高宏波
- 作品数：18 被引量：30H指数：3
- 供职机构：北京林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：生物学文化科学医药卫生更多>>
- “植物学”实验课互动合班教学模式的探索
- 2014年
- 从"植物学"实验课互动合班教学模式入手,探讨互动合班教学环境下"植物学"实验课"双主"互动教学模式的效果及可行性方案,为改革传统单班授课模式提供试验依据。互动合班教学模式增进了学生参与度,充分体现了"双主"思想,并增加了课堂乐趣,达到师生随堂交流与共鸣的效果,提高了教师辅导实验操作的效率,减轻了教师的负担,实现了同时与多人近距离教学的目的。
- 高述民胡青范莉娟王岩岩李晓娟刘平丽高宏波刘頔郑彩霞
- 关键词：互动教学植物学实验合班授课
- 一种快速鉴定植物叶绿体完整性的方法
- 本发明属于生物技术领域，公开了一种快速鉴定植物叶绿体完整性的方法，所述方法包括如下步骤：1)提取植物细胞中的叶绿体；2)分离破碎的植物细胞中的叶绿体；3)将需要鉴定的叶绿体组分转移，离心收集，重悬后得到叶绿体悬液；4)将...
- 高宏波安进杰苗昕王璐璐李旭刘小敏
- 文献传递
- 叶绿体DNA的发现历程被引量：1
- 2012年
- 叶绿体是半自主性的细胞器,含有自己的DNA和遗传信息表达系统,可自身转录和翻译部分必需的蛋白。20世纪60年代叶绿体DNA的发现为内共生假说提供了有力的证据。回顾了叶绿体DNA的发现历史,介绍了科学家们运用遗传杂交、组织化学染色、电子显微镜观察以及生物化学等各种生物学实验手段证明叶绿体DNA存在的过程。
- 潘登高宏波
- 关键词：叶绿体叶绿体DNA
- 高等林业院校“植物发育生物学”研究生课程教学的改革探索被引量：9
- 2017年
- "植物发育生物学"是植物学科研究生的学位课程。针对课程教学中存在的缺少适合的教材、教学内容设置不科学、课程考核方式单一等问题,从教材、教学内容及考核方式3方面探讨了"植物发育生物学"课程优化措施:首先应选择适合林业院校的教材;其次,要设置科学合理的教学内容;第三,应改进考核方式。经过课程优化,提高了学生对知识的运用能力,培养了学生的综合素质,促进了学生学习的积极性。
- 刘小敏高述民高宏波
- 关键词：林业院校植物发育生物学课程优化
- 拟南芥叶绿体分裂突变体x17-3和pd50的基因鉴定与分析
- 2018年
- 【目的】叶绿体起源于内共生的蓝细菌,它通过与细菌类似的分裂方式进行增殖以维持遗传稳定。叶绿体分裂需要起源于原核和真核细胞的蛋白高度协调。拟南芥是研究叶绿体分裂的模式植物。在过去的20年中,人们对拟南芥叶绿体分裂蛋白复合体进行了初步的研究。然而,CRL基因在叶绿体分裂中的功能还不清楚。【方法】本研究通过突变体筛选和图位克隆鉴定得到2个新的crl突变体,分别为x17-3和pd50。通过显微观察和分子生物学方法分析了x17-3和pd50中叶绿体分裂表型、CRL基因剪接方式和mRNA含量以及叶绿素含量。最后通过转化互补和RNA干扰(RNAi)技术进一步确认了基因功能。【结果】x17-3和pd50的叶绿体形态与野生型相比有较大差异,表现为叶绿体体积增大,细胞中叶绿体数量减少。x17-3叶绿体数量为野生型的40%,而pd50叶绿体减少到只有1~4个,植物生长也受到明显抑制。通过粗定位及测序分析发现x17-3和pd50的CRL基因存在突变,突变位点在内含子并且影响mRNA剪接,最终导致阅读框移码突变。通过实时荧光定量PCR分析发现,pd50中CRL mRNA含量比野生型和x17-3明显降低。遗传互补实验进一步验证了x17-3和pd50中叶绿体分裂和植物生长抑制表型是CRL基因突变导致的。应用RNAi技术抑制CRL基因表达也能产生明显的叶绿体分裂异常表型。此外,pd50和x17-3的叶绿素含量比野生型明显降低。【结论】本项工作为进一步揭示CRL基因的功能提供新的研究材料和实验依据。
- 李劲宇高原张琴刘小敏高宏波
- 关键词：叶绿体分裂CRLRNAI叶绿素
- 一种基于组织破碎的叶绿体蛋白免疫荧光染色的方法
- 本发明属于生物技术领域，公开了一种基于组织破碎的叶绿体蛋白免疫荧光染色的方法，所述方法包括如下步骤：1)植物叶片组织的破碎；2)对已经破碎的组织做免疫荧光染色；3)用EDTA·Na<Sub>2</Sub>处理使已经做完免...
