仲维学
- 作品数：10 被引量：14H指数：2
- 供职机构：苏州大学医学部医学生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划南京医科大学科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人CD83基因转染细胞株的构建及其功能初步研究
- 2011年
- 目的构建人CD83全长编码基因转染293细胞,并探讨其对单核细胞的作用。方法 RT-PCR方法从成熟人树突状细胞(DC)扩增出CD83 cDNA,插入pIRES2-EGFP载体,脂质体转染293细胞,筛选出稳定表达目的基因细胞株;从人外周血单个核细胞(PBMC)中磁珠分选单核细胞,LPS刺激的同时加入293/CD83细胞或293/mock,24 h后检测细胞活化状态以及培养上清中TNF-α水平。结果经流式细胞术反复检测绿色荧光蛋白(GFP)报告基因及CD83表达水平,筛选获得获得一株稳定表达膜型CD83分子的基因转染细胞株293/CD83;体外实验显示293/CD83可促进LPS刺激的单核细胞活化水平和TNF-α分泌量。结论成功构建表达人CD83分子的293细胞株,293/CD83对LPS刺激的单核细胞有协同刺激作用。
- 陈礼文高超沈双仲维学朱一蓓张学光
- 关键词：树突状细胞转染免疫调控细胞活化
- 天花粉蛋白诱导人Th2应答的免疫机制探讨
- 研究背景:天花粉蛋白(Tk)是从中国特有的中药括蒌块根中分离出来的Ⅰ型核糖体失活蛋白,具有抗肿瘤和抗病毒等生物活性,临床上主要用于中期引产,宫外孕、葡萄胎和绒癌的治疗。同时Tk也是强过敏原,体内可诱导由IgE介导的过敏反...
- 仲维学陈冰朱一蓓张学光
- 文献传递
- IL-2／IL-2R对单核来源树突状细胞的体外分化发育和功能的作用被引量：1
- 2008年
- 目的分别比较抗人CD40单抗和肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）对单核来源树突状细胞（monocyte-derived dendritic cell，Mo-DC）体外诱导表达CD25（IL-2Rα）的作用，并进一步探讨了IL-2在Mo-DC分化成熟和功能介导中的生物学效应。方法采用联合粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF）和IL-4体外诱导Mo-DC的培养方法，分别加入CIMO单抗和TNF-α诱导Mo-DC成熟；免疫荧光标记分析Mo-DC表型；ELISA法测定1干扰素（interferon-γ，IFN-γ）的分泌水平；^3H-TdR掺入法分析Mo-DC对自体T细胞的促增殖效应。结果（1）CIMO信号能有效诱导成熟Mo-DC上调表达CD25（IL-2Rα），而TNF-α则无此作用；（2）Mo-DC在CD40激发后，加入不同剂量的IL-2继续培养可促进Mo-DC对IFN-γ的分泌，同时^3H-TdR掺入法的结果也显示，在Mo-DC培养时加入IL-2可以增强Mo-DC对T细胞的促增殖作用。结论CIMO激发的Mo-DC上调表达CD25（IL-2Rα），外源性IL-2能促进Mo-DC分泌IFN-γ和介导T细胞的促增殖效应。
- 黄勇朱一蓓夏瑜汤琳陈冰孙治平仲维学张学光
- 关键词：树突状细胞CD25IL-2
- GD患者外周血CD4^+CD28-T细胞亚群的表型特征及临床意义被引量：9
- 2007年
- 检测Graves病(GD)患者外周血CD4^+CD28-T细胞水平及其表面CD45RO/CD45RA及ICOS的表达,探讨CD4^+ CD28-T细胞亚群在GD免疫致病机制中的作用。采用三色荧光抗体染色及流式细胞术检测了42例初发GD患者和30例健康者外周血中CD4^+CD28-T细胞的百分率及其表面CD45RO/CD45RA和ICOS表达水平,同时检测其甲状腺功能并进行相关性分析。结果GD患者外周血中CD4^+CD28-T细胞百分率明显高于健康对照组,并高表达ICOS分子,与FT3水平显著正相关;与健康对照组相比,GD患者CD4^+CD28^-CD45RO^+T细胞百分率也显著增高,而CD4^+CD28^-CD45RA^+T细胞呈下降趋势,FT3、FT4水平与CD4^+CD28-T细胞表面CD45RO的表达率呈正相关,而FT3水平与CD45RA表达呈负相关。结论GD患者外周血CD4^+CD28^-T细胞异常增高,表面高表达ICOS分子,具有记忆性细胞的表型特征,与甲状腺功能异常有一定的相关性,CD4^+CD28-T细胞可能是参与GD免疫病理反应的自身反应性T细胞。
- 孙治平陈蕾淤葛华朱一蓓仲维学施毕旻陈冰周春刚张学光
- 关键词：GRAVES病CD45ROICOS
- 外周血CD4^＋CD28^-T细胞表达的细胞因子与Graves眼病的相关性被引量：1
