胞P2X受体表达的影响
- 2017年
- 目的:观察硫化氢(H_2S)供体硫氢化钠(Na HS)对ATP致伤的大鼠小胶质细胞细胞活力、细胞膜通透性及P2X_7受体表达的影响。方法:实验取对数期形态结构及生长分化良好的大鼠小胶质细胞,随机分4组,每组设3个复孔。(1)正常对照组:常规培养,不进行ATP处理。(2)ATP组:接种细胞24 h后ATP处理。(3)NaHS+ATP组:Na HS预先孵育30 min后再用ATP处理,并且Na HS始终存在于反应体系中。(4)KN-62(P2X_7受体阻断剂)+ATP组:KN-62预先孵育30 min,其余同Na HS+ATP组。MTT检测各组细胞活力,荧光染料YO-PRO-1检测各组相对荧光单位(RFU)反映膜的通透性,Western blot检测各组P2X_7受体表达水平。结果:(1)与对照组相比,不同浓度的ATP(1、3、5、10 mmol/L)作用3 h均可明显降低大鼠小胶质细胞活力,Na HS(200μmol/L)干预后大鼠小胶质细胞活力较ATP组明显增加(P<0.01),但Na HS达400μmol/L浓度时,其保护作用未进一步增加。(2)随着ATP浓度的增加,大鼠小胶质细胞内YO-PRO-1的荧光强度显著增加,Na HS预处理可明显减少细胞对YO-PRO-1的摄取(P<0.01)。(3)ATP(3 mmol/L)能上调P2X_7受体蛋白表达水平,而Na HS(200μmol/L)预孵育则可明显抑制ATP引起的P2X_7受体蛋白表达的上调(P<0.01)。结论:Na HS可减少ATP致伤的大鼠小胶质细胞的P2X_7受体表达、降低通透性、增加细胞活力,提示调控P2X_7受体的表达和功能可能是H_2S神经保护作用的重要环节。
- 马洁郭康吕林亚李新娟王璐魏林郁赵红岗李东亮
- 关键词：三磷酸腺苷
- 硫化氢保护被ATP损伤的PC12细胞被引量：5
- 2015年
- 目的:观察硫化氢的供体硫氢化钠(Na HS)对三磷酸腺苷(ATP)诱导的PC12细胞活力、胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)及膜通透性的变化,探讨硫化氢神经保护作用的嘌呤信号机制。方法:将对数生长期高分化的PC12细胞,随机分为4组,分别为(1)正常对照组:常规培养,不进行ATP处理;(2)ATP组:接种细胞24 h后ATP处理;(3)Na HS+ATP组:Na HS预先孵育30 min后再用ATP处理,并且Na HS始终存在于反应体系中;(4)KN-62(P2X7受体阻断剂)+ATP组:KN-62预先孵育30 min,其余同Na HS+ATP组。MTT检测各组细胞活力,Fura-2/AM荧光染料检测各组[Ca2+]i,检测荧光染料YO-PRO-1的相对荧光单位以反映膜的通透性。结果:(1)0.3mmol/L ATP对细胞活力无影响,但1、3、5、10 mmol/L ATP则呈浓度依赖式明显降低细胞活力,200μmol/L Na HS干预可明显逆转ATP引起的细胞活力下降(P<0.05),而800μmol/L Na HS预处理则加剧ATP对PC12细胞的损伤(P<0.05)。(2)ATP处理PC12细胞会引起[Ca2+]i迅速升高并且呈浓度依赖性,Na HS预处理能对抗ATP引起的[Ca2+]i升高(P<0.05)。(3)随着ATP浓度的增加及作用时间的延长,PC12细胞内YO-PRO-1的荧光强度显著增加,Na HS预处理可明显减少细胞对YO-PRO-1的摄取(P<0.05)。结论:硫化氢可保护ATP损伤的PC12细胞,可能与其抑制[Ca2+]i升高和YO-PRO-1荧光增强有关。
- 马洁沈慧王璐宋景贵韩亚州李东亮
- 关键词：三磷酸腺苷硫化氢PC12细胞
- 一种脾脏终隔细胞原代分离培养方法
- 本发明属于动物细胞培养技术领域，涉及一种脾脏终隔细胞原代分离培养方法。步骤如下：脾脏样品的预处理；酶解样品，获得终隔细胞悬液；终隔细胞悬液的细胞接种，制备原代细胞；原代细胞的传代扩大培养，制备传代细胞；固定传代细胞，完成...
- 常玉巧郭康马洁郭志坤李辞霞付海鹏郭永龙
- 文献传递
- 一种具有恒温控制效果且高效散热的电脑主机
- 本实用新型公开了一种具有恒温控制效果且高效散热的电脑主机，包括主机外壳，所述主机外壳的两侧均设置有侧板；所述侧板上设置有散热孔；所述主机外壳的内壁上固定有温度感应器；所述主机外壳的内底面上固定有温度传感器、恒温控制器和通...
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- 文献传递
