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侯建毅

作品数:8 被引量:33H指数:4
供职机构:温州医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划温岭市科技局基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 8篇医药卫生

主题

  • 4篇博卡病毒
  • 3篇人博卡病毒
  • 3篇病毒
  • 2篇多瘤病毒
  • 2篇支气管
  • 2篇支气管上皮
  • 2篇上皮
  • 2篇上皮细胞
  • 2篇气管
  • 2篇气管上皮
  • 2篇细胞
  • 2篇下呼吸道
  • 2篇下呼吸道感染
  • 2篇瘤病毒
  • 2篇免疫
  • 2篇抗体
  • 2篇呼吸道感染
  • 2篇基因
  • 2篇儿童
  • 2篇儿童下呼吸道

机构

  • 8篇温州医学院
  • 1篇温州医科大学

作者

  • 8篇郑昌华
  • 8篇侯建毅
  • 8篇郑敏巧
  • 8篇林峰
  • 5篇吴锋
  • 4篇郑美云
  • 4篇曾爱平
  • 4篇黄恩佩
  • 4篇李桦
  • 3篇滕灵方
  • 3篇莫一涵
  • 3篇饶高峰
  • 3篇李旭阳
  • 2篇陈弘
  • 2篇吴峰
  • 1篇方合志
  • 1篇蔡丽敏
  • 1篇林红霞
  • 1篇欧阳后先
  • 1篇吕建新

传媒

  • 5篇中华实验和临...
  • 2篇病毒学报
  • 1篇中华生物医学...

