黄雪芳
- 作品数：20 被引量：82H指数：4
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- 发文基金：江西省自然科学基金广东省卫生厅资助课题更多>>
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- 少加样高收效制备创伤修复剂纤维粘连蛋白的方法(英文)
- 2005年
- 背景纤维粘连蛋白不仅对细胞起支架作用,而且是细胞间重要的连结因子,具有类似调理素作用,可促进单核吞噬细胞系的吞噬功能,在炎症和创伤中起修复作用。目的以新鲜健康男性“O”型血浆为原料,为制备纤维蛋白结合素筛选出加样量小,方法简便、收得率高的纯化方法。设计开放性实验。单位广州市红十字会医院暨南大学第四附属医院创伤外科研究所。材料实验于2000-07/2002-07在广州市红十字会医院创伤外科研究所完成。材料主要包括新鲜健康男性“O”型血浆、明胶、CNBr-activatedSepharose4B、交联葡聚糖G-25、尿素、三羟甲基氨基甲烷等。方法用明胶与溴化氰活化琼脂糖珠偶联的亲和层析柱对纤维蛋白结合素进行纯化。①加人血浆取新鲜健康男性O型血浆150m L,每次向柱内加入25m L,停留20min,流速3.5m L/m in。②去杂蛋白用pH7.5的Tris-柠檬酸钠平衡液洗柱,洗至流出液280nm下吸光度值<0.02,再用含1mol/L NaCl的Tris-柠檬酸钠洗去其他杂蛋白。③收集纤维蛋白结合素用3m ol/L脲-Tris洗脱液洗柱,收集纤维蛋白结合素。④纤维蛋白结合素收集液去尿素取纤维蛋白结合素的收集液,过SephadeG-25,去除尿素。⑤除菌用0.22μm滤菌器过滤除菌。主要观察指标①十二烷基黄酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果。②停留时间对提纯纤维蛋白结合素收得率的影响。③加入血浆量对提纯纤维蛋白结合素收得率的影响。结果①十二烷基黄酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果分离胶浓度为7%,浓缩胶浓度为3%,纤维蛋白结合素电泳结果为单一蛋白区带。②停留时间对提纯纤维蛋白结合素收得率的影响血浆加样量为150m L,柱内不停留和停留时间为10,20,30m in时纤维蛋白结合素收得率分别是(65.24±3.45)%,(74.77±4.05)%,(86.99±4.10)%,(80.47±3.75)%。③加入血浆量对提纯纤维蛋白结合素收得率的影响柱内停留时间为20m i
- 谭见容任国梅戴丽冰黄雪芳
- 肺结核IgM激活C_(1q)类双特异性循环免疫复合物的研究被引量：3
- 2002年
- 目的 确定肺结核患者IgM激活C1q类双特异性循环免疫复合物 (IgM/C1q-TCIC)的水平并探讨其免疫生物学意义。方法 以羊IgG抗人C1q为包被抗体 ,HRP -羊IgG抗人IgM为指示抗体 ,建立捕捉法ELISA ,分别检测 12 7例肺结核、2 5例肺癌、2 7例肺炎和 4 31例正常人血清中IgM/C1q-TCIC。结果 肺部疾病按血清IgM/C1q-TCIC水平高低依次排序为肺结核 >肺癌 >肺炎。肺结核患者IgM/C1q-TCIC的阳性率与年龄、性别、Ig、C3 、ALT等其它临床指标无关 ,而与肺结核的初复治以及是否为活动性有关。结论 肺结核患者中IgM /C1q-TCIC是机体排除抗原的一种保护性反应 ,这种反应与机体的免疫反应性密切相关 ,可作为估价机体整体免疫反应的有效指标。
- 傅文红黄雪芳彭宣宪
- 关键词：肺结核IGMC1Q循环免疫复合物酶联免疫吸附试验免疫生物学
- 透明质酸钠预防骨关节炎Ⅱ型胶原抗体水平的动态变化被引量：4
- 2003年
