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高建

作品数：25 被引量：89H指数：5
供职机构：中国医科大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金沈阳市科技攻关计划项目更多>>
相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>

合作作者

文献类型

  • 24篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 19篇医药卫生
  • 6篇生物学
  • 1篇自动化与计算...

主题

  • 14篇细胞
  • 6篇荧光
  • 4篇激光
  • 4篇激光共聚焦
  • 4篇共聚焦
  • 3篇蛋白
  • 3篇凋亡
  • 3篇胃癌
  • 3篇细胞肺癌
  • 3篇小细胞
  • 3篇小细胞肺癌
  • 3篇酶链反应
  • 3篇免疫
  • 3篇聚合酶
  • 3篇聚合酶链反应
  • 3篇合酶
  • 3篇非小细胞
  • 3篇非小细胞肺癌
  • 3篇肺癌
  • 3篇H2O2

机构

  • 25篇中国医科大学
  • 5篇中国医科大学...

作者

  • 25篇高建
  • 11篇崔泽实
  • 6篇周末
  • 5篇张四洋
  • 4篇李春艳
  • 4篇张莹
  • 4篇于淼
  • 3篇邱雪杉
  • 3篇卢瑶
  • 3篇姚璐
  • 2篇苗参
  • 2篇张辉
  • 2篇吴斌
  • 2篇殷波
  • 2篇汪薇
  • 2篇宋永胜
  • 2篇郗春艳
  • 2篇孔垂泽
  • 2篇单立平
  • 2篇赵蕾

传媒

  • 4篇中国医科大学...
  • 4篇解剖科学进展
  • 3篇中国医学装备
  • 2篇中国肺癌杂志
  • 1篇网络与信息
  • 1篇中国现代医学...
  • 1篇中国当代儿科...
  • 1篇中华病理学杂...
  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇临床泌尿外科...
  • 1篇中华实验外科...
  • 1篇上海医学
  • 1篇生殖与避孕
  • 1篇现代肿瘤医学
  • 1篇中国细胞生物...

