目的探讨干细胞移植防治血管成形术后再狭窄的可能机制。方法 2014年12月至2015年2月,新西兰大白兔18只随机分入对照组(A组,n=6)、球囊损伤组(B组,n=6)及球囊损伤+人脐血干细胞移植(HUCBSC)组(C组,n=6)。采用Ficoll密度梯度离心法分离制备人脐血单个核细胞悬液。A组只分离左侧后肢动脉标记后闭合伤口;C组行动脉分离后夹闭动脉两端,穿刺成功以3 mm×40 mm球囊进行局部扩张并间断牵拉球囊,每次30 s,共3次,成功制备动脉缺血损伤模型后,经导管注入脐血干细胞悬液0.5 ml于后肢动脉损伤局部,缓慢撤出球囊,恢复血供;B组经同样方法介入操作后,注入等体积的磷酸盐缓冲液(PBS缓冲液);术毕均予逐层缝合关闭伤口。分别于术前、术后7 d及术后14 d经耳中央动脉各采血3 ml,分离血清,采用ELISA法分别测定3组血管内皮生长因子(VEGF)及转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;实验结束时留取局部血管组织进行HE染色,观察移植前后血管病理变化表现。组内比较采用配对样本t检验,组间比较采用均数方差分析及双变量回归与相关分析进行统计学处理。结果 (1)术前A组、B组及C组VEGF水平比较差异无统计学意义(F=0.000,P=0.978);术后7 d B组较A组明显增高(t=2.286,P=0.045),C组较A组及B组均明显增高(t=6.196,P=0.000;t=2.336,P=0.042);术后14 d B组与A组比较无明显差异(t=1.294,P=0.225),C组较A组及B组仍显著增高(t=6.738,P=0.000;t=2.641,P=0.038)。(2)术前A组、B组及C组TGF-β1水平比较组间差异无统计学意义(F=0.003,P=0.997);术后7 d B组较A组明显增高(t=9.052,P=0.000),C组较A组增高,但与B组比较明显减低,差异均有统计学意义(t=2.675,P=0.023;t=3.104,P=0.011);术后14 d B组与A组比较仍增高(t=3.443,P=0.006),而C组与B组比较显著降低(t=2.932,P=0.020),较A组增高,但差异无统计学意义(t=1.262,P=0.236);(3)球囊损伤及干细胞移植后不同时间点血清VEGF与TGF-β1水平变化呈�
目的:通过观察氧化苦参碱对糖尿病患者空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗稳态模型指标以及血清中活性氧(reactive oxygen species,R O S)、炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量的影响,检测胰岛素抵抗信号通路中关键蛋白的含量变化,探究氧化苦参碱对胰岛素抵抗的影响及其机制,为临床上使用氧化苦参碱治疗胰岛素抵抗提供一定的科学依据.方法:采用1∶1随机对照病例研究方法,将研究对象分为氧化苦参治疗组和未治疗对照组,采用葡萄糖氧化酶法检测两组患者空腹血糖、空腹胰岛素水平;比较两组胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(homeostasis model assessment of insulin sensitivity index,HOMA-ISI)采用ELISA检测两组患者血清中ROS、TNF-α含量;采用Western blot检测两组蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、p-AKT、糖原合成酶激酶3α/β(glycogen synthase kinase-3α/β,GSK3α/β)、p-GSK3α/β变化情况.结果:葡萄糖氧化酶实验结果显示,经氧化苦参碱治疗后的患者与对照组相比,空腹血糖、空腹胰岛素显著降低(P<0.05),HOMAI R降低(P<0.05),H O M A-I S I增加(P<0.05);ELISA结果显示,经氧化苦参碱治疗后的患者血清中ROS、TNF-α含量显著低于对照组患者(P<0.05);Western blot结果显示,经氧化苦参碱处理后的肝细胞总蛋白AKT、G S K3α/β含量不变(P>0.05),而p-A K T、p-GSK3α/β均明显增加(P<0.05).结论:氧化苦参碱可降低空腹血糖、空腹胰岛素含量,一方面通过减少ROS、炎症因子的产生,改善胰岛素抵抗;另一方面可以影响胰岛素信号传导通路中关键分子AKT、G S K3α/β的磷酸化,从而改善胰岛素抵抗,这也为临床上使用氧化苦参碱治疗胰岛素抵抗提供了基础依据.
