黄贻泽
- 作品数:13 被引量:14H指数:2
- 供职机构:泸州医学院附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 联合应用Y27632和TDZD-8促进大鼠DRG神经元轴突再生被引量:3
- 2011年
- 目的探讨联合应用ROCKⅡ( Rho - associated coiled - coil - containing protein kinase Ⅱ, ROCK Ⅱ)和糖元合成酶-3β(glycogen synthase kinase,GSK-3B)抑制剂对新生大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元轴突再生和延长的影响。方法(1)取新生sD(Sprague—Dawley,SD)大鼠(〈5d)2只,显微操作下取胸腰段背根节,进行原代培养。(2)健康雌性成年sD大鼠15只,随机数字表法分为:手术瘫痪组(5只)、假手术对照组(5只)和正常组(5只),瘫痪组用WD(weight—drop,WD)法制成SD大鼠T9平面完全性截瘫的脊髓损伤动物模型,假手术组仅做椎板切除,造模7d后取1r8。节段脊髓制作脊髓提取液。(3)将Y27632(ROCKⅡ抑制剂)、TDZD-8(GSK-3β抑制剂)及伤后7d全瘫脊髓提取液与新生大鼠DRG神经元分组培养2d。A组:DRG神经元+PBS,B组:DRG神经元+全瘫脊髓提取液,C组:DRG神经元+全瘫脊髓提取液+不同浓度的Y26732,D组:DRG神经元+全瘫脊髓提取液+不同浓度的TDZD-8,E组:DRG神经元+全瘫脊髓提取液+Y26732+TDZD-8,观察并比较各组新生大鼠DRG神经元轴突平均长度和微管蛋白Bm(TubulinβⅢ)荧光表达强度。结果(1)与A组比较,B组轴突长度明显减小(P〈0.01),轴突远端TubulinβⅢ表达强度明显减弱(P〈0.01)。(2)C组中,5、10μmoL/LY27632治疗组轴突长度以及轴突远端和生长锥Tubulinl3llI表达强度比B组有所增加,但小于A组(P〈0.05);20~50μmoL/LY27632治疗组轴突长度以及轴突远端和生长锥TubulinβⅢ表达强度较B组增加明显(P〈0.01),其中30μmoL/LY27632治疗组最明显。(3)D组中,0.5—3μmoL/LTDZD-8治疗组轴突长度比A和B组明显增加(P〈0.01),其中1μmoL/LTDZD-8治疗组轴突长度最长;而5—25μmoL/LTDZD-8治疗组轴突长度明显缩短,与B组比较,差异无统计学�
- 冯大雄黄贻泽李骏叶飞康建平
- 关键词:脊髓损伤
- 联合应用Rho-ROCKⅡ及GSK-3β抑制剂促进新生大鼠DRGNs轴突再生的体外实验研究
- 目的:⑴观察完全性截瘫大鼠脊髓提取液对新生大鼠背根节神经元(DRGNs)轴突生长的影响;⑵观察联合应用Rho-ROCKII和GSK-3β抑制剂对大鼠背根节神经轴突再生和延长的影响。方法:⑴健康雌性SD成年大鼠15只,随机...
- 黄贻泽
- 关键词:RHOGSK-3Β轴突生长生长锥背根节
- 文献传递
- GSK-3β抑制剂TDZD-8对大鼠脊髓损伤后功能恢复影响的实验研究
- 目的:研究GSK-3β抑制剂TDZD-8对大鼠脊髓损伤后功能恢复的影响.方法:①健康雌性SD成年大鼠108只,WD法制成T10平面完全性截瘫的脊髓损伤动物模型,并在L4平面蛛网膜下腔植入注药导管,随机分为3组,每组36只...