年份

  • 1篇2018
  • 3篇2015
  • 2篇2014
  • 1篇2013
  • 1篇2012
  • 1篇2011
  • 1篇2010
  • 5篇2009
  • 2篇2008
  • 3篇2007
  • 3篇2006
  • 2篇2005
共 25 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
BAMBI在非小细胞肺癌细胞系中的分布及表达
2009年
目的观察BAMBI在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系中的表达分布情况,并探讨其表达与NSCLC病理分型及侵袭潜能之间的关系。方法利用免疫荧光技术检测人肺腺癌细胞系A549以及人肺巨细胞癌具有不同侵袭潜能的亚系BE1、LH7中BAMBI的分布,采用逆转录聚合酶链反应及Western印迹法检测3种细胞中BAMBI的mRNA及蛋白表达。结果BAMBImRNA在A549细胞系中的表达(0.574±0.035)显著低于BE1细胞系(0.731±0.051)及LH7细胞系(0.734±0.049,P值均<0.001),后两者间的差异无统计学意义(P=0.216)。A549细胞系中BAMBI蛋白相对含量(0.769±0.103)显著低于BE1细胞系(0.963±0.061)及LH7细胞系(0.957±0.048,P值均<0.001),后两者间的差异无统计学意义(P=0.096)。BAMBI在A549细胞膜上的染色强度较弱,且呈现颗粒状不均一性;在BE1、LH7细胞膜上的染色较强,连续且均匀一致。结论BAMBI在NSCLC中的表达定位于细胞膜上以及靠近细胞膜的细胞质中,其在肺巨细胞癌细胞中的表达高于肺腺癌细胞,且其表达高低可能与肺巨细胞癌细胞的侵袭潜能无关。
苗参高建赵蕾王辉崔泽实
关键词：细胞系非小细胞肺癌逆转录聚合酶链反应免疫荧光技术WESTERN印迹法
LY294002对糖尿病肾病大鼠肾组织MCP-1与Nephrin表达的影响被引量：1
2015年
目的研究经静脉注射PI3K抑制剂LY294002对糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)与肾小球足细胞跨膜蛋白(Nephrin)表达的影响。方法成年健康清洁级SD雄性大鼠30只,随机分为假手术组(10)、模型组组(10)和PI3K抑制剂(LY294002)处理组。参照Anderson's方法制作糖尿病肾病大鼠模型。采用Western blot方法检测3组大鼠肾组织MCP-1与Nephrin蛋白的表达,RT-PCR方法检测三组大鼠肾组织MCP-1 m RNA与Nephrin m RNA的表达。结果模型组肾组织MCP-1蛋白和m RNA的表达量显著高于假手术组(P<0.05),而LY294002处理组明显低于模型组(<0.05)。模型组肾组织Nephrin蛋白和m RNA的表达量显著低于假手术组(<0.05),而LY294002处理组显著高于模型组(<0.05)。结论 PI3K抑制剂LY294002能够下调糖尿病肾病大鼠肾组织MCP-1的表达,上调Nephrin的表达。
高建房磊吴瑕王猛杨健莉
关键词：糖尿病肾病LY294002
激光共聚焦显微镜观察小鼠卵母细胞及早期胚胎中微丝的分布被引量：1
2011年
目的:观察微丝在小鼠卵细胞及早期胚胎中的分布情况,为进一步明确微丝在受精卵发育中的作用机制打下基础。方法:采用免疫荧光化学法结合激光共聚焦显微技术对卵细胞的微丝分布进行观察。结果:在小鼠MII期卵母细胞中微丝分布于卵细胞的皮质区,集中在纺锤体处。在小鼠1-细胞期受精卵中微丝集中分布于卵细胞与极体的连接处。在2-细胞期受精卵中的微丝则集中分布在卵细胞的分裂沟处。用松弛素B(CB)解聚小鼠体内受精卵的微丝,细胞形态及分裂受到严重影响。结论:微丝在小鼠卵母细胞及早期胚胎中有着独特的分布,其可能参与多种功能。
武迪迪高建孟峻刘超周末冯晨于秉治
关键词：微丝小鼠卵母细胞免疫荧光技术
西咪替丁增强5-氟脲嘧啶对人胃癌细胞的生长抑制作用被引量：1
2010年