- 2010年
- 探讨CD4^＋CD28^-T细胞在Graves眼病（GO）中的免疫致病作用。采用流式细胞仪分析GO、Graves病无GO患者和健康对照者CD4^＋CD28^-T细胞γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素2（IL-2）和IL-4的表达。结果显示，GO组CD4^＋CD28-T细胞比例显著增高（P〈0．05），胞内高表达IFN-γ（P〈0．05）、低表达IL-2（P〈0．05），与GO临床活动度评分（CAS）密切相关（P〈0．05）。IL-4表达在3组间无明显差异。结果提示高分泌IFN-γ的CD4^＋CD28^-T细胞与GO病理损害有关。
- 孙治平仲维学缪珩淤葛华游娜张学光
- 关键词：格雷夫斯眼病T细胞细胞因子
- 天花粉蛋白联合CD40信号激发的人MoDC介导Th2细胞分化的研究被引量：1
- 2007年
- 探讨天花粉蛋白(Tk)联合CD40信号诱导人单核细胞来源DC(MoDC)的成熟活化及其介导Th2细胞分化的作用和机制。采用GM-CSF和IL-4联合方案体外诱导人MoDC,并利用鼠抗人CD40激发型单抗(5C11)刺激负载了Tk的DC制备成熟DC。采用免疫荧光标记和流式细胞术分析DC表型(CD80、CD83、CD86、CD14、PDL1)及其摄取FITC-Dextran的能力;ELISA法测定DC上清中IL-12p70的含量;胞内染色和流式细胞术检测经成熟DC活化的T细胞中CD4^+IFN-γ^+T和CD4^+IL-4^+T的比例。实验结果显示单独Tk不能刺激DC完全成熟,用Tk负载DC后必须联合外源性成熟刺激信号(如5C11),才能有效促进DC成熟,表现在CD80、CD83、CD86的上调表达,CD14下调表达,DC摄取FITC-Dextran的能力降低。与CD40信号单独诱导组相比,Tk联合CD40信号诱导的成熟DC表面PDL1分子呈下调表达,分泌IL-12的能力显著降低,明显提高T细胞中CD4^+IL-4^+T的比例。由此表明负载了Tk的成熟MoDC体外能有效介导Th2细胞分化。
- 陈冰仲维学朱一蓓张光波周春刚孙治平田晓静罗先富张学光
- 关键词：天花粉蛋白树突状细胞TH2细胞
- 一株识别CD83单克隆抗体的研制及其生物学特性鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的:鼠抗人CD83功能性单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定。方法:以人CD83转基因细胞L929/CD83为免疫原,常规免疫6～8周龄的雌性BALB/c小鼠;采用B淋巴细胞融合技术,将免疫小鼠脾脏细胞与Sp2/0融合,以L929/CD83、293/CD83转基因细胞为抗体筛选阳性细胞,经免疫荧光标记分析对杂交瘤进行反复筛选和多次的克隆化培养;采用Ig类和亚类快速定性试纸法、染色体核型分析、竞争结合抑制试验、间接免疫荧光法、Westernblot对mAb的生物学特性进行鉴定。结果:获得1株稳定分泌鼠抗人CD83mAb的杂交瘤细胞株(命名为9D8),该mAb能特异性地识别成熟的DC、活化的T细胞及肿瘤细胞株Daudi、8226表达的CD83分子,该mAb识别的位点不同于商品化抗人CD83mAb(HB15e)。结论:成功地研制1株鼠抗人CD83mAb,识别位点与HB15e不同,为更好地研究该分子的功能提供良好的物质基础。
- 高超仲维学郑舒丹陈礼文朱一蓓张学光
- 关键词：CD83杂交瘤单克隆抗体
- 外源性IL-2在单核来源DC的体外分化发育和功能的作用
- 目的:比较抗人CD40激发型单抗和TNF-α对Mo-DC体外诱导表达CD25(IL-2R)的作用,并进一步探讨外源性IL-2在Mo-DC分化成熟和功能介导中的生物学效应。方法:采用联合GM-CSF和IL-4体外诱导Mo-...
- 黄勇朱一蓓夏瑜陈冰孙治平仲维学张学光
- 关键词：树突状细胞CD40IL-2
- 文献传递
- CD83与T细胞的活化与分化研究
- 研究背景:CD83为Ⅰ型单链跨膜糖蛋白,属免疫球蛋白超家族成员,被认为是树突状细胞(DC)最特异的成熟标志。CD83的cDNA由618 bp组成,编码205个氨基酸,胞内部分因仅有39个氨基酸,通常推测为配体,但其受体至...
- 仲维学高超朱一蓓张学光
- 文献传递
- IL-2对单核来源DC的体外分化发育和功能的影响
- ＜正＞树突状细胞在诱导特异性抗肿瘤细胞免疫应答中起重要的作用,DC疫苗业已用于某些肿瘤的临床免疫治疗。IL-2是最早被发现的淋巴细胞因子之一,在T淋巴细胞的克隆性增殖和活化过程中起着关键的作用,而且对NK细胞和B细胞也具...
- 黄勇朱一蓓夏瑜陈冰孙治平仲维学张学光
- 关键词：树突状细胞CD25IL-2
- 文献传递
