魏睿
- 作品数:6 被引量:18H指数:2
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 重组蛋白sCAR-TMTP1增强腺病毒对骨肉瘤细胞基因转染效率的研究
- 2016年
- 目的提高腺病毒(adenovirus,ADV)在缺乏柯萨奇腺病毒受体(coxsackie and adenovirus receptor,CAR)的骨肉瘤细胞中的转染效率。方法通过昆虫(Bac-to-Bac)杆状病毒表达系统表达含有CAR胞外段(s CAR)及TMTP1肽的重组蛋白(s CAR-TMTP1),并对其纯化、鉴定。流式细胞仪分别检测骨肉瘤细胞及人胚肾细胞293(HEK293)的CAR表达水平,ADV对其的感染效率及FITC-TMTP1的结合能力。重组蛋白s CAR-TMTP1与ADV共同孵育形成复合物,流式细胞仪研究其在缺乏CAR的骨肉瘤细胞(MG-63)中的转染效率。结果表达及纯化的s CAR-TMTP1蛋白在相对分子质量约31 000处可见特异蛋白条带,感染的sf9细胞裂解上清可与兔抗小鼠s CAR单克隆抗体发生特异性反应。MG-63可与FITCTMTP1特异结合,其CAR表达水平低,ADV转染效率低。经s CAR-TMTP1修饰后的ADV/GFP对MG-63细胞的感染效率显著高于未经修饰的含报告基因GFP的ADV(ADV/GFP)。结论重组蛋白s CAR-TMTP1可显著提升ADV对缺乏CAR的骨肉瘤细胞的转染效率。
- 罗丹枫龚静吉程腾魏睿魏军成祝文涛
- 关键词:骨肉瘤腺病毒重组蛋白
- 新型肿瘤靶向药物TMTP1-DKK应用于宫颈癌治疗的初步研究被引量:2
- 2015年
- 目的探讨TMTP1-DKK在治疗高转移宫颈癌的潜在应用价值。方法选择高转移和低转移配对宫颈癌细胞系SiHa和C-33A,Transwell试验分别确证其转移能力;Rhodamine标记TMTP1,免疫荧光检测Rhodamine-TMTP1对SiHa、C-33A的亲和能力;CCK8检测TM TP1-DKK和TM TP1-VK处理后对Si Ha和C-33A细胞的杀伤率,Transewell检测TMTP1-DKK和TMTP1-VK处理后对SiHa细胞侵袭能力的影响。结果 SiHa细胞侵袭能力强于C-33A,TMTP1亲和实验显示TMTP1对高转移细胞系Si Ha亲和力明显高于C-33A,TMTP1-DKK对Si Ha生存率影响明显强于C-33A,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TM TP1-DKK能特异性地杀伤高侵袭能力的宫颈癌细胞Si Ha,但对低转移能力细胞C-33A杀伤效应不明显。提示TMTP1-DKK可以作为高转移宫颈癌靶向化疗药物的可能性。
- 魏睿李飞张振中程腾奚玲
- 关键词:宫颈癌肿瘤转移靶向治疗
- Dicer1在宫颈肿瘤组织中的表达及意义被引量:2
- 2017年
- 目的:探讨Dicer1在正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌的表达及意义。方法:Western blot和RT-PCR法检测正常细胞系(End1/E6E7)、宫颈内瘤变细胞系(S12)及宫颈癌细胞系(Ca Ski、He La、Si Ha和C33A)中Dicer1蛋白及其mRNA表达水平,免疫组织化学技术检测Dicer1在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌中的表达水平。结果:正常宫颈上皮细胞系Dicer1表达水平低于宫颈癌细胞系表达量。随着恶性程度增加,Dicer1呈驼峰状表达,即在正常宫颈组织及Grade III级宫颈鳞癌中表达较低,但在宫颈上皮内瘤变及高分化宫颈肿瘤(grade I级)中表达较高。结论:Dicer1在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌中的表达有差异,为进一步研究Dicer1在宫颈癌发生发展中的作用及分子机制提供依据。
- 卢卉魏睿张振中周颖奚玲李飞
- 关键词:宫颈癌宫颈上皮内瘤变
- 血清缓激肽与前列腺癌的相关性研究被引量:2
- 2017年