- 目的 研究关节内注射透明质酸钠 (海尔根 )预防膝骨关节炎 (OA)过程中Ⅱ型胶原抗体水平及其动态变化。方法 取 12只成年新西兰兔制备Hulth膝骨关节炎动物模型 ,随机等分为 2组。Ⅰ组术后当时及每 2周关节内注射 1ml 1%透明质酸钠 (Hyalgan)至 12周 ;Ⅱ组注射 1ml生理盐水为对照。各组术前及术后每隔 2周收集血清 ,建立间接法ELISA ,检测Ⅱ型胶原抗体水平。结果 Ⅰ组术后第 6、10、12周Ⅱ型胶原抗体水平与术前比较具有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;Ⅱ组Ⅱ型胶原抗体水平第 10周显著高于术前 (P <0 .0 5 ) ;Ⅰ组与Ⅱ组同期比较Ⅱ型胶原抗体水平均无显著差异。结论 OA使机体产生自身免疫 ,引起自身Ⅱ型胶原抗体水平增加。透明质酸钠能促进体液免疫应答 ,导致抗体水平进一步升高。提示 ,注射透明质酸钠治疗膝骨关节炎时 。
- 黄雪芳李斯明叶春婷梁佩红叶惠贞沈雁钟灿灿
- 关键词：透明质酸钠膝骨关节炎体液免疫
- 检测体内异种II型胶原异体移植引起的细胞毒反应
- 2007年
- 检测用猪II型胶原免疫新西兰大白兔的异种异体细胞免疫反应。用II型胶原免疫新西兰大白兔60 d,定期抽取血浆检测抗II型胶原抗体;第60 d取兔的外周血淋巴细胞、兔脾细胞、淋巴结分别分离淋巴细胞,进行体外二次II型胶原刺激,检测由此引起的反应性的细胞增殖规律。实验分为二组,第一组加入不同浓度植物血凝素(PHA)作阳性对照,并测定非特异性免疫;第二组加入不同浓度II型胶原,检测特异性免疫。正常兔的淋巴细胞在PHA剌激下发生增殖,但对II型胶原的第一次剌激不发生增殖,而免疫兔对PHA和II型胶原的剌激均能发生显著的增殖。表明异种II型胶原在一定浓度下,可以引起免疫兔的抗II型胶原抗体的升高,并可引起兔脾、外周血淋巴细胞增殖,异种II型胶原能在体内引起细胞免疫反应。
- 沈雁唐毅钟灿灿梁佩红黄雪芳邹海燕陈鸿辉梁伟国
- 关键词：细胞免疫细胞毒
- 虎杖、地榆联合抗菌作用的实验研究被引量：3
- 1997年
- 采用琼脂稀释法对比研究了虎杖、地榆两者不同比例配伍后对6种细菌的体外抑菌作用。结果表明，不同组合对同一细菌抑制作用以同一组合对不同细菌抑制作用较单味药分别出现增强，减弱或不变的现象，提示中草药配伍的科学性和合理性。
- 黄雪芳彭宣宪等
- 关键词：虎杖地榆抑菌作用中草药药物配伍
- Ⅱ型胶原海绵填充材料修复兔关节软骨缺损(英文)
- 2005年
- 背景:修复关节软骨缺损一直是骨科医师致力解决的难题,以前采用自体软骨膜、骨膜或异体骨软骨片移植,但存在供体来源有限、固定困难,以及出现软骨内骨化、软骨下骨与修复性软骨的分层现象等。Ⅱ型胶原是软骨基质的主要成分,对关节软骨缺损的修复应有一定的作用。目的:探讨Ⅱ型胶原海绵对修复关节软骨缺损的效果。设计:随机对照的实验研究。地点和材料:实验地点为广州市创伤外科研究所。材料:普通级成年雄性纯种新西兰兔24只48膝,体质量(2.29±0.25)kg,标准饲料分笼喂养。干预:在股骨滑车面钻孔为直径5mm、深3mm的全层关节软骨缺损,按随机数分为填充组(左膝关节缺损部位植入Ⅱ型胶原海绵)和对照组(右膝关节缺损部位作为空白对照)。主要观察指标:术后12周内,每双数周对缺损修复情况行大体形态和组织学观察。结果:10～12周,对照组:缺损区由白色、质软、按压无阻抗的组织修复,修复组织仍低于周围关节面,边界仍清晰可辨,组织学以类似炎症反应的机制修复缺损,最终以透明变性的纤维组织的增生来填补缺损部位;填充组:缺损区由半透明状、质韧光滑有光泽,按压有阻抗并有弹性的组织修复,修复组织与周围软骨外形上已基本相似,不易区分,组织学未见有炎症反应的过程,内骨组织和软骨组织增生活跃,并可见大量类骨组织和?