年份

  • 1篇2012
  • 2篇2010
  • 2篇2009
  • 3篇2008
8 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
博卡病毒VP2基因在昆虫细胞sf9中表达及临床标本筛查被引量:2
2009年
目的表达人博卡病毒(HBoV)vP2蛋白,用于临床标本HBoV的筛查。方法将VP2基因重组于杆状病毒基因组,重组的杆状病毒感染昆虫细胞sf9,用HA抗体进行Western Blot鉴定重组融合vP1蛋白表达。通过电镜观察重组蛋白颗粒。以vR2蛋白作为抗原对176例临床样本进行免疫印迹筛查。结果在昆虫细胞中vB蛋白的表达量约占细胞总蛋白的60%以上,VP2蛋白相对分子质量为60×10^3。电镜观察博卡病毒vP,蛋白形成病毒样颗粒(VLP),其大小在20nm左右;采用免疫印迹技术从临床标本中筛查出4例患者HBoV阳性,阳性率达到2.28%(4/176)。结论本研究成功的在昆虫细胞中表达了博卡病毒VR蛋白;表达vP2蛋白具有一定抗原性,为开展人博卡病血清学研究方法建立提供基础。
滕灵方林峰郑美云郑昌华吴锋曾爱平黄恩佩莫一涵郑敏巧李旭阳侯建毅
关键词:基因表达调控免疫印迹法
利用人支气管上皮细胞系分离和培养人博卡病毒被引量:4
2009年
目的研究人博卡病毒(HBoV)在呼吸道感染中致病性及机理。方法利用人支气管上皮细胞系进行HBoV分离及培养,通过电镜对培养细胞中HBoV的形态及感染细胞进行研究,并采用逆转录PCR(RT-PCR)方法,检测HBoV在细胞中转录产物mRNA,同时对扩增产物进行测序及分析。结果将含有HBoV阳性痰液标本无菌接种人支气管上皮细胞系,出现2例致使细胞发生明显的病变(CPE)。电镜观察在细胞质中散在六角形或圆形的病毒粒子,大小18-26nm之间,大部分是20nm。RT-PCR扩增产物经电泳检测与预期结果相符是295bp,扩增产物测序结果与GenBank中HBoV序列比较,核苷酸同缘性99%,氨基酸同缘性100%。结论HBoV感染人支气管上皮细胞后能够在该细胞内增殖,并产生特征性生物学改变。本研究为今后HBoV致病性及免疫应答谱研究奠定基础。
林峰滕灵方郑美云郑昌华吴锋李桦郑敏巧曾爱平黄恩佩莫一涵侯建毅
关键词:支气管上皮细胞细胞
检测人博卡病毒抗体间接酶联免疫吸附法的建立及临床应用被引量:1
2010年
目的建立间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测人博卡病毒(HBoV)抗体,探讨其临床应用的可行性。方法以重组表达的HBoV融合蛋白VP2作为包被抗原,建立检测HBoV抗体的间接ELISA,优化该检测方法的最佳条件,观察其精密度、敏感度和特异性,并与荧光定量PCR方法对比检测40份临床样本,同时采用免疫印迹法(Westernblot)确认其符合率。结果所建立的间接ELISA最佳抗原包被浓度为2mg/L,酶标二抗工作浓度为1:5000,血清标本最佳稀释度为1:200。该方法平均批内变异系数为6.87%,平均批间变异系数为4.67%。40份临床样本间接ELISA检测结果与荧光定量PCR及免疫印迹结果一致,符合率100%。结论利用VP2融合蛋白作为抗原,建立的检测血清HBoV抗体间接ELISA方法特异性强、重复性好,可用于HBoV抗体的定量和定性检测。
林峰滕灵方郑敏巧郑昌华吴锋黄恩佩侯建毅
关键词:抗体酶联免疫吸附测定临床实验室技术
中国浙江地区儿童下呼吸道感染KI多瘤病毒的鉴定被引量:4
2008年
KI polyomavirus,which was firstly discovered in 2007,is a new human polyomavirus belonging to Polyomaviridae and containing circular double-strand genomic DNA.This study was based on identification assay of KI polyomavirus reported.Total 2293 clinical sputum specimens from children under 3 years old were collected and screened from Wenzhou Medical College affiliated Wenling Hospital,Zhejiang Province.A KI polyomavirus was detected and identified,the positive rate was 0.04%.The sequences of PCR products was identical to that of the viral capsid protein(VP1) gene derived from KI polyomavirus.The results strongly suggested that the KI polyomavirus was found firstly in Chinese children with acute lower respiratory tract infections from Zhejiang region.This study provided new information for further investigation of etiopathogenisis and diagnosis in children with lower respiratory tract infections.
林峰郑美云李桦郑昌华饶高峰郑敏巧吴峰侯建毅
基因芯片检测拉米夫定治疗乙肝病毒感染耐药分析
2010年
目的 分析拉米夫定治疗乙肝病毒感染耐药性,旨在为指导慢性乙肝患者临床药物治疗提供新方法.方法 应用基因芯片检测255份51名拉米夫定抗乙肝病毒治疗自愿者不同阶段服药的临床标本及145份HBV DNA阴性血清耐药突变,并对突变进行分析.结果 经一年药物治疗10名患者产生耐药突变,耐药率19.6%(10/51),产生突变阳性标本病毒载量>105拷贝/ml.药物治疗后产生突变>6个月.10例突变病毒株中,552密码子处突变9例,528密码子处突变3例,密码子555中未发现突变.5例血清存在混合感染,其中4例为野生型病毒与突变型的混合,野生型病毒所占比例皆在40%以下.1例血清出现在(4,4)位点的密码子ATT与(3,3)位点密码子TTG两种突变,两种突变类型病毒并行产生同步增长.(3,3)突变类型首次报道.结论 拉米夫定抗乙肝病毒治疗6个月以上易产生耐药,产生耐药病毒载量>105拷贝/ml.主要发生在YMDD区,且存在两种突变类型病毒的混合感染,以上结果对慢性乙肝患者用药具有指导作用.
郑昌华李彬斐林峰郑敏巧方合志陈弘蔡丽敏侯建毅
关键词:拉米夫定基因突变
人博卡病毒感染支气管上皮细胞生物学特征的研究被引量:6
2008年
目的研究人博卡病毒(HBoV)在呼吸道感染中的致病性及机制。方法采用人博卡病毒阳性标本感染健康人支气管上皮细胞,观察HBoV感染支气管上皮细胞后的生物学特征,并进行病毒空蚀斑、红细胞吸附抑制及免疫荧光测定。结果75%感染细胞变圆并堆积成葡萄状,伴随有坏死、破碎、脱落。病毒蚀斑测定出典型“猫头鹰眼”现象。红细胞吸附实验观察到90%以上红细胞附着感染支气管上皮细胞。荧光检测出在细胞核内具有典型荧光块。结论支气管上皮细胞可用于分离HBoV,HBoV感染支气管上皮细胞后能够在该细胞内增殖,并导致特征性生物学改变。本研究为今后人博卡病毒致病机制研究奠定基础。
林峰侯建毅郑敏巧吴锋曾爱平李桦郑昌华陈弘李旭阳饶高峰莫一涵黄恩佩
关键词:上皮细胞支气管
实时荧光定量PCR检测儿童下呼吸道感染的WU多瘤病毒
2012年
目的建立并应用检测儿童下呼吸道感染WU多瘤病毒(WU polyomavirus)的实时荧光定量PCR(real-time fluorescentquantitativePCR,FQ—PCR)方法。方法选择WU多瘤病毒的VP2基因作为检测的目标基因,设计FQ—PCR引物和检测探针,以重组质粒为标准品建立标准曲线,并对该方法的特异性、灵敏度、重复性进行评价;应用该方法对温州医学院附属温岭医院收集的临床下呼吸道感染患儿的痰液、咽拭子846份及血清标本846份进行定量检测。结果本研究建立FQ—PCR检测方法,质粒标准曲线的方差系数为0.998,灵敏度可达到50拷贝;应用该方法检测700份痰液标本,检测到7例阳性标本,146份咽试子标本中未检测到阳性标本,总阳性率为1.00%(7/700),846份血清标本未检测到阳性标本。结论本研究建立的rQ—PCR方法可以特异、快速、灵敏地对儿童下呼吸道感染的WU多瘤病毒进行定量检测;痰液标本较咽拭子或血清标本更适用于WU多瘤病毒感染的核酸检测。
林红霞郑昌华郑志辉欧阳后先郑敏巧吴锋林峰侯建毅吕建新
关键词:聚合酶链反应荧光抗体技术
WU多瘤病毒在中国浙江地区的发现与鉴定被引量:16
2008年
WU polyomavirus,which was firstly discovered in 2007,is a new human polyomavirus belonging to Polyomaviridae and containing circular double-stranded genomic DNA.In this study,the 278 clinical sputum specimens from children under 5 years old were collected from Wenzhou Medical College affiliated Wenling First Hospital,Zhejiang Province.Based on identification assay of WU polyomavirus previously reported,a WU polyomavirus was identified from clinical samples successfully,the positive rate was 0.4%.The sequences of PCR products were identical to that of VP2 gene and large T antigen gene derived from WU polyomavirus reported.The above results strongly suggested that the WU polyomavirus isolated was firstly found in Chinese children with acute lower respiratory tract infections.This study provides a firm basis for further research of WU polyomavirus.
林峰郑美云李桦郑昌华饶高峰郑敏巧吴峰曾爱平李旭阳侯建毅
关键词:WU多瘤病毒
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