- 高宏波王璐璐唐明冬
- 叶绿体分裂突变体cpd4中突变基因ARC5的鉴定与分析被引量：2
- 2013年
- cpd4是一个以Col为背景的拟南芥叶绿体分裂突变体,其突变表型与以Ler为背景的突变体arc5-1表型相似,即叶绿体数量明显减少,体积明显增大且形状常呈哑铃型。该突变未能对叶绿素含量造成明显影响。遗传分析显示其突变表型受隐性单基因控制。通过图位克隆的方法确定其突变性状是由ARC5基因突变引起的。该突变影响了ARC5基因mRNA的正常剪切,对mRNA的稳定性也造成严重影响。该工作为进一步研究ARC5在叶绿体分裂中的作用提供了有用的材料和信息。
- 沈鑫曌刘含刘晓庆袁光孝高岳芳高宏波
- 关键词：突变基因拟南芥
- 叶绿体分裂蛋白PDV1胞质侧结构域可溶性表达条件的研究及纯化被引量：2
- 2012年
- 目的:探索叶绿体分裂蛋白PLASTID DIVISION1(PDV1)胞质侧结构域的高效可溶性表达条件,并得到高纯度目的蛋白。方法:通过改变表达载体种类、基因片段大小、诱导剂浓度、诱导温度的方法,以及运用分子伴侣的协助,实现目的蛋白高效可溶性表达。通过镍柱亲和层析和分子筛层析纯化目的蛋白。结果:(1)带His标签的目的蛋白大部分以包涵体形式存在于沉淀中;(2)截掉疏水区域并与增溶标签GST或NusA融合表达,再通过改变诱导表达条件,可以实现PDV1胞质侧结构域的可溶性表达;(3)比较目的蛋白可溶性表达量,选择高效可溶性表达体系,并在该条件下纯化得到高纯度目的蛋白。结论:PDV1胞质侧结构域的高效可溶性表达及纯化,为进一步研究该蛋白的结构及其在叶绿体分裂过程中的作用奠定了一定基础。
- 韩翠晓李锋严孝金冯舵李倩倩高宏波高伟
- 关键词：叶绿体分裂可溶性表达蛋白纯化
- 拟南芥叶绿体分裂突变体pd137的基因鉴定与分析被引量：2
- 2014年
- pd137是经甲基磺酸乙脂(ethyl methane sulphonate,EMS)诱变并通过筛选得到的一个拟南芥叶绿体分裂突变体。该突变体的叶绿体表型与野生型相比有很大差异:叶绿体面积显著增大,细胞中叶绿体数量明显减少。遗传分析显示pd137的突变表型受隐性单基因控制。本研究通过遗传作图将该突变基因粗定位于拟南芥2号染色体的分子标记CH2-13.70和CH2-16.0区间内。该区间内已知的与叶绿体分裂相关的基因只有FtsZ2-1。对FtsZ2-1基因的测序结果显示pd137突变体的FtsZ2-1基因第505位碱基发生了无义突变,使蛋白质翻译提前终止。该突变还严重影响了FtsZ2-1基因的mRNA水平。转基因互补实验进一步验证了该突变体表型是由于FtsZ2-1基因突变引起。本项工作为研究叶绿体分裂的机制提供了新材料和一些有用的线索。
- 刘晓庆潘登贾宁沈鑫曌高宏波
- 关键词：拟南芥叶绿体分裂图位克隆
- 拟南芥角质层发育突变体中WBC11基因的分析与鉴定被引量：1
- 2014年
- 从拟南芥(Arabidopsis thaliana L.)突变体库中筛选到一个发育突变体ku7fy1,其突变表型为叶片狭长,生长缓慢。该研究利用图位克隆技术和候选基因测序鉴定出ku7fy1角质层发育基因(white-brown complex11,WBC11)有一个点突变。对该突变体cDNA测序结果显示,WBC11基因的突变导致其第7个内含子在形成成熟mRNA时无法被正常剪切,使该突变体内WBC11的mRNA大量降解并在翻译时提前引入终止密码子。甲苯胺蓝染色实验显示,突变体叶片表面角质层有缺陷;遗传互补实验进一步证明,突变体ku7fy1中的突变基因是WBC11,ku7fy1表型是由WBC11突变造成的。
- 高原贾宁潘登高述民高宏波
- 关键词：拟南芥图位克隆
