龙卫国
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HDGF真核表达质粒的构建、表达及其生物活性检测被引量：2
- 2010年
- 目的:构建pEGFP-HDGF真核表达质粒,转入胶质瘤U87细胞中,对其表达及生物学活性进行检测。方法:PCR扩增HDGF编码区序列,构建pEGFP-HDGF真核表达质粒,脂质体转染U87细胞,G418筛选稳定表达单克隆,荧光显微镜观察绿色荧光,RT-PCR及Westernblot检测融合蛋白在转染细胞中的整合及表达。通过U87细胞增殖实验对HDGF-GFP融合蛋白进行初步功能鉴定。结果:pEGFP-HDGF表达质粒转染U87细胞后,荧光显微镜下可见绿色荧光,RT-PCR、Westernblot结果证实在U87细胞中有HDGF-GFP融合蛋白的表达。细胞增殖实验的结果显示,稳定表达pEGFP-HDGF的U87细胞生长速率明显高于对照空载组细胞(P=0.006)。结论:pEGFP-HDGF真核表达质粒构建成功,且HDGF对于胶质瘤U87细胞株有着生长刺激作用,这将有助于胶质瘤发生发展的分子机制研究。
- 郭泽龙卫国曹伯良张爱霞
- 关键词：肝癌衍生生长因子绿色荧光蛋白
- 探讨不同实验条件对U87细胞体外增殖的影响
- 2010年
- 目的:探讨RNA干扰肝癌衍生生长因子(HDGF)后,U87细胞增殖抑制的最佳实验条件。方法:用LipofectamineTM2000将HDGF siRNA转染U87细胞后,将细胞接种于96孔板中,分别在无血清、含10%FBS和无血清Matrigel胶预处理细胞培养板条件下,采用MTS法检测细胞增殖能力。结果:HDGF表达水平下调后,U87细胞增殖能力受到抑制。在无血清、含10%FBS和无血清Matrigel胶预处理细胞培养板条件下,细胞增殖抑制率分别是18%、9%和28%。结论:在无血清Matrigel胶预先处理的培养条件下,能最大程度上反映出HDGFsiRNA对U87细胞增殖能力的抑制。
- 龙卫国郭泽曹伯良张爱霞
- 关键词：RNA干扰细胞增殖
- 下调HDGF基因表达对U87细胞体外生物学行为的影响及机制研究
- 研究目的: 明确肝癌衍生生长因子(Hepatoma-derived growth factor HDGF)与胶质瘤之间的关系。采用RNA干扰(RNA interference RNAi)技术下调HDGF表达水平,研究其对...
- 龙卫国
- 关键词：RNA干扰HDGF胶质瘤生物学行为
- 文献传递