- 雷飞冯大雄康建平黄贻泽张戈屈一鸣周际
- 关键词:脊髓损伤GSK-3ΒGAP-43BBB评分轴突再生
- 大鼠损伤脊髓提取液对新生大鼠DRNGs体外培养的影响被引量:1
- 2010年
- 目的:探讨损伤脊髓提取液对新生大鼠DRGNs(Dorsal Root Ganglion neuron,背根节神经元)轴突生长和延长的影响。方法:将正常、假手术及全瘫脊髓提取液同新生大鼠DRGsN共同培养,观察神经轴突平均长度和轴突远端微管(TubulinβIII)荧光表达。结果:全瘫组DRGNs平均轴突长度明显缩短,生长锥塌陷,轴突远端和生长锥的TubulinβIII表达明显减弱,与空白组比较有显著统计学差异;假手术组DRGNs平均轴突长度比空白组略缩短,但生长锥无塌陷,轴突远端和生长锥TubulinβIII表达强;正常组DRGNs平均轴突长度与空白组比较无差异,轴突远端TubulinβIII表达明显。结论:完全瘫痪脊髓提取液能明显抑制DRGNs轴突生长,导致生长锥塌陷;假手术脊髓提取液能轻度抑制轴突生长,但生长锥无明显塌陷;正常脊髓提取液不影响轴突生长。
- 黄贻泽李骏叶飞冯大雄
- 关键词:脊髓损伤背根节
- 地震中颈椎骨折伴颈脊髓损伤和(或)肺部并发症患者救治体会被引量:2
- 2009年
- 目的分析四川大地震中颈椎骨折伴颈脊髓损伤患者肺部并发症的发生原因并总结救治体会。方法回顾性分析泸州医学院附属医院神经外科自2008年5月12日至2008年8月6日收治的9例颈椎骨折伴颈脊髓损伤患者的临床资料。结果颈椎骨折伴颈脊髓损伤患者均采取手术治疗,其中6例伤后5d内发生肺部并发症,其中肺炎3例,通气障碍2例,肺水肿和血气胸1例,经积极的呼吸道管理等非手术治疗,肺部并发症都得到有效控制。结论颈椎骨折伴颈脊髓损伤急性期(〈5d)常发生严重肺部并发症,以高位损伤(C4以上)、合并胸部损伤、高龄、有肺部疾患史与吸烟史者更易发生,早期发现后内科治疗效果好。
- 黄贻泽冯大雄康建平叶飞陈礼刚李定君
- 关键词:脊髓损伤颈椎骨折肺部并发症
- TDZD-8对新生大鼠背根节神经元轴突再生影响的体外实验研究被引量:2
- 2010年
- 目的:探讨葡萄糖原合成酶-3β(glycogen synthase kinase3β,GSK-3β)的抑制剂TDZD-8对新生大鼠背根节(dorsal root ganglion,DRG)神经元轴突生长和延长的影响。方法:取新生(<5d)SD大鼠胸腰段背根节进行原代培养、提纯和鉴定。用WD法制成健康成年雌性SD大鼠T9平面完全性截瘫的脊髓损伤动物模型,造模7d后取T8~T10节段脊髓制作脊髓提取液。将不同浓度TDZD-8与成年大鼠脊髓提取液和新生大鼠DRG神经元分组培养:A组,DRG神经元+磷酸缓冲液(phosphate-bufered saline,PBS);B组,DRG神经元+正常脊髓提取液;C组,DRG神经元+假手术脊髓提取液;D组,DRG神经元+全瘫脊髓提取液;E组,DRG神经元+全瘫脊髓提取液+不同浓度TDZD-8。培养2d后观察并比较各组新生大鼠DRG神经元轴突平均长度和微管(Tubulin βⅢ)荧光表达强度。结果:A组、B组和C组之间平均神经轴突长度及轴突远端Tubulin βⅢ表达强度比较,无统计学意义,D组明显减小,与A、B和C组分别比较,有统计学意义(P<0.01)。0.5~3μM TDZD-8处理组平均轴突长度及Tubulin βⅢ荧光表达强度均明显高于A、B、C组,与D组比较,更为显著,差异均具有统计学意义(P<0.01)。5~25μM TDZD-8处理组平均轴突长度与A、B、C组分别比较,明显缩短且有统计学意义(P<0.01),与D组比较无统计学差异(P>0.05);轴突远端Tubulin βⅢ表达比A、B、C、D组及0.5~3μM TDZD-8处理组明显增强,有统计学意义(P<0.01)。结论:完全瘫痪脊髓提取液明显抑制DRG神经元轴突生长,轴突回缩。低浓度TDZD-8能促进轴突生长,形成多个轴突或轴突分支,而高浓度TDZD-8明显抑制轴突生长,导致轴突回缩。
- 黄贻泽李骏康建平叶飞冯大雄
- 关键词:背根节轴突再生
- Y27632促进新生大鼠DRG神经元轴突再生
- 目的:探讨ROCK Ⅱ抑制剂对脊髓损伤后新生大鼠DRG神经元轴突再生和延长的影响.方法:(1)取新生SD大鼠(<5d),显微操作下取胸腰段背根节,进行原代培养.(2)健康雌性SD成年大鼠15只,随机分为:手术瘫痪组(5只...