目的观察不同浓度的西咪替丁、5-氟脲嘧啶(5-Fu)单用或联合应用对人胃癌细胞MGC-803、BGC-823生长及凋亡的影响。方法用MTT法检测西咪替丁与5-Fu联合应用对胃癌细胞MGC-803、BGC-823存活率的影响;流式细胞仪检测西咪替丁与5-Fu联合应用对胃癌细胞凋亡率的影响。结果西咪替丁与5-Fu联合应用时,西咪替丁在无毒浓度(5～50μmol/L)即可显著增强低浓度5-Fu对胃癌细胞的生长抑制作用。同时还发现,西咪替丁能增强5-Fu诱导胃癌细胞凋亡。结论西咪替丁可提高人胃癌细胞MGC-803、BGC-823对化疗药物5-Fu的敏感性,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。
刘芙蓉张成宏高建李丰
关键词：西咪替丁5-氟脲嘧啶
医学实验室中离心机的应用与技术保障被引量：5
2015年
目的:规范医学实验室离心技术的应用与仪器维护。方法:正确选择与应用离心技术,掌握相对离心力(RCF)、S值及K值等常用离心参数的运用与计算方法,合理配置离心转头与离心容器,根据材质的理化耐受性选用和处理离心容器,制定基于风险控制的操作规范、监测、维护、保养以及生物安全等系列措施,建立实验室离心机技术保障。结果:通过规范医学实验室离心技术的应用,使实验室离心机的故障率降低,工作效率得到提升。结论:保障离心机正常使用,必须坚持从实验应用到工程维护的全技术流程管理。
周末姚璐高建崔泽实
关键词：离心机
流式细胞仪分选非染色S期CHO细胞有助于提高聚乙烯亚胺的转染效率被引量：1
2009年
目的利用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)分选获得非染色、同步化的中国仓鼠卵巢(Chinese hamsterovary,CHO)细胞,观察聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)在不同周期CHO细胞的瞬时转染和稳定转染效率。方法悬浮培养CHODG44细胞,应用流式细胞仪的光学参数-前向角和侧向角,在细胞主群中设置12个门,然后进行分选。分选出的各门内细胞经碘化丙啶(PI)染色进行细胞周期检测。以PEI为载体分别向含G0/G1、S、G2/M比例较高的细胞亚群和未经分选的细胞转染含绿荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,GFP)质粒,利用流式细胞仪检测瞬时转染、稳定转染效率。结果细胞DNA含量与侧向角相关,各细胞亚群G0/G1期细胞所占比例总体上随着侧向角的增大而减小,G2/M细胞所占比例随着侧向角的增大而增多。低侧向角的细胞亚群P2内G0/G1期细胞比例可达80.49%,中侧向角的细胞亚群P7内S期细胞比例可达61.14%,高侧向角的细胞亚群P13内G2/M期细胞比例可达49.88%。转染48h,GFP阳性细胞在G2/M期细胞比例较高的细胞亚群所占比例最高,但瞬时转染效率,S期细胞比例较高的细胞群大于G2/M期细胞比例较高的细胞群。转染2w,稳定转染效率仍为S期细胞比例较高的细胞亚群大于其它细胞亚群及未分选的混合细胞群。结论应用流式细胞仪的光学参数可以有效分选非诱导、无染色分别含有较高比例各周期时相的CHO细胞;PEI的转染效率与转染时细胞所处的细胞周期时相相关,且S期细胞亚群的瞬时和稳定转染效率均高于其它细胞周期亚群。
李春艳张莹薛晓霞于淼高建袁哲崔泽实
关键词：聚乙烯亚胺中国仓鼠卵巢细胞转染
应用Ca^(2+)荧光探针fluo-3和fluo-4测定H_2O_2诱导的A549细胞凋亡过程中的[Ca^(2+)]_i变化被引量：7
2014年
背景与目的肺癌是世界范围内常见的恶性肿瘤,Ca2+对于肿瘤细胞凋亡有重要的调控作用。实时监测肺癌细胞内Ca2+水平,有助于深入研究Ca2+介导肺癌细胞凋亡的分子机制。本研究旨在观察Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4在H2O2诱导的A549细胞凋亡过程中的应用,实时测定胞浆Ca2+浓度([Ca2+]i),探讨[Ca2+]i与细胞凋亡的关系,并比较两种Ca2+探针在荧光强度及[Ca2+]i测定值方面的差异。方法采用Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4负载细胞,1 h后用不同浓度的H2O2刺激细胞,激光扫描共聚焦显微镜实时测定选取细胞的[Ca2+]i变化。