- 叶惠贞李斯明叶春婷杨小红黄雪芳梁佩红
- 关键词：生物医学工程生物相容性材料
- Ⅱ型胶原海绵修复关节软骨缺损的动物实验被引量：14
- 2003年
- 目的探讨Ⅱ型胶原海绵修复关节软骨缺损的效果。方法采用成年纯种新西兰兔24只,48侧膝关节,在股骨滑车面钻孔为直径5mm、深3mm的全层关节软骨缺损,左侧为A组,在缺损区内完全填充Ⅱ型胶原海绵,右侧为B组,缺损区空白对照。术后12周内,每双数周对缺损修复情况行大体形态和组织学观察。结果Ⅱ型胶原对关节软骨缺损的修复有明显的促进作用,修复结果接近正常软骨。结论自行研制的高纯度Ⅱ型胶原海绵组织相容性好,无明显毒副作用,对关节软骨缺损具有良好的修复作用。
- 叶惠贞李斯明叶春婷杨小红黄雪芳梁佩红
- 关键词：关节软骨缺损动物实验新西兰兔
- 创伤修复剂——纯化的人血浆纤维连结蛋白活性的研究
- 2007年
- 目的建立测定人血浆纤维连结蛋白(FN)活性测定方法,研究在4℃保存的FN,贮存时间与浓度的关系。方法利用FN对明胶亲和特性,用明胶包被聚苯乙烯反应板,1%牛血清白蛋白封闭,随后加保存3、5、7个月,各浓度纯化的FN,25μg/m l抗人FN抗血清,HRP-金黄色葡萄球菌A蛋白。结果此法可测定FN活性,具有高度可重复性。FN浓度越高活性保存越好,浓度为30ng/m l以上纯化的FN4℃冷藏保存7个月仍具有一定活性。结论此法敏感度高、特异性强、重复性好,为FN活性保存条件提供可靠的检测数据。
- 梁佩红谭见容黄雪芳戴丽冰任国梅
- 关键词：纤维连结蛋白明胶酶联免疫吸附测定活性
- 纤维连接蛋白——一种创伤修复剂制备方法的研究被引量：2
- 2003年
- 对制备纤维连接蛋白 (Fibronectin,FN)的试验方法进行研究 ,筛选出加样量小 ,收得率高的最佳试验方法。用明胶与溴化氰活化琼脂糖珠偶联的亲和层析柱 ,对从健康男性“O”型血浆提纯 FN进行研究。采用不同的加样量与样品在柱内不同的停留时间进行筛选。在明胶亲和柱体积不变的条件下 ,制备 FN的量与血浆加样量及血浆在柱内停留时间有密切关系。该柱的最佳加样量为 15 0 ml血浆 ,每次血浆在柱内停留时间应为 2 0 min。该法制备的 FN,加样量小 ,收得率高。
- 任国梅黄雪芳戴丽冰叶惠贞梁佩红
- 关键词：纤维连接蛋白创伤
- 甲亢患者IgG特异性激活补体类循环免疫复合物的研究
- 2002年
- 目的 探讨甲状腺机能亢进 (Gravesdisease,GD)患者IgG特异性激活补体类循环免疫复合物 (IgG/C3 -TCIC)的存在状况及其病理生理意义。方法 采用捕捉法ELISA以羊IgG抗人C3 为包被抗体 ,HRP -羊抗人IgG为检测抗体 ,检测了 2 19例GD患者和 10 5例健康人血清中IgG/C3 -TCIC ;按不同年龄、性别、血清Ig、C3 、T3 、T4、FT3 、FT4、TG和TM水平正常与否 ,比较其阳性率 ;并分析其与血清总、游离、复合Ig与C3 的相关性。结果 GD患者血清中IgG/C3 -TCIC含量和阳性率显著高于正常对照组 (P <0 0 1,0 0 0 1) ;其阳性率与年龄、性别及血清甲状腺激素水平无关 ,仅在血清IgA水平升高组显著高于IgA正常组 (P <0 0 5 ) ;患者IgG/C3 -TCIC仅与复合IgM呈正相关 (r=0 1732 ,P <0 0 5 ) ,而正常对照IgG/C3 -TCIC与总游离IgM及复合C3 呈正相关 (r =0 4 96 8,0 4 731,0 2 113;P<0 0 0 1,0 0 0 1,0 0 5 )。结论 GD患者存在特异性免疫功能紊乱。Ig类型转换于该类TCIC的形成具有重要的调节作用。并提出深入研究其机理 。
- 黄雪芳张文军彭宣宪李斯明苗艳萍
- 关键词：甲状腺机能亢进IGG特异性激活补体循环免疫复合物