- 黄贻泽李骏康建平叶飞冯大雄
- 关键词:脊髓损伤背根节
- Y27632对脊髓损伤微环境下新生大鼠背根节神经元轴突再生的影响被引量:3
- 2010年
- 目的:探讨Rho蛋白激酶Ⅱ(Rho-associated coiled-coil-containing protein kinaseⅡ,ROCKⅡ)特异性抑制剂Y-27632对脊髓损伤微环境下新生大鼠背根节(dorsal root ganglion,DRG)神经元轴突再生和延长的影响。方法:取新生(<5d)SD大鼠胸腰段DRG神经元进行原代培养、提纯和鉴定。将健康雌性SD成年大鼠15只随机分为脊髓损伤组、假手术组和正常组,每组5只;用WD法制成T9平面脊髓损伤动物模型,造模7d后取T8~T10节段脊髓制作脊髓提取液。将新生大鼠DRG神经元分为5组进行培养:A组,DRG神经元+PBS;B组,DRG神经元+正常组脊髓提取液;C组,DRG神经元+假手术组脊髓提取液;D组,DRG神经元+损伤脊髓提取液;E组,DRG神经元+损伤脊髓提取液+不同浓度(5、10、20、30、40、50μmol/L)Y27632。培养2d后观察并比较各组新生大鼠DRG神经元轴突平均长度和微管(TubulinβⅢ)荧光表达强度。结果:A、B和C组平均神经轴突长度及轴突远端tubulinβⅢ表达强度比较无统计学差异(P>0.05);D组明显减小,与A、B和C组分别比较有统计学差异(P<0.05)。5、10μmol/LY27632治疗组平均轴突长度以及轴突远端和生长锥tubulinβⅢ表达强度比D组有所增加(P<0.05),10μmol/LY27632治疗组增加更明显,但小于A、B和C组(P<0.05)。20~50μmol/LY27632治疗组平均轴突长度以及轴突远端和生长锥tubulinβⅢ表达强度三组间比较无统计学差异(P>0.05);与5~10μmol/LY27632治疗组、D组比较明显增加(P<0.05);与A、B、C组比较平均轴突长度无统计学差异(P>0.05),平均荧光密度明显增加(P<0.05)。结论:损伤脊髓提取液能明显抑制新生大鼠DRG神经元轴突生长,导致轴突回缩。加入5~10μmol/LY27632能促进轴突生长,20~50μmol/LY27632更能明显促进轴突生长。
- 黄贻泽冯大雄李骏康建平叶飞
- 关键词:脊髓损伤背根节轴突再生
- 创伤性颈脊髓中央综合征的治疗观察被引量:1
- 2009年
- 目的:观察创伤性颈脊髓中央综合征的治疗效果。方法:分析我院2007年1月至2008年12月收治的创伤性颈脊髓中央损害综合征患者25例。伤后7-10天内手术17例(A组),伤后1-3月手术8例(B组);无骨折脱位17例、伴颈椎骨折脱位8例、伴颈椎管狭窄11例。结合手术前颈椎X线、CT、MR/检查及术前和术后第6月ASIA(American Spinal InjuryAssocia—tion)评分进行分析。结果:所有患者术后均获随访,平均随访8月。①经手术治疗后,所有患者脊髓神经功能均得到了明显恢复。评分有统计学意义(P〈0.05);②伤后7-10天内手术组患者术后6月ASIA评分明显高于伤后1-3月手术组,评分有统计学意义(P〈0.05)。结论:①因无骨折脱位型CCS伴颈椎管狭窄的患者缺乏明显的X线、CT表现,容易漏诊与误诊;②CCS患者早期手术解除颈脊髓压迫,稳定颈椎,有助于脊髓神经功能的恢复。
- 李骏黄贻泽叶飞冯大雄
- 关键词:颈椎脊髓损伤
- 差速贴壁纯化及纯化培养对神经轴突的影响被引量:1
- 2010年
- 目的神经元纯化是各种神经细胞实验研究必不可少的实验步骤,但目前少见神经元纯化过程中各种因素对神经轴突影响的实验报道。探讨简便有效的背根神经节神经元(dorsal root ganglion neurons,DRGn)细胞纯化方法和神经元培养体系内相关因素对β3-tubulin阳性神经轴突生长状态的影响。方法取新生3d的SD大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)制成细胞悬液,根据玻片包被底物不同分为D-多聚赖氨酸(poly-D-lysine,PDL)组、PDL/层粘连蛋白(Laminin,LN)组和Ⅰ型胶原(collagenⅠ,ColⅠ)组,分别差速贴壁10、20、30、40、50、60、70、80、90、100min,倒置相差显微镜观察细胞贴壁情况,并采用免疫荧光染色观察各时间点DRGn细胞和非DRGn细胞贴壁数量。将DRG制备组织块培养72h,采用完全随机设计的方法观察底物(PDL、PDL/LN、ColⅠ)、FBS(0、5%、10%)、五氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu,0、20、40μmol/L)和阿糖胞苷(cytrarabine,Ara-C,0、10、20μmol/L)不同水平对DRG整节培养中β3-tubulin阳性轴突长度和单位阳性轴突分支末梢数量的影响。结果倒置相差显微镜和倒置荧光显微镜观察显示,细胞接种后即开始贴壁,贴壁10min后移除细胞悬液仍可见DRGn细胞及非DRGn细胞贴壁生长。PDL组:贴壁10、30min,神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)阴性(NSE-)细胞数高于NSE+细胞数(P<0.05);贴壁80、90、100min,NSE+细胞数大于NSE-细胞数(P<0.05)。PDL/LN组:贴壁10、20、30、40、50min,NSE+细胞数及NSE-细胞数差异无统计学意义(P>0.05);贴壁60、70、80、90、100min,NSE+细胞数大于NSE-细胞数(P<0.05)。ColⅠ组:贴壁10~40min,NSE-细胞数大于NSE+细胞数,但差异无统计学意义(P>0.05);贴壁70、80、90、100min,NSE+细胞数大于NSE-细胞数(P<0.05)。DRG整节培养72h后,底物水平为PDL/LN时轴突生长分化最好,与PDL水平和ColⅠ水平比较差异有统计学意义(P<0.05);FBS为5%水平时β3-tubulin单位阳性
- 李骏冯大雄黄贻泽叶飞
- 关键词:背根神经节神经元FBS阿糖胞苷