- 目的探讨血清缓激肽在前列腺癌的诊断及鉴别诊断中的临床应用价值。方法收集68例前列腺癌患者和32例前列腺增生患者,以同期体检的健康男性32例为对照组,收集其血清,酶联免疫吸附试验(enzymelinked immuno sorbent assay,ELISA)法检测血清中的缓激肽水平,比较各组血清缓激肽水平的差异以及前列腺癌患者在不同年龄、临床分期、病理分期(Gleason评分)、前列腺特异抗原(prostate specific antigen,PSA)水平、肿瘤体积以及骨转移、淋巴结转移、局部侵犯与否状态下血清缓激肽水平的差异。比较血清缓激肽与PSA联合诊断前列腺癌和PSA独立诊断前列腺癌的敏感度差异。结果前列腺癌组血清缓激肽水平[(16.44±0.91)μg/L]低于对照组[(19.72±1.10)μg/L]和前列腺增生组[(20.93±1.80)μg/L],差异均具有统计学意义(均P<0.05)。在肿瘤体积较大的前列腺癌患者血清缓激肽水平较低(P<0.05),而血清缓激肽水平在年龄、肿瘤临床分期、病理分期(Gleason评分)、PSA水平及骨转移、淋巴结转移、局部侵犯与否方面比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。血清缓激肽与PSA联合诊断前列腺癌较单独诊断敏感度提高(P<0.05)。结论前列腺癌患者血清缓激肽表达水平较低,且与肿瘤体积相关。血清缓激肽与PSA联合诊断前列腺癌敏感度较单独诊断高。
- 周颖吕梦琴魏睿奚玲李飞
- 关键词:酶联免疫吸附测定肿瘤标记
- 37384例妇女宫颈人乳头状瘤病毒感染状况研究被引量:12
- 2014年
- 目的:了解华中地区妇科门诊患者宫颈乳头状瘤病毒(HPV)感染状况,分析HPV感染状况与年份、年龄及季节的关系,为筛查HPV高危人群及预防提供科学依据。方法:对2006年3月~2013年10月近8年时间内来该院妇科门诊就诊的37 384例患者进行登记,收集其阴道、宫颈分泌物,采用第二代杂交捕获(hybrid capture 2,HC2)技术检测患者13种高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)感染情况。结果:12006~2013年HPV筛查的总人数逐年增加,但HPV检出阳性的总人数并没有明显变化,HPV阳性检出率呈下降趋势。2〈20岁、21~30岁、31~40岁、41~50岁、51~60岁、61~70岁和〉70岁不同年龄段患者的HR-HPV感染率分别是26.35%、16.53%、18.68%、17.21%、16.09%、14.47%、13.21%,各组间比较差异有统计学意义(χ2=40.47,P〈0.05),HPV检出率呈双峰状20岁以下和31~40岁,其中以20岁以下年龄段感染检出率最高,61岁以上相对较低。平均感染率17.13%。3在春季和秋季HPV感染率较其他季节高。结论:华中地区HR-HPV感染率与其他地区相比处于中等水平,HPV感染率和年龄、季节有一定相关性,宫颈癌高发年龄在40~50岁,HPV感染高危人群30~40岁的妇女应该是重点筛查对象,特别是在春秋两季。该结果可用于指导HPV高危人群的筛查,有利于预测病变转归,指导临床治疗和随访。
- 魏睿张振中程腾赵海月李飞奚玲
- 关键词:人乳头瘤病毒第二代杂交捕获法流行病学调查
- Hedgehog信号通路在人角膜缘微环境来源的基质干细胞中表达情况的研究(英文)
- 2015年
- 目的:探讨Hedgehog信号通路在人角膜缘微环境来源的基质干细胞(LNC)中的表达情况。方法:对贴壁生长的人角膜缘来源的基质干细胞(LNC)进行分离培养及传代,对骨髓间充质干细胞系(BMMSC)进行培养传代。通过将BMMSC作为阳性对照,采用Western blot技术,免疫荧光技术,real-time PCR技术从蛋白水平及基因水平验证Hedgehog信号通路成员SHH,patched,SMO,Gli-1在LNC中的表达情况。最后采用Cell Count Kit-8检测不同浓度Gli抑制剂GANT61(空白,1,5,10,15,20,25,30μmol/L)处理LNC和BMMSC48h后的增殖抑制效应反向验证Hedgehog信号通路在LNC中的存在。结果:Western blot技术,免疫荧光技术,real-time PCR技术均证明LNC细胞表达Hedgehog信号通路中的Gli-1,patched,SMO,且Gli蛋白抑制剂GANT61可以显著抑制LNC细胞增殖(P<0.05)。结论:Hedgehog信号通路在LNC细胞的增殖过程中发挥重要作用。
- 王娟李贵刚李飞蔡苏博魏睿李新宇
- 关键词:HEDGEHOG信号通路