采用DAPI染色试剂盒观察H2O2刺激后细胞凋亡情况。结果在相同的探针浓度、负载时间和相同的图像采集参数的条件下,选定细胞内fluo-4平均荧光强度高于fluo-3。50 mM H2O2刺激后,A549细胞胞浆内[Ca2+]i迅速升高,通过公式计算发现采用fluo-3探针负载的选定细胞中[Ca2+]i变化范围是112.2 nM-1,069.6 nM,采用fluo-4探针负载的选定细胞中[Ca2+]i变化范围是7.6nM-505.4 nM。同时发现经H2O2刺激后,凋亡细胞百分比明显增加(P<0.01)。结论 H2O2促进A549细胞内Ca2+释放,诱导细胞凋亡。Ca2+探针fluo-4可能更适合于监测含量较低的细胞中[Ca2+]i变化。
张四洋李春艳高建邱雪杉崔泽实
关键词：CA^2+H2O2细胞凋亡
优化人胃癌细胞SGC-7901细胞骨架图像的激光共聚焦显微技术
2015年
目的利用激光共聚焦技术,对比三种固定液不同固定时间对胃癌细胞系SGC-7901的细胞骨架荧光染色的影响。方法选择三种常用固定液:2.5%戊二醛,4%多聚甲醛及95%乙醇,对接种24h后的SGC-7901细胞分别进行10min,20min及30min等不同时间点固定,5%BSA(含0.2%Triton X-100)封闭透膜1h,荧光抗体FITC标记的鬼笔环肽37℃避光孵育2h,DAPI室温染核15min,激光共聚焦扫描显微镜扫描,对比观察其染色结果。结果三种固定液及不同固定时间对SGC-7901细胞骨架染色效果不尽相同。95%乙醇固定后微丝之间区分不明,排列混乱,无网状结构,染色效果与固定时长无关。2.5%戊二醛固定后微丝结构完整,但层次不清晰。4%多聚甲醛固定后微丝结构完整,层次清晰,固定20min及30min微丝荧光染色清晰。结论 4%多聚甲醛固定20min对细胞骨架固定效果最好,荧光染色标记结果为后续细胞骨架功能研究优化实验方法并提供理论依据。
高建郑倩倩张四洋
关键词：固定液细胞骨架胃癌激光共聚焦
Cameleon测钙系统在H_2O_2诱导的A549细胞凋亡过程中的应用被引量：2
2013年
观察Cameleon测钙系统在H2O2诱导的A549细胞凋亡过程中的应用,实时测定胞浆Ca2+浓度([Ca2+]i),并探讨[Ca2+]i与细胞凋亡和Pyk2磷酸化的关系。采用Ca2+指示器Cameleon YC3.6转染A549细胞,24 h后用50 mmol/L H2O2刺激细胞,激光扫描共聚集显微镜实时测定选取细胞的[Ca2+]i变化。采用Western blot检测H2O2刺激的细胞中Pyk2-tyr402磷酸化水平。采用DAPI染色试剂盒观察H2O2刺激后细胞凋亡情况。结果发现,在H2O2作用下,A549细胞胞浆内游离[Ca2+]i迅速升高,同时Pyk2-tyr402磷酸化水平显著升高(P<0.05),凋亡细胞百分比显著增加(P<0.01)。因此,H2O2促进A549细胞内Ca2+释放,可能通过活化Pyk2诱导细胞凋亡。
张四洋于淼高建邱雪杉崔泽实
关键词：H2O2CA2+CAMELEONPYK2细胞凋亡
Sonic hedgehog促进血管外膜成纤维细胞表型转化并发生增殖迁移被引量：2
2009年
目的研究sonic hedgehog（shh）在血管外膜成纤维细胞增殖、迁移、表型转化中的作用。方法体外培养血管外膜成纤维细胞，免疫荧光、激光共聚焦显微成像、免疫印迹以及实时定量聚合酶链式反应检测蛋白和基因表达，Ki67、细胞生长曲线评价细胞增殖情况，划痕实验观察细胞迁移情况，α-肌动蛋白评价细胞表型转化情况。结果shh在体外培养的血管外膜成纤维细胞中有表达，加入外源性的shh后（3．5μg／m1），Ki67^＋的成纤维细胞增多，划痕区域的细胞覆盖率增大、成纤维细胞内出现α-肌动蛋白的表达；加入cyclopamine（40μmol／L）抑制内源性的shh信号通路后，Ki67^＋的成纤维细胞减少，划痕区域的细胞覆盖率减小。结论shh能够促进成纤维细胞增殖、迁移、向肌成纤维细胞转化。
李凤贺辛世杰张四洋崔泽实高建张建段志泉
关键词：成纤维细胞增殖迁移表型